Terapie bazată pe celule pentru insuficiența cardiacă la șobolan Thoracotomy dublu pentru infarct miocardic și
rezumat
Implantarea unei biogrefe pentru tratarea infarctului miocardic indus de ligatura LAD într-un model de rozătoare este necesară în mod convențional pentru cele două operații pe cord deschis. Pentru a reduce mortalitatea și a oferi condiții optime pentru atașarea biomaterialelor gelatinoase solide și asociate celulelor, au fost dezvoltate proceduri minim invazive.
Abstract
Introducere
Ligarea arterei coronare descendente anterioare stângi (DAL) este un standard de aur pentru IM la modelele animale mici, care are ca rezultat infarctul transmural și o cicatrice matură. Terapia celulară aplicată în faza cronică a IM necesită o a doua intervenție chirurgicală. O sternotomie pe linia mediană este de obicei efectuată pentru a permite injecția intramiocardică a implantării celulare sau a biogrefelor epicardice. Aceste proceduri chirurgicale invazive cresc rata mortalității postoperatorii, timpul de recuperare, durerea și riscul de infecție. Abordarea minim invazivă prezentată aici nu numai că previne o astfel de părtinire, dar oferă și o accesibilitate optimă a inimii pentru aplicarea tratamentului. IM și implantarea epicardică a celulelor asociate cu o biomatrică de tip gel se efectuează pe o inimă care bate prin toracotomie intercostală stângă.
Abonament necesar. Vă rugăm să recomandați JoVE bibliotecarului dvs.
Protocol
NOTĂ: Șobolanii masculi și femele Lewis, 200-220 g au fost adăpostiți în condiții standard de laborator (12 ore ciclu de lumină și întuneric, apă ad libitum și hrană, cușcă IVC). Toate animalele au fost tratate în conformitate cu recomandările FELASA și legea elvețiană privind protecția animalelor.
1 Pregătirea celulelor: izolarea celulelor stem mezenchimale de măduva osoasă
2 Prima toracotomie și ligatura LAD
3. Administrarea picardică a celui de-al doilea tratament cu toracotomie
Abonament necesar. Vă rugăm să recomandați JoVE bibliotecarului dvs.
Rezultate reprezentative
Toate animalele s-au recuperat în decurs de 1 oră după toracotomie. Rănile s-au vindecat repede. Nu s-a observat nicio infecție sau edem.
Toracotomia dublă stângă a permis accesul optim la inimă (Figura 1). Durerea și mortalitatea postoperatorie au fost scăzute. Animalul s-a recuperat rapid după operație și s-a îngrășat (figura 2). Procentul de supraviețuire Kaplan Meir a fost de 96% pentru prima toracotomie. Patru șobolani peste 104 au murit în următoarea aplicare de 24 de ore de tratament printr-o a doua toracotomie. Procentul de supraviețuire Kaplan-Meir variază de la 100% atunci când animalul a primit oa doua toracotomie, dar nu s-a făcut tratament (fals), 96% din grupul de lipici MSC și fibrină sau 86% când animalul a primit MSC injectat direct în interiorul miocardului (figura 3).
Evaluarea ecocardiografică Mode M efectuată la 2 săptămâni după ligatura LAD a arătat o reducere a fracției de scurtare (FS) de la 44 ± 3% la 22 ± 4%. Reprezentarea frecvenței FS înregistrată la 104 animale la două săptămâni după ligatura LAD a furnizat dovezi ale repetabilității metodei (Figura 4). Coeficientul de variație (CV) a fost de 17%. În plus, ecocardiografia efectuată la 2 și 6 săptămâni după ligatura LAD a arătat progresia către insuficiența cardiacă sugerată de fracția de ejecție redusă (EF) și de volumul crescut al LV în diastolă și sistolă. (figurile 4 și 5). Dezvoltarea unui infarct transmural în grupul operat simulat a fost confirmată de colorarea Goldner a secțiunilor transversale ale inimii (Figura 6).
