Suplimente alimentare comparabile 2012 - Wiley Analytical Science
Prezentare generală
Afișare de niveluri de izoflavonă prietenoasă consumatorului
Analiza și cuantificarea izoflavonelor pot fi efectuate în moduri diferite, în funcție de metodologia aleasă, care, din punctul de vedere al consumatorului, poate duce la informații netransparente cu privire la nivelurile de izoflavone și, în consecință, face mult mai dificilă compararea obiectivă a produselor. Pentru suplimentele alimentare cu conținut de izoflavonă special scris, este, prin urmare, în mare parte neclar dacă aceste conținuturi se referă la concentrații de fapt bioactive sau dacă acestea sunt calculate numai din suma conjugatelor de izoflavonă.
Izoflavonele din soia
Aparținând fitoestrogenilor, izoflavonele denotă un grup de constituenți ai plantelor polifenolice, cărora li se atribuie un efect slab estrogenic datorită asemănării lor structurale chimice cu 17-β-estradiolul. Datorită acestor proprietăți, acestea oferă un potențial de reducere a bolilor de cancer hormonodependente, a bolilor cardiovasculare și a osteoporozei și sunt destinate să servească drept medicament alternativ natural, în special pentru ameliorarea plângerilor menopauzei [1-4].
Pentru soia, care este probabil cea mai importantă sursă de izoflavone din dieta noastră, putem distinge trei agliconi izoflavonici diferiți din punct de vedere structural (daidzeină, gliciteină și genisteină), care pot fi prezenți și sub formă de β-glicozide sau mai esterificați ca esteri malonilici sau acetilici ai glicozidelor . Pentru fiecare aglicon există încă trei conjugate de izoflavonă, ceea ce duce la un total de 12 forme posibile de izoflavonă pentru soia.
În boabele de soia neprelucrate, izoflavonele se găsesc în principal sub formă de glicozide și ca esteri de malonil, prin care prelucrarea ulterioară (de exemplu, încălzirea umedă/uscată) poate modifica fundamental această distribuție tipică, care cu intensitatea adecvată (de exemplu, procese biochimice, cum ar fi fermentația) ) poate duce la degradarea completă a agliconilor liberi [5-6].
Analiza agliconilor izoflavonei totale
De asemenea, trebuie să se țină seama de faptul că numai agliconilor li se atribuie efecte bioactive [7], care ar trebui să fie un aspect decisiv pentru evaluare, în special pentru produsele cu conținut special de izoflavonă publicitate (de exemplu, suplimente alimentare). Pentru a permite o comparație obiectivă (și orientată spre consumator) a produselor, pare evident să se prezinte conținut de izoflavonă pe baza agliconilor (bioactivi) totali.
Pentru analizele care calculează numai conținutul de izoflavonă ca sumă a conjugaților individuali (mai grei) (de exemplu, după extracția solventului), conversia ulterioară în echivalenții corespunzători de aglicon oferă o posibilă alternativă pentru o reprezentare „nealterată” a concentrațiilor bioactive reale. De asemenea, trebuie menționat aici că esterii malonil și acetil au, în special, o stabilitate scăzută și pot fi deja transformați/degradați în timpul prelucrării probelor.
O modalitate mai robustă de cuantificare, pe de altă parte, este utilizarea protocoalelor de analiză hidrolitică în care, după hidroliza acidă, bazică sau enzimatică (β-glucuronidază, celulază, β-glucozidază), conjugații izoflavonei sunt transformați cantitativ în glicozide și/sau agliconi mult mai stabili (în funcție de hidroliza aplicată) și în consecință cuantificată ca atare [8].
În funcție de diferiții parametri în timpul prelucrării eșantionului (alegerea solventului, tehnica de extracție, protocoale de hidroliză etc.), există diverse metode „optime” care duc la rezultate mai mult sau mai puțin comparabile, cu conținutul total de aglicon analizat/calculat ca bază de referință ca o comparație obiectivă ar trebui să permită.
Luând în considerare această problemă, am dezvoltat un protocol pentru analiza agliconilor izoflavonei totale pentru diverse alimente „pe bază de soia” (boabe de soia, lapte, iaurturi, suplimente alimentare) [9-10]. Într-o metodă în două etape, materialul de probă a fost extras mai întâi, extractele care conțin izoflavonă apoasă organică obținute (Fig. 1a) apoi tamponate și pentru hidroliza enzimatică (hidroliză indirectă fără matrice de probă) cu β-glucuronidază din Helix pomatia (EC 3.2.1.31, obținută din Melc roman) incubat.
O incubație peste noapte a dus la degradarea completă a tuturor conjugatelor de izoflavonă (glicozide și esteri), cu hidrolizate în care puteau fi detectate numai agliconii totali liberi (Fig. 1b). Cele trei aglicone au fost cuantificate utilizând UPLC (Waters Acquity Ultra Performance LC) și detectarea UV la 260 nm [9-10].
