Informații bibliografice din Biblioteca Germană - PDF descărcare gratuită
2 Informații bibliografice de la Deutsche Bibliothek Deutsche Bibliothek listează această publicație în Deutsche Nationalbibliografie; Date bibliografice detaliate sunt disponibile pe internet la adresa. Prima ediție a editurii: Deutsche Veterinärmedizinische Gesellschaft Service GmbH, Gießen Tipărit în Germania ISBN Editura: DVG Service GmbH Frankfurter Straße Gießen 0641 /
3 De la Institutul de Anestezie Experimentală al Centrului de Anestezie și Reanimare al Universității Johann Wolfgang Goethe din Frankfurt am Main Supervizor: Prof. Dr. H. Förster Trimis de Institutul de Biochimie și Endocrinologie al Universității Justus Liebig Giessen reprezentat de: Prof. Dr. W. Schoner Distribuția masei moleculare a amidonului hidroxietilic (HES) stocat în splină și ficat la șobolani după administrare intravenoasă Investigații analitice polimerice prin cuplarea cromatografiei de excludere și a detectării luminii împrăștiate cu laser cu unghi multiplu DISERTARE INAUGURĂ pentru obținerea unui doctorat în secția de medicină veterinară a Universității Justus Liebig Gießen Inscrisa de medicul veterinar MARGIT WAGENBLAST de la Aalen Gießen 2004
4 Cu aprobarea Departamentului de Medicină Veterinară a Universității Justus Liebig Gießen Decan: Prof. Dr. Dr. h.c. B. Hoffmann Raportor 1: Prof. Dr. H. Förster 2. Raportor: prof. Dr. W. Ziua frumoasă a examenului oral: 19 iulie 2004
5 Cuprins Lista abrevierilor I Introducere 1 I.1 Înlocuitori ai volumului coloidal 1 I.1.1 Principiu activ 4 I.2 Caracterizarea polimerului HES 5 I.2.1 Înlocuire 5 I.2.2 Distribuția masei molare a HES 6 I Media greutății masei molare (Mw) 7 I Media numărului masei molare (Mn) 8 I Polidispersitate 8 I Masă molară la vârf maxim (Mp) 8 I.3 Utilizarea HES la animale 9 I.4 Farmacocinetica și metabolismul HES 12 I.5 Ediția 19 II Material și metode 20 II.1 Soluții de perfuzie 20 II. 2 Experimente pe animale 20 II.2.1 Specii de animale și condiții de adăpostire 20 II.2.2 Inserarea cateterului 21 II.2.3 Infuzie 21 II Procedura în timpul perfuziei 21 II Determinarea cantităților de perfuzie 22 II.2.4 Configurare experimentală 22 II.3 Metode de detectare biochimică 24 II.3.1 Concentrația hemoglobinei 24 II.3.2 Hematocrit 24 II.4 Determinarea distribuției greutății moleculare 25 II.4.1 Context teoretic 25 II Cromatografie de excludere 25 II Detecția greutății moleculare 25 II.4.2 Dispozitive și coloane de separare 29 I
7 Cuprins III.5.4 III III III IV IV.1 IV.2 IV.2.1 IV.2.2 V VI VII VIII IX Distribuția greutății moleculare în ser, ficat și splină în comparație 61 Valori ale serului, ficatului și splinei după perfuzia cu HES 450/0,7 61 Valori ale serului, ficatului și splinei după perfuzia cu HES 200/0,5 64 Valori ale serului, ficatului și splinei după perfuzia cu HES 130/0,4 67 Discuție 69 Model animal și observații clinice 69 Distribuția masei molare a HES 71 Dezvoltarea metodelor de determinare a masei molare a HES 71 HES în ser, ficat și splină 74 Sumar 81 Sumar 83 Bibliografie 85 Lista cifrelor 100 Lista tabelelor 103 Anexa 104 Mulțumiri III
8 Lista abrevierilor Lista abrevierilor Å Ångström A 2 Fig. SIDA Anon. B sau al doilea coeficient virial Sindromul de imunodeficiență dobândită prin imagine, boală ca urmare a infecției cu virusul imunodeficienței umane Coeficientul de determinare anonim sau C grade Celsius 14 C atom de carbon marcat radioactiv c concentrație C2, C3, C6 atom de carbon la poziția 2, 3 sau 6 a inelului de glucoză aprox. aproximativ cm centimetru d diametru d zi (zile) dh asta înseamnă Da Dalton dl decilitru dn/dc creșterea indicelui de refracție DS gradul de substituție e baza logaritmului natural și colab. et alii etc. et cetera EWG Comunitatea Economică Europeană FELASA Federația Societăților Europene pentru Laboratorul Știința Animalelor Federația Asociațiilor Europene a Științei Animalelor g grame g accelerare centrifugă GPC gel permeație cromatografie i
