Prima identificare a unui diuretic (hidroclorotiazidă) în aplicarea părului într-un caz

Identificați și cuantificați hidroclorotiazida, un diuretic, în părul unui atlet cu un rezultat anormal în urină și determinați dacă concentrația găsită corespunde unei expuneri simple sau repetate.

identificare

Introducere

Comercializat singur (Esidrex ®) sau în combinație cu alte molecule, hidroclorotiazida este un diuretic din familia benzotiadiazinelor utilizat în tratamentul tensiunii arteriale crescute. Inhibă reabsorbția de sodiu și crește excreția urinară. Datorită puterii sale diuretice, hidroclorotiazida poate fi utilizată de anumiți sportivi pentru a slăbi (sport în categoria greutății) sau pentru a elimina mai repede agenții anabolizanți sau stimulatori. Este clasificată ca substanță interzisă de Agenția Mondială Antidoping (clasa S5. Diuretice și agenți de mascare).

Studiu de caz

Raportăm cazul unui înotător de elită cu un rezultat anormal pentru hidroclorotiazidă în urină (în ordinea pg/ml). Sportivul contestă rezultatul și neagă utilizarea voluntară a medicamentului. El recunoaște, totuși, că este posibilă utilizarea accidentală, deoarece un prieten de-al său este pe hidroclorotiazidă. Laboratorul a fost însărcinat să cerceteze părul pentru a stabili un profil de consum.

Metode

Nici o metodă de identificare a diureticului (diureticelor) în păr nu a fost publicată până în prezent și, prin urmare, nu a fost disponibilă nicio referință bibliografică. Pentru a putea interpreta rezultatele și a obține informații cu privire la detectabilitatea hidroclorotiazidei în păr, patru bărbați voluntari sănătoși au primit oral o tabletă de Esidrex de 25 mg și părul a fost colectat o lună mai târziu. În plus, zece voluntari supuși tratamentului terapeutic (doze de 6,5-12,5 și 25 mg pe zi) au fost incluși în acest studiu. O metodă cantitativă specifică a fost dezvoltată prin cromatografie lichidă cuplată la un spectrometru de masă tandem (LC-MS/MS). După incubare (50 ° C, 15 h) la pH 7,0 și adăugarea de hidroflumetiazidă, utilizată ca standard intern, proba este extrasă cu 5 ml de acetat de etil, apoi evaporată și preluată în 50 μL de fază mobilă (95/5, v/v, apă + 1 mM acetat de amoniu/MeOH + 1 mM acetat de amoniu). Tranzițiile utilizate pentru hidroclorotiazidă sunt m/z 296,1> 268,9 (cuantificare) și 296,1> 204,9 (confirmare) și pentru hidroflumetiazidă m/z 329,8> 302,9.