Screening rapid fără probleme pentru SARS-CoV-2 în salivă cu LAMP-Cas13; Știri-Medical
Disclaimer: Această pagină este o traducere automată a acestei pagini inițial în engleză. Vă rugăm să rețineți, deoarece traducerile sunt generate automat, nu toate traducerile vor fi perfecte. Acest site web și paginile sale web sunt destinate citirii în limba engleză. Orice traducere a acestui site și a paginilor sale web poate fi inexactă și inexactă, în totalitate sau parțial. Această traducere este furnizată într-o practică.
Deoarece pandemia bolii coronavirus din 2019 (COVID 19) continuă să-și exercite influența asupra lumii, sunt necesare urgent metode de testare rapidă pentru detectarea ARN pentru controlul bolii.
O nouă lucrare care a apărut ca o pre-imprimare pe serverul medRxiv * a descris în decembrie 2020 un test validat al acidului nucleic pe probe de salivă. În principiu, acest test folosește amplificarea acidului nucleic viral cu următoarea detecție mediată de Cas13, în combinație cu liza probei prin reactivi solizi ieftini pe raft, fără a fi necesară extracția ARN-ului.
Diagrama eșantionului DISCOVER pentru a satisface fluxul de lucru. Credit de imagine:
Acest test are sensibilitate și specificitate ridicate și poate fi utilizat cu mai multe sonde CRISPR pentru a găsi o genă umană sau alți agenți patogeni cu virusul țintă. Numit Discover (Diagnostic cu înregistrarea enzimei Coronavirus), acesta este un test SARS-CoV-2 care nu necesită extracția ARN-ului. În acest sens, este diferit de alte teste bazate pe CRISPR, cum ar fi DETECTR și STOPCovid V2, care utilizează LED și Cas12.
În al doilea rând, aflați evită eșantionul căilor respiratorii superioare, fiind bazat pe specimene de salivă. A fost descrisă utilizarea probelor de salivă, pentru a evita contactul lucrătorului medical-pacient. Acestea sunt în concordanță cu tampoanele nazofaringiene în 97% din cazuri, atunci când sunt verificate prin reacție în lanț cu transcriptază inversă polimerază (dreapta-qPCR).
Provocări în qPCR normal
După infecția cu sindrom respirator acut sever coronavirus-1 (SARS-CoV-2), există o fază asimptomatică în care virusul se reproduce în celulele gazdă infectate și se răspândește în alte părți ale plămânilor și plămânilor.celulele părului căilor respiratorii nazale În faza următoare, producția virală devine exponențială și persoana devine infecțioasă, deși adesea asimptomatică sau presimptomatică.
Odată ce faza simptomatică se instalează, încărcătura virală în căile respiratorii superioare scade de obicei de la vârf, iar ratele pozitivității acidului nucleic sunt, de asemenea, mai mici. Deoarece aceasta este faza în care se observă regimuri de control maxime, multe teste sunt susceptibile de a da rezultate fals pozitive.
Mai mult, testele normale, cum ar fi PCR cantitativ (qPCR) necesită instalații sofisticate, personal instruit și consumă mult timp. Timpul îndelungat necesar pentru ca rezultatul testului să fie returnat face ca aceste teste să nu fie adecvate pentru diagnosticarea POC.
Necesitatea testelor rapide POC
Cel mai eficient mod de a întrerupe rețeaua de transmisie este prin verificarea regulată folosind verificarea rapidă cu preaviz scurt (POC). Din nou, testarea rapidă ar putea fi utilizată pentru a identifica pozitive la nivel de comunitate, care sunt confirmate de teste mai specifice după transfer.