Suplimente alimentare comparabile?
Discuțiile/publicațiile despre efectele izoflavonelor care promovează sănătatea au fost urmate în curând de o gamă largă de suplimente alimentare comerciale (pe bază de soia sau trifoi roșu) cu conținut de isoflavonă publicitate special, care sunt destinate a fi utilizate în special pentru ameliorarea simptomelor menopauzei. În afară de diferitele forme de administrare (tablete, capsule, pulbere instantanee, preparate lichide), utilizarea intenționată efectivă (numai suplimentarea cu izoflavonă sau multipreparate cu vitamine adăugate), dozele propuse (mg de isoflavone pe capsulă pe zi) și ingredientele (extracte, concentrate care conțin izoflavonă, " încapsulări pure ”), în special specificația ambiguă a conținutului de izoflavonă, face dificilă o comparație obiectivă a produselor pentru astfel de preparate.
În general, este dat doar conținutul total de izoflavone (de exemplu, mg izoflavone de soia pe capsulă); Cu toate acestea, este în mare parte neclar dacă acestea sunt într-adevăr concentrații bioactive. Având în vedere această problemă, totalul agliconilor a fost analizat pentru diferite suplimente alimentare (de la farmacii, farmacii etc.) și comparat cu nivelurile specificate de izoflavonă (cu etichetarea produselor prietenoasă consumatorului, nivelurile ar trebui să se potrivească!).
Cu toate acestea, agliconele totale după hidroliza enzimatică au arătat un conținut prea mic pentru toate suplimentele alimentare examinate, cu unele abateri negative semnificative; adică cantitatea eficientă bioactiv (agliconi) a fost întotdeauna mai mică decât eticheta promisă (doar 40-95% din concentrațiile specificate, Fig. 2). Explicația pentru aceste abateri a fost găsită în cele din urmă atunci când ne uităm la distribuția tuturor formelor de izoflavonă, deoarece acestea erau originare din probe. Extractele (amprenta izoflavonei înainte de hidroliză) conțineau predominant glicozidele și esterii „mai grei” decât formele predominante de izoflavonă (de exemplu, supa nr. 7, Fig. 3a), deși numai două preparate (supa nr. 6,9, Fig. 3b) s-au putut detecta cantități semnificative de agliconi liberi [9].
Ca rezultat, (majoritatea) producătorilor calculează nivelurile de izoflavonă specificate ca suma conjugatului individual de izoflavonă (factor 1,6-2,0 mai greu decât agliconii), ceea ce are ca rezultat și discrepanțe cu totalul agliconelor analizate. Porțiunea „zahăr” inactivă este, prin urmare, inclusă în conținutul specificat, care la rândul său (pentru consumator) „simulează” o concentrație bioactivă aparent mai mare.
Chiar dacă pachetul promite un conținut mai mare, acest lucru nu înseamnă neapărat că și concentrația bioactivă trebuie să fie mai mare. Mai mult, trebuie, de asemenea, menționat aici că calculul utilizând conjugatele nu trebuie privit ca „greșit” sau „înșelătorie”, deoarece se referă la formele de izoflavonă native ale produsului și este doar un tip ambiguu de cantitate.
concluzie
Deoarece, pe lângă preț, numai conținutul de izoflavonă declarat poate fi utilizat pentru decizia de cumpărare pentru astfel de suplimente alimentare (și ar trebui să se presupună de fapt cantități bioactive), o specificație obiectivă și orientată spre consumator este în prim plan aici, iar calculul conținutului pe baza totalului Aglycone pare a fi cea mai ușoară și mai practică metodă/soluție în acest sens.
[1] Adlercreutz H.: The Lancet Oncology 3, 364-373 (2002)
[2] Wroblewski Lissin L. și Cooke J.P .: Journal of the American College of Cardiology 35, 1403-1410 (2000)
[3] Wuttke W. și colab.: Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology 83, 133-147 (2002)
[4] S etchell K.D.R. și Lydeking-Olsen E.: Revista Americană de Nutriție Clinică 78, 593S-609S (2003)
[5] Wang H.-J. și Murphy PA: Revista de chimie agricolă și alimentară 42, 1666-1673 (1994)
[6] Coward L. și colab.: The American Journal of Clinical Nutrition 68, 1486S-1491S (1998)
[7] Setchell K.D.R. și colab.: Journal of Nutrition 131, 1362S-1375S (2001)
[8] Schwartz H. și Sontag G.: Analytica Chimica Acta 633, 204-215 (2009)
[9] Fiechter G. și colab.: Analytica Chimica Acta 672, 72–78 (2010)
[10] Fiechter G. și colab.: Food Research International (în presă) doi: 10.1016/j.foodres.2011.03.038 (2011)
Ao. Univ. Prof. DI Dr. Helmut K. Mayer; DI Gregor Fiechter