Diagnosticul și inocularea micorizei - jardins de France
Marie-Line Haimet
Micorize: Beneficiile unui diagnostic
Cunoscuți în principal pentru beneficiile pe care le aduc plantelor (îmbunătățirea nutriției apelor și mineralelor, stimularea apărării naturale etc.), ciupercile micorizice joacă, de asemenea, un rol important în calitatea solului, contribuind la creșterea structurării și stabilității acestora. Stabilirea unei simbioze micorizale funcționale este însoțită și de o creștere a microflorei rizosferice stimulată de calitatea și cantitatea exsudatelor radiculare sintetizate. Aceste observații fac din ciupercile micorizice un bun indicator al calității și sănătății biologice a solurilor. Diagnosticul populației de ciuperci micorizale, efectuat de un laborator specializat, este un instrument relevant pentru a gestiona și orienta mai bine practicile culturale favorabile vieții microbiene subterane.
Principalele metode de control
Ce metode analitice utilizați pentru a detecta, cuantifica și identifica flora micoriză ?
Evaluarea nivelului de colonizare a rădăcinilor
Analiza se referă la observarea unui eșantion reprezentativ de rădăcini care, în funcție de tipul de micorize studiate (ecto sau endomicorize), vor fi spălate în prealabil (Garbaye, 1990), subțiate, colorate (Phillips și Haymann, 1970) apoi observate sub o lupă binoculară sau microscop. Rădăcinile ectomicorizale sunt ramificate, înconjurate de o manta fungică și lipsesc firele de păr, în timp ce pentru ciupercile endomicorizale VA, rădăcinile micorizice au structuri interne tipice (arbuscule, vezicule, miceliu fungic).
Frecvența micorizării este cel mai frecvent utilizat punct final. Permite evaluarea rapidă a procentului de rădăcini micorizice prezente într-un eșantion, dar nu ia în considerare intensitatea micorizării rădăcinilor. Rata micorizării estimează procentul lungimilor rădăcinii endomicorizice. Colonizarea rădăcinilor de către ciupercă poate fi evaluată prin metoda intersecțiilor de linie dezvoltată de Giovanetti și Mosse. Folosind o grilă de numărare, vor fi identificate aproximativ 100 de puncte de observare și se va nota prezența sau absența structurilor fungice în rădăcini. Acest diagnostic se aplică probelor de rădăcini din culturi de câmp sau culturi fără sol pe substrat inoculat cu ciuperci micorizale. Această analiză demonstrează prezența propagulelor infecțioase ale ciupercilor micorizice în mediul de cultură. De asemenea, este posibil să se evalueze dacă condițiile de cultivare (compoziția suportului, practicile de cultivare etc.) sunt favorabile dezvoltării corecte a simbiozei.
Enumerarea sporilor
Pentru ciupercile endomicorizate, se poate efectua un număr de spori pe probe de sol, mediu de cultură inoculat, inoculă microbiană sau orice alte produse îmbogățite în spori (îngrășământ, amendament).
Se efectuează o extracție umedă urmată de cernere. Refuzurile de sită între 40 și 250 microni sunt observate sub o lupă binoculară și sporii numărați. Identificarea genurilor fungice, pe baza criteriilor morfologice, poate completa enumerarea. De asemenea, se poate verifica viabilitatea sporilor izolați, precum și capacitatea lor de a germina.
Test MPN (cel mai probabil număr)
Acest test este utilizat în mod obișnuit pentru a cuantifica populațiile microbiene (bacterii, ciuperci saprofite). A fost adaptat ciupercilor endomicorizale (Gianinazzi-Pearson și colab., 1985) și face posibilă cuantificarea numărului de propagule infecțioase dintr-o probă. Se bazează pe diluții succesive ale probei care urmează să fie numărate și apoi pe cultura, în condiții controlate, a plantelor gazdă inoculate cu fiecare diluție efectuată. La sfârșitul culturii, monitorizarea micorizării plantelor face posibilă estimarea numărului de propagule micorizale viabile și infecțioase prezente în proba inițială. Acest test poate fi efectuat pe un eșantion de sol, un mediu de cultură inoculat sau un inocul micorizat. Testul MPN și rata sau frecvența micorizării sunt analize complementare pentru a ghida fermierul asupra practicilor culturale pe care să le adopte pentru a promova creșterea potențialului micorizant al complotului său și dezvoltarea unei simbioze micorizice bine stabilite.