Ghid de internship Matrix Engineering - Descărcare gratuită PDF

Instrucțiuni pentru stagiul Matrix Engineering WS 2012/13 Management stagiu: Coautori: Dr. Katja Franke Michael Ansorge Liv Kalbitzer Tina König Andreas Müller Christina Müller Facultatea de Bioștiințe, Farmacie și Psihologie Institutul de Biochimie Profesor pentru Chimie Biofizică

matrix

Cuprins Instrucțiuni privind sănătatea și siguranța (formă scurtă) 5 Noțiuni de bază pentru experimentele 1 la 4 6 Experimentul 1 - Izolarea colagenului de tip I 9 Pregătiri pentru experimentul 2-4 Pregătirea matricilor de colagen și fibrină 12 Experimentul 2 - Cinetica formării fibrilelor și modificarea rețelei cu heparină 14 Experimentul 3 - Analiza microstructurii ECM 17 Experimentul 4 - Migrația celulară și morfologia 20 Experimentul 5 - Microscopia forței de tracțiune celulară 22

Figura 11: Producția stratului de gel, soluția de polimerizare este pipetată pe Sigmacote-DG și apoi acoperită cu DG reactiv. 4. Îndepărtați Sigmacote DGs cu pensete 5. Înmuiați gelurile în H2O timp de 30 min. 6. Uscați gelurile într-un dulap de uscare sub vid, aproximativ 45 min la temperatura camerei 4. Strat de acoperire (aplicarea stratului de polimer) 1. Pregătiți soluția ˆ 0,14% g/g Filtrează PSMA (100.000 g/mol) în THF (soluție (filtru seringă PTFE, dimensiunea porilor 0,2 µm) 2. Înveliș de centrifugare la 4000 rpm, 1500 rpm/s, 20 s 3. Adeziv pe inele de sticlă cu Eukitt 5. Permite gelurilor să se umfle 1 .Puneți DG într-o cutie Petri mare 2. Adăugați PBS 3. Închideți cutia Petri cu Paralm și puneți-o la frigider peste noapte 27