Expertiza SARS-CoV-2 în testarea anticorpilor de la universitățile austriece MedUni Viena
(Viena, 22-09-2020) Pentru a evalua răspândirea SARS-CoV-2 și a infecțiilor care au apărut deja cu noul coronavirus - pe lângă testele PCR disponibile în prezent - sunt necesare metode de analiză fiabile și de piață în masă cu care SARS- Anticorpii CoV-2 pot fi detectați. O echipă de experți din trei universități austriece - BOKU, Vetmeduni Viena și MedUni Viena - a dezvoltat acum primul test cantitativ de anticorpi SARS-CoV-2. Cu partenerul industrial Technoclone a fost posibilă comercializarea acestui test de anticorpi cât mai repede posibil.
În timp ce testul PCR obișnuit este utilizat pentru a „căuta” materialul genetic al SARS-CoV-2, un test cu anticorpi oferă informații despre dacă cineva a fost deja infectat cu noul tip de coronavirus și dacă sistemul imunitar reacționează la această infecție producând anticorpi SARS-COV-2 a răspuns. Testele de anticorpi fiabile și produse în masă sunt instrumente importante pentru obținerea de informații despre răspândirea virusului SARS-CoV-2 și informații despre numărul nedeclarat de persoane infectate. Acest lucru se datorează faptului că testarea anticorpilor poate fi utilizată și pentru a identifica persoanele la care boala a fost asimptomatică - adică fără simptome. Testele anticorpilor pot ajuta astfel la realizarea unor prognoze mai bune cu privire la gradul de imunitate în populație și la utilizarea mai specifică a măsurilor împotriva răspândirii. În ceea ce privește aprobarea preconizată a vaccinurilor, testele anticorpilor sunt un instrument important pentru a verifica succesul vaccinărilor.
Baza comună pentru sistemul de testare
Virologul austriac Florian Krammer (Școala de Medicină Icahn din Muntele Sinai, New York/SUA) a reușit recent să dezvolte un test serologic pentru detectarea anticorpilor SARS-CoV-2 în sânge. Pe baza acestui fapt, trei universități austriece - BOKU, Vetmeduni Viena și MedUni Viena - și-au unit forțele în primăvara anului 2020 pentru a genera un test serologic care permite detectarea specifică și sensibilă a anticorpilor SARS-COV-2 în sânge și, de asemenea, în laboratoare mici. este aplicabil.
Împreună cu oamenii de știință de la Universitatea de Resurse Naturale și Științe ale Vieții din Viena (BOKU), Universitatea de Medicină Veterinară din Viena a dezvoltat baza acestor teste de anticorpi. Au fost cercetate aspecte tehnice și clinice privind stabilirea unui test de anticorpi. Cooperarea strânsă dintre imunologi și biochimiști din Vetmeduni Viena cu experți din BOKU și MedUni Viena, precum și sprijinul unui sponsor din economia locală au accelerat în mod semnificativ activitatea de dezvoltare a sistemului de testare. „Puterea și succesul rapid al consorțiului se datorează faptului că fiecare partener a contribuit cu expertiza sa specială, care este necesară pentru înființarea, testarea și validarea acestui sistem de testare”, spune Wilhelm Gerner de la Institutul de Imunologie de la Vetmeduni Viena. Deci, a fost posibil să se dezvolte o procedură de testare de înaltă calitate într-un timp scurt.
Proteine pentru teste de anticorpi în toată Austria
Un consorțiu trans-departamental format din oameni de știință de la Departamentele de Biotehnologie (DBT) și Genetica Aplicată și Biologie Celulară (DAGZ) a fost format la Universitatea de Resurse Naturale și Științe ale Vieții cu scopul de a produce rapid proteine SARV CoV-2 (antigene) de înaltă calitate pentru dezvoltarea testelor. furniza. DBT are o vastă expertiză și infrastructura necesară pentru a utiliza proteinele recombinante în diferite sisteme de producție, cum ar fi Pentru a exprima (fabrica) și purifica celule de mamifere și insecte sau organisme microbiene precum bacterii și drojdii la scară mică și mare. DAGZ extinde această expertiză pentru a include producția de proteine recombinante în plante și modificarea țintită a structurilor lor de zahăr.
