Ecran de steroizi

Management: Prof. Dr. Jerzy Adamski
Institut: Institutul de Genetică Experimentală, Helmholtz Center München
Pagina principala: www.helmholtz-muenchen.de/en/ieg/group-molecular-endocrinology/index.html

Steroizii controlează procesele de diferențiere și proliferare a celulelor și țesuturilor. Rezultate mai recente sugerează, de asemenea, un rol pentru metabolismul steroizilor în apoptoză și neuroregenerație. Defectele metabolismului steroizilor contribuie la patogeneza multor boli multifactoriale, cum ar fi cancerul, sindroamele ovariilor polichistice, bolile oaselor și cartilajelor sau bolile neurologice. Unele boli ereditare sunt, de asemenea, cauzate de tulburări ale biosintezei colesterolului precursor al steroizilor, cum ar fi B. Sindromul COPILULUI, Condrodisplazia punctată și sindromul Smith-Lemli-Opitz. În plus, corticosteronul este un marker important pentru stres și tulburări metabolice (diabet).
Obiectivul principal al ecranului de metabolizare a steroizilor este de a identifica noi modele animale pentru bolile dependente de metabolismul steroizilor umani. Se caută modele animale de diabet, obezitate și depresie pentru a dezvolta noi terapii.

DHEA testosteron

Liniile mutante ale șoarecilor cu metabolizare steroidică deviată se găsesc în ecranul primar. Șoarecii adulți sunt examinați pentru variații ale concentrațiilor plasmatice de steroizi. Sângele este extras retro-bulbar de la șoareci anesteziați, iar plasma este produsă prin centrifugare. Steroizii cheie corticosteron, testosteron și androstendionă sunt extrase din plasmă și cuantificate folosind metode spectrometrice de masă. Șoarecii cu statură scurtă, cataracta, defecte ale pielii, malformații ale membrelor și afectarea biologiei reproducerii sau a comportamentului sunt cei mai interesați candidați pentru ecran, deoarece fenotipurile corespunzătoare sunt observate și în bolile umane ale metabolismului steroizilor.

În analiza noastră, cuantificăm mai mulți steroizi (testosteron, corticosteron, androstendion) plasmă de șoarece simultan cu metoda HPLC-MS/MS pe care am validat-o (Haller și colab., 2010).

Fig. 3: Tehnologie HPLC-MS/MS în GAC

Ca ecran secundar, oferim cuantificarea a până la 186 metaboliți endogeni (aminoacizi, hexoze, glicerofosfolipide, sfingomieline, acilcarnitine, amine biogene) din 10 microlitri de plasmă de șoarece în platforma metabolomică a GAC. Un test ELISA pentru cuantificarea DHEA în plasmă este disponibil la cerere.

Exemple de rezultate publicate:
Concentrația de testosteron în serul șoarecilor Srgap3 -/- masculi este redusă, dar nu este asociată cu modificările morfologice ale mutantului (Waltereit et al, 2012).

În linia de mutanți de șoarece NGFN-Ali18, primul model de șoarece neindus pentru artrita psoriazică, dermatită și osteoporoză, am reușit să detectăm o concentrație redusă de testosteron (Abe et al, 2011).

Rezultatele ecranului primar al liniei Cox4 - fără modificări în DHEA și testosteron - au fost publicate în FASEB (Huttemann et al, 2012).

Concentrațiile modificate specifice genotipului de corticosteron au fost găsite în liniile HMGN1, 3 și 5 pe ecranul primar. Rezultatele au fost publicate de Nucleic Acids Research (Kugler et al, 2013).

Rezultatele ecranului primar al liniei ADAR2 - fără modificări în DHEA și testosteron - au fost publicate (Horsch și colab., 2011).