9 Lista abrevierilor h Hb HES HES-Inf. HKT HPLC HPLC-SEC HsdCpb: WU I 0 Inf. Esp. IU k K kcal kda kg L LALLS LDH Ln M MALLS max. mg min MJ ml mm mmhg oră (ore) conținut de hemoglobină hidroxietil amidon perfuzie HES hematocrit cromatografie lichidă de înaltă performanță cromatografie lichidă de înaltă performanță excludere cromatografie tulpină de șobolan (Wistar Unilever) în funcție de intensitatea nomenclaturii infuziei de lumină incidentă, în special unități internaționale de eliminare constantă kilogram litru-kilogram unghiular calorii Difuzarea luminii cu laser (examinări cu lumină dispersată cu unghi mic) Lactat dehidrogenază logaritm natural Masă molară Difuzarea laserului cu unghi mic (examinări cu dispersie a luminii cu unghi mic) miligrame minute megajuli mililitri milimetri milimetri milimetri de mercur II
10 Lista abrevierilor Mn Numărul mediu al maselor molare Mp Masa moleculară în vârful maxim al diagramei de eluare MS Înlocuirea moleculară Mw Media greutății maselor molare Mw/Mn Cocient de polidispersitate n Număr de azot N A NaCl nm Nr. O 2 p p.a. PAS PC PVP P θ r R θ Avogadro clorură de sodiu constant număr nanometru probabilitate oxigen per analiză Acid de perioadă SCHIFF (acid periodic), reacție de ex. pentru detectarea polizaharidelor Calculator personal Polivinilpirolidonă Funcția de dispersie a particulelor Raza, distanța detectorului de volumul de împrăștiere Excesul raportului Rayleigh R Intensitate de dispersie (intensitate absolută de împrăștiere R θ, intensitate de împrăștiere a soluției coloidale R θ l, intensitate de dispersie a solventului R θ0) RES ) s. vezi deviația standard SD Cromatografie de excludere a mărimii SEC (cromatografie de excludere a mărimii) SEC-MALLS-HPLC cromatografie de excludere a mărimii lichidului de înaltă performanță cu examinare cu lumină dispersată cu unghi multiplu laser sin sin așa-numitul
11 Lista abrevierilor t Punct în timp, tabel etc. și alte unități U/L pe litru rpm rotații pe minut v.a. în special volumul V versus Y 0 Y i de ex. V D θ λ valoare de ieșire fictivă în orice moment din timp t de exemplu unghiul de decalare a volumului (al luminii împrăștiate) lungimea de undă µ micro µg microgram µl microlitru Ø medie iv
17 Introducere I.2 Caracterizarea polimerului HES Amidonul hidroxietilic este derivat din amilopectina glucoză polizaharidică cu lanț ramificat pe bază de plante, care este strâns legată de glicogenul endogen. Amilopectina trebuie modificată chimic pentru a putea produce soluții stabile ale căror concentrații sunt eficiente din punct de vedere oncotic. Acest lucru se întâmplă de exemplu prin introducerea grupărilor hidroxietil, care sunt legate de grupările hidroxi ale atomilor de carbon C2, C3 și C6 ai inelului de glucoză (vezi Fig. I-1). Distribuția greutății moleculare și substituția amidonului caracterizează HES pentru utilizare clinică. În consecință, HES se caracterizează prin greutatea sa moleculară medie și substituția sa. HES 200/0,5 este un HES cu o greutate moleculară medie (Mw) de Daltoni și o substituție molară (MS) de 50%. Diferitele preparate sunt clasificate pe de o parte în funcție de Mw (greutate moleculară mare (
200 kda) și greutate moleculară mică (
70 kda)) pe de altă parte, în funcție de SM (foarte substituit (0,7), mediu substituit (0,5) și slab substituit (0,4)). La fel ca toți ceilalți coloizi sintetici, HES, deoarece este conținut în soluțiile de înlocuire a volumului coloidal, nu este o substanță uniformă, ci constă din multe molecule diferite, cu o gamă considerabilă de distribuție a greutății moleculare și distribuția substituenților. Preparatele HES care pot diferi semnificativ în specificațiile lor pot fi, prin urmare, ascunse sub denumiri comparabile. I.2.1 Substituție După hidroliza parțială, substanța de pornire, amidonul, se modifică prin substituirea grupărilor hidroxil pe reziduurile de zahăr cu grupări hidroxietil. Modificarea structurală duce la două modificări esențiale și de dorit ale proprietăților [38]: 5