Dezvoltarea unei metode LCMSMS pentru analiza agenților polari de protecție a culturilor și a acestora
1 Weihenstephan Science Center for Nutrition, Land Use and Environment Faculty of Biosciences Departamentul de chimie ecologică și analiză de mediu Universitatea Tehnică din München Dezvoltarea unei metode LC/MS/MS pentru analiza ingredientelor active ale pesticidelor polare și a metaboliților acestora în culturi Monica Elena Pantiru Copie completă a facultății Centrul de Științe Weihenstephan pentru Nutriție, Utilizarea Terenului și Mediu al Universității Tehnice din München pentru a obține diploma universitară de disertație aprobată de doctor în științe naturale. Președinte examinator al disertației Univ.-Prof. Dr. rer. nat. habil. W. Huber 1. Prof. univ. Dr. rer. nat. Dr. H. c. (RO) A. Kettrup Univ. 2 Prof. univ. Dr. rer. nat. Dr. agr. habil. H. Parlar Disertația a fost trimisă la Universitatea Tehnică din München la data de și acceptată de Weihenstephan Science Center for Nutrition, Land Use and Environment pe.
2 Mulțumiri Prezenta lucrare a fost realizată în perioada octombrie 2001 - iulie 2004 la Institutul de chimie ecologică, Centrul de cercetare GSF pentru mediu și sănătate. Aș dori să mulțumesc Serviciului German de Schimb Academic pentru finanțare. Prof. Dr. Dr. H. c. Antonius Kettrup Vă mulțumesc foarte mult pentru subiectul interesant, oportunitățile bune de muncă în institut, precum și pentru sprijinul său binevoitor din toate punctele de vedere. Dr. Mulțumirile mele speciale se adresează Dieter Martens pentru buna supraveghere a lucrării, discuția științifică, disponibilitatea constantă de a ajuta, diferitele suporturi, corectarea atentă a acestei lucrări și bucuria sa de predare. Dr. Aș dori să-i mulțumesc lui Patrick Bohn pentru sfaturi, discuțiile în curs și cooperarea foarte bună. În special, aș dori să le mulțumesc dnei Vera Meyer și domnului Stephan Forster pentru sprijinul lor activ în prelucrarea probelor și buna cooperare. Karin Fischer, Dr. Jutta Lintelmann, Dr. Georg Matuschek, Dr. Aș vrea să mulțumesc în special lui Willibald Kamm, Agnes Fekete și Dariusz Antkowiak pentru atmosfera excelentă de lucru.
5 Cuprins 1 Introducere Scopurile lucrării Stadiul cercetării și principiile teoretice Dezvoltarea multimetode Etape ale secvenței în metoda clasică multi-analiză pentru pesticide Pregătirea probelor Extracție Purificare Analiza instrumentală Metode cromatografice Alte metode de determinare Spectrometrie de masă Tehnici de cuplare ESI APCI APPI sisteme de analiză de masă Accelerarea rezoluției spectrometrului de masă MS/MS Materiale și metode MS Echipamente utilizate Materiale utilizate Metode statistice și matematice Metode statistice Metode matematice Informații suplimentare Rezultate Separarea și detectarea Optimizarea ionizării. 47
6 5.1.2 Determinarea celor mai intensive surse și a ionilor fiici și optimizarea parametrilor de detecție dependenți de substanță Selecția sursei de ionizare (comparație ESI-APCI) Metodă HPLC Testele preliminare cu HPLC-DAD Faza mobilă Coloane de separare Gradienți HPLC Fereastra de scanare Creșterea sensibilității Compararea modificatorilor Volumele injecției Date caracteristice ale analizei instrumentale Determinarea Limita de detecție și limita de cuantificare Funcții de calibrare Test de precizie a metodei LC/MS/MS Optimizarea extracției Testele preliminare Influența valorii pH Solvent Extracția matricelor grase Extracția matricelor uscate Purificarea extractelor Purificarea extractelor de acetonă Purificarea GPC Testarea diferitelor faze solide pentru purificarea extractului Influența matricei Purificarea extractului de metanol Hydromatrix) Oasis HLB EnviCarb Chromabond-HRP Eficiența fazei solide HRP pentru purificarea extractelor de probă. Compararea ChemElut și HRP
7 5.3.3 Purificarea extractelor de acetonitril C Testele cu Oasis MCX Investigații pentru reducerea sau evitarea efectelor matricei Influențele matricei Purificarea extractelor Comparația GPC, Hydromatrix și SPE Comparația solvenților de extracție Matrice bogate în grăsime Cuantificare utilizând standarde externe Cuantificare utilizând standarde etichetate cu izotopi Cuantificare utilizând standarde matrice Validarea metodei Specificare metodă Parametri analitici și evaluare statistică Limite de cuantificare și valori necompletate Ratele de recuperare și repetabilitate Sumar Bibliografie Outlook Anexă