Alegerea embrionului

Cultura embrionară

zona pellucida
Embrionii sunt cultivați în picături mici (20m l) de centru de cultură depus în partea de jos a unui vas Petri și acoperite cu ulei pentru a preveni evaporarea, pentru a limita schimbul de gaze și pentru a proteja împotriva contaminării. Cutiile sunt păstrate într-un incubator a cărei temperatură este setată la 37 ° C și al cărei aer este îmbogățit în CO2 (5%). Pentru a evita deranjarea lor, observarea embrionilor la microscop este limitată la strictul minim. Când embrionii trebuie să fie mutați sau schimbați mediul, aceștia sunt tratați cu ajutorul unui pipetă de sticlă foarte fină (dimensiunea unui embrion este de aproximativ o zecime de milimetru) sub un lupă binoculară echipat cu un plită, într-un mediu steril.

La sfârșitul 48 de ore de incubație aspectul oului fertilizat este deja destul de diferit. Este alcătuit din mai multe celule și înconjurat de o plic numit zona pellucida.

Este deja un embrion care poate fi transferat în uterul matern. Endometrul (căptușeala interioară a uterului) s-a pregătit pentru un posibil embrion.

La sfârșitul fertilizării, oul se împarte în 2 celule, apoi 4, apoi 8 și așa mai departe. După o săptămână vor exista aproximativ 200 de celule. Aceste diviziuni celulare vor continua apoi, oferind mii de celule care se vor combina pentru a forma conturul organelor viitoare.

Toate aceste etape, din ziua 1 (2 celule) până în luna 2, se numesc embrion. Ulterior, vorbim despre un făt, în care treptat contururile anterioare se transformă în organe finale (miliarde de celule).

StatusWhenRepresentationPhoto
Zigot (ovocit fertilizat)24 de ore după fertilizare
2 celule30 de ore după fertilizare
4 celule40 de ore după fertilizare
8 celule60 de ore după fertilizare
Morula96 de ore după fertilizare
Blastocist5 zile după fertilizare

În practică, în FIV, acestea sunt primele etape embrionare observate: la 2 zile după prezența gametilor, acestea sunt etape cu 4 celule în medie.

Dar cultura poate fi extinsă până la maximum 7 zile până la stadiul de blastocist.

După 2 zile, în 20% din încercări nu există embrion.

După 7 zile, în 35-40% din încercări, nu există blastocist.

Cauzele non-viabilității embrionare sunt:

• prezența oricăror anomalii cromozomiale,

• maturitatea ovocitelor care le-au furnizat,

• poate calitatea spermei.

Un sistem de clasificare pentru embrioni pe D2

Foarte imperfect, după 2 zile de cultură, având în vedere aspectul lor morfologic, embrionii din ovocitele imature pot fi identificați. În acest stadiu este destul de variabil și o putem descrie fără a deteriora celulele: numărul, dimensiunea, forma, aspectul celulelor, aspectul plicurilor, zona pellucida și norul cumulus, fragmentarea acestora etc.

Morfologia embrionului pe D2 a fost cel mai utilizat parametru de mai bine de 25 de ani.

Am reușit să definim un embrion „ideal” și diverse variante care sunt mai mult sau mai puțin îndepărtate de acesta; și le putem clasifica aproximativ în funcție de scoruri:

Punctaj folosit la laboratorul Eylau La Muette

Prima cifră: numărul de celule

La 48 de ore, embrionul are de obicei 4 celule, altele vor avea 2,3 sau 5.

Evaluarea este cea a numărul de celule: 4 celule la 48 de ore, 8 celule la 72 de ore ...

A doua figură: regularitatea celulei

De exemplu, celulele (blastomere) ale unui embrion cu 4 celule ar trebui să fie mărime identică.

Evaluarea este 1 pentru un embrion tipic și 2 pentru un tipice. Litera T este, de asemenea, utilizată pentru Tipic și litera A pentru Atipic.

A treia cifră: gradul de fragmentare

În timpul diviziunilor celulare se pot forma fragmente (bucăți mici de celule). Atunci când un embrion are o fragmentare de peste 50%, șansele sale de dezvoltare și implantare sunt reduse.

1: Rata de fragmentare a Mai putin decât 10%

2: rata de fragmentare între 10% și 50%

3: rata de fragmentare între 50% și 80%

4: rata de fragmentare mai mare de 80%

Astfel, un embrion decalitate excelentă, celulare regulate și nefragmentate vor fi evaluate cu 411, pe de altă parte, un embrion de calitate slabă, cu 4 celule neregulate și fragmentate va fi notat 423 sau 424.

Scorul embrionar în 4 puncte utilizat la IMR

Număr de puncte de observare Scor total1,2,3 sau 4 puncte
Embrioni divizați
da1 punct
Nu0 punct
Etapa diviziunii celulare
4 celule1 punct
Alte etape0 punct
Celule neregulate (dimensiune sau formă)
Absența1 punct
Prezenţă0 punct
Fragmentare (mai mare sau egală cu 20%)
Absența1 punct
Prezenţă0 punct