Fotooxidarea multivitaminelor parenterale induce steatoza hepatică într-un
Abstract
Foto-oxidarea soluțiilor multivitaminice are ca rezultat generarea de peroxizi. Deoarece peroxizii sunt asociați cu steatoză și fibroză hepatică, precum și cu colestază, ne-am întrebat dacă multivitaminele au fost implicate în complicațiile hepatice ale nutriției parenterale. Porcii de Guineea nou-născuți au fost împărțiți în grupuri care au primit intravenos fie nutriție parenterală totală, fie protejată sau nu, fie o soluție martor (5% dextroză + 0,45% NaCI) suplimentată cu: a) multivitamine; b) multivitamine fotoprotejate; c) multivitamine fără riboflavină; sau d) peroxizi (H202, hidroperoxid de terț-butil). După 4 zile, ficatul a fost prelevat pentru histologie și niveluri de izoprostan-F 2α, markeri ai atacului radical. Multivitaminele, precum și nutriția parenterală totală au fost asociate cu steatoză (evaluată 0-4), a cărei severitate a fost redusă (p 2+ și Cu + prin reacțiile Fenton/Haber-Weiss. În plus, ne-am aștepta ca componentele antioxidante ale multivitaminele parenterale protejează împotriva radicalilor liberi derivați din peroxizii generați în soluțiile TPN (12).
Obiectivul acestui studiu a fost de a evalua rolul multivitaminelor în complicațiile hepatice asociate cu TPN, documentate de histologie, și de a separa efectul expunerii la lumină de cel al peroxizilor și/sau radicalilor liberi.
METODE
Model animal.
Sub ketamină/xilazină, porcușorii de guinea de 3 zile (Charles River, Montreal, Quebec, Canada) au fost echipați cu un cateter poliuretanic de 0,4 mm (Luther Medical Products, Tustin, CA, SUA) în vena jugulară externă și exteriorizați. în regiunea scapulară. Cateterul a fost conectat la un sistem de curgere continuă care permite mobilitatea animalelor, care erau adăpostite separat în cutii de plastic cu funduri din plasă de sârmă. Animalele au fost ținute într-un mediu termocontrolat cu un ciclu de lumină/întuneric de 12 ore și au fost hrănite exclusiv intravenos la 240 ml/kg/zi. După 4 zile animalele au fost sacrificate și ficatul a fost împărțit în alicote cu probe stocate în formalină pentru histologie sau tăiate și depozitate la -80 ° C până la analiza pentru trigliceride și izoprostani, un indice de atac radical (17). Studiul a fost realizat în conformitate cu liniile directoare ale comitetului pentru animale al instalației.
Acest model animal a fost ales datorită observației noastre anterioare nepublicate a bolii hepatice grase la cobai. Pentru a verifica dacă această steatoză poate fi prevenită prin fotoprotecție, aceleași condiții experimentale au trebuit să fie reproduse.
Protocoale
Pentru a separa efectul multivitaminei și luminii, animalelor li s-a administrat una dintre următoarele regimuri care conțin soluție multivitaminică la o concentrație similară cu cea utilizată în nutriția parenterală neonatală. Fotoprotecția a fost realizată prin pregătirea soluțiilor pe întuneric, acoperirea setului de perfuzie cu un material opac și utilizarea unui tub intravenos fotoprotejat (13), prin amabilitatea Baxter Canada.
MVP + lumină: 1% (vol/vol) MVP (Sabex, Boucherville, Quebec, Canada) neprotejat de lumina ambiantă, diluat în soluție martor (50 g/L dextroză + 4,5 g/L NaCl + 1 unitate de heparină/mL); 5 mL de MVP conține următoarele: vitamina A, 2300 UI; vitamina D, 400 UI; α-tocoferol, 7 UI; vitamina K, 200 µg; ascorbat, 80 mg; tiamină, 1,2 mg; riboflavină, 1,4 mg; piridoxină, 1,0 mg; pantotenat, 5 mg; acid folic, 0,14 mg; cianocobalamină, 1 ug; nicotinamidă, 17 ug; biotină, 20 ug; și aditivi pentru manitol și polisorbat ca emulgatori.
MVP - lumină: 1% (vol/vol) MVP foto-protejat, diluat în soluția de control.
Lumină TPN +: Două soluții neprotejate de lumina ambientală au fost perfuzate într-o configurație mixtă „piggy-back” în apropierea locului de perfuzie: a) control + 9,6 g/kg/zi de aminoacizi (Travasol, Baxter Canada, Mississauga, Ontario), Canada) + 2% MVP la 120 ml/kg/zi; b) controlează + 9,6 g/kg/zi de aminoacizi + 7,6 g/kg/zi de lipide (Intralipid 20%, Pharmacia, Peapack, NJ, Statele Unite) la 120 ml/kg/zi; pentru o concentrație finală (la 240 mL/kg/zi) de 1% MVP + 4,8 g/kg/zi de aminoacizi + de 3,8 g/kg/zi de lipide. Compoziția regimului NPT a fost calculată din recomandările pentru studii la cobai adulți (18).