„Curiozitatea științifică și nevoia de a ne ajuta ne-au determinat în ultimele luni să dezvoltăm diferite versiuni ale acestor antigeni, precum și candidați suplimentari la antigeni și să le testăm pentru a se potrivi cu utilizarea lor într-un test de anticorpi”, subliniază Reingard Grabherr de la Departamentul de Biotehnologie BOKU. BOKU a stabilit procese complexe de curățare și metode de analiză care garantează că antigenii pot fi produși reproductibil și cu un nivel deosebit de ridicat de puritate. Calitatea înaltă a antigenelor produse la BOKU a fost foarte apreciată de mulți parteneri externi, deoarece face ca toate testele pe baza acestora să fie mult mai precise și mai semnificative.
Expertiza ELISA la Vetmeduni Viena
Universitatea de Medicină Veterinară din Viena și-a încorporat expertiza extinsă în proiectarea și stabilirea inițială a noilor sisteme de testare ELISA. "Testele imunosorbente legate de enzime" (ELISA) sunt metode cu care proteine foarte specifice, cum ar fi Anticorpii pot fi detectați. ELISA dezvoltat poate detecta anticorpi împotriva SARS-CoV-2 din probe de la pacienți infectați și este disponibil în două versiuni. O variantă a testului examinează prezența anticorpilor împotriva domeniului de legare a receptorilor (RBD) al proteinei SARS-CoV-2. A doua variantă detectează anticorpi împotriva nucleoproteinei (NP). Testul îndreptat împotriva NP reacționează mai sensibil în stadiul incipient al răspunsului imun, dar în faza principală și tardivă a răspunsului imun, trusa de test îndreptată împotriva RBD se corelează mai bine cu imunitatea pacientului.
Biobancă ca resursă importantă
Pentru a testa calitatea și robustețea celor două teste într-un laborator de diagnostic clinic, MedUni Viena, sub îndrumarea Institutului Clinic de Medicină de Laborator, și-a contribuit expertiza extinsă în validarea testelor de diagnostic. Pentru a determina specificitatea și sensibilitatea unui test de anticorpi, adică câte probe sunt detectate ca fals pozitive sau fals negative, trebuie testat un număr mare de probe de ser bine caracterizate care au fost recoltate înainte de pandemie sau de la pacienții cu un diagnostic confirmat de Covid 19. MedUni Viena a reușit să se bazeze pe colectarea sa extinsă de probe în biobancă și pe o rețea la nivel austriac în zona laboratorului medical.
Sistem de testare de înaltă calitate și versatil
La urma urmei, colaborarea strânsă dintre partenerii academici și partenerul industrial Technoclone a făcut posibilă comercializarea testelor de anticorpi cât mai repede posibil. Comparativ cu testele de anticorpi care sunt deja disponibile, sistemul de testare nou înființat prezintă avantaje importante, așa cum explică Wilhelm Gerner: „Fiecare laborator certificat cu un cititor ELISA standard poate efectua testul anticorpilor. Sistemul de testare permite de asemenea cuantificarea cantității de anticorpi din probe. Acest lucru permite efectuarea unor studii precise în timp asupra titrurilor de anticorpi. ”O altă aplicație ar putea fi în testarea viitoare a vaccinurilor.
În prezent, majoritatea vaccinurilor în curs de dezvoltare conțin doar regiuni din proteina spike a SARS-CoV-2. Prin stabilirea a două sisteme separate de detectare a anticorpilor împotriva RBD din proteina spike și împotriva nucleoproteinei, viitoarele studii de vaccinare pot fi utilizate pentru a examina dacă persoanele vaccinate dezvoltă numai anticorpi împotriva RBD (reacție la vaccin) sau, în fundal, o reacție imună împotriva celui care circulă SARS-CoV-2 are loc. În acest caz, anticorpii s-ar forma și împotriva nucleoproteinei. Cu aceasta, se pot obține informații importante despre efectul protector al vaccinurilor.