Lexicon de biologie electroforeză SDS; Forum Biologie

bilufi

reptilă

bună!
Trebuie să scriu un raport despre electroforeza SDS și ar trebui să includ o scurtă parte teoretică. Am scris ceva acum, dar nu sunt sigur dacă puteți face acest lucru. Are cineva experiență și poate citi despre asta?

Electroforeza SDS este o metodă de separare a proteinelor care se bazează pe diferitele lor mase molare.
SDS înseamnă dodecil sulfat de sodiu (dodecil sulfat de sodiu) și este o moleculă detergentă anionică cu un grup nepolar mare și un grup polar mic.
În cazul unei proteine, calcul nepolar indică spre interior, zona polară spre exterior. SDS se leagă de proteină astfel încât proteinele din probă să fie încărcate negativ din cauza unei remodelări. Complexele SDS-proteine ​​migrează apoi către polul pozitiv din câmpul electric.
Electroforeza are loc într-un gel de poliacrilamidă. Acesta conține pori din cauza cărora are loc separarea proteinelor. Proteinele mai mari trebuie mai întâi să împingă porii în afară pentru a difuza prin gel. Acest lucru durează mai mult, astfel încât se produce separarea mărimii particulelor.
După separare, proteinele pot fi colorate cu albastru Coomassie direct în gel.

Aș fi recunoscător pentru critici constructive,

Moderator

bilufi

reptilă

Da OK. Deci chestia despre „formare” este cu adevărat o prostie. „Exteriorul” a fost de fapt legat de „încărcat negativ”.
Dar apoi voi schimba asta.
Este „raportul de încărcare” un termen fix?

Este mai bine așa:

În cazul unei proteine, zona nepolară se îndreaptă spre interior, zona polară spre exterior. Proteinele se denaturează și SDS se leagă de ele, astfel încât proteinele din probă sunt încărcate negativ în aceeași măsură.

Moderator

bilufi

reptilă

Thorsten 1978

reptilă

Aș avea o explicație pe tema „formării”, „denaturării” și „raportului masă/încărcare”, ceea ce cred că este destul de înțeles. Aș putea să o rezum în propriile mele cuvinte, dar explicația din cartea „Bioanalytik” de Friedrich Lottspeich mi se pare foarte bună. Prin urmare, în acest moment, totul este un citat:

"SDS este un detergent anionic și acoperă încărcătura intrinsecă a proteinelor atât de eficient încât micelele cu o sarcină negativă constantă pe unitate de masă sunt create cu aproximativ 1,4 g SDS per g proteină. În timpul preparării probei, probele sunt încălzite la 95 ° C cu un exces de SDS încălzite și structurile terțiare și secundare dizolvate prin divizarea legăturilor de hidrogen și întinderea moleculelor.Ponturile de sulf dintre cisteine ​​sunt împărțite prin adăugarea unui compus tiol reducător, de exemplu ß-mercaptoetanol sau ditiotreitol.Catenele de aminoacizi întinse încărcate cu SDS formează elipsoizi. "

---