Laborjournal online Nebunia cu Irisin
Ce? Irisin nu există?
În 2012, revista Nature a făcut o descoperire senzațională. Oamenii de știință americani care lucrează cu Pontus Boström și Bruce Spiegelman de la Harvard Medical School au descris un hormon de slăbire endogen numit irisină. Irizina se formează în mușchi prin efort fizic. Acesta ajunge la tampoanele de grăsime prin sânge și stimulează celulele grase albe (adipocite) să se transforme în țesut adipos maro. La rândul lor, adipocitele brune ard grăsimile direct pentru a genera căldură, o funcție de protecție a mamiferelor nou-născute.
Industria farmaceutică este de multă vreme interesată de deschiderea financiară a imensei piețe pentru obezitatea bolii de masă. Transformarea celulelor grase albe adulte în adipocite brune juvenile ar fi o abordare terapeutică evidentă, motiv pentru care numeroase grupuri de lucru din întreaga lume cercetează acest subiect. Dacă ați putea folosi un medicament magic pentru a stimula centurile de slănină să formeze adipocite maronii și să ardă grăsimi, ar fi cea mai mare înțelegere din toate timpurile pentru companiile farmaceutice.
Slăbește - și nu te mai răci niciodată
Și un vis devenit realitate pentru toți fanii sportului supraponderali. Tot ce trebuie să faceți este să vă întindeți pe canapea și să aruncați o pastilă Irisin cu chipsuri și batoane de ciocolată și nu numai că pierdeți în greutate, vă simțiți și confortabil și cald din cauza căldurii generate de celulele de grăsime maro și puteți economisi la încălzire. Nu este de mirare că publicația Nature a deschis un nou domeniu de cercetare și a declanșat un val de citate. Se spune că aproximativ 200 de publicații se ocupă acum de hormonul miracol irisină. Dar, așa cum se întâmplă adesea, acest vis nu este tangibil în cele din urmă.
Cercetătorii nord-germani din jurul lui Elke Albrecht și Steffen Maak de la Institutul Leibniz pentru biologia animalelor de fermă din Dummerstorf ar fi putut livra ultimul cui din sicriu la hype cu ultima publicare în revista Scientific Reports și ar fi expus entuziasmul legat de hormonul miracol ca un artefact de legare nespecifică a anticorpilor.
La scurt timp după publicare, publicația lui Boström și colab. Criticat aspru de colegi, inclusiv de comentatori de pe site-ul PubPeer. Era vorba de erori tehnice și discrepanțe biologice. Harold Erickson de la US-American University Duke chiar și-a rezumat criticile într-o recenzie (și mai târziu Erickson a inițiat cooperarea de succes cu Maak pentru lucrarea citată mai sus).
Potrivit lui Boström și Spiegelman, hormonul solubil în sânge, irisina, ar trebui să fie un produs de clivaj al proteinei legate de membrană FNDC5. La rândul său, ARNm FNDC5 ar trebui să fie reglat în sus în mușchiul scheletic ca răspuns la efort fizic, mediat de factorul de transcripție PGC1-α. Din păcate, potrivit lui Erickson, nu există dovezi suficiente în literatura de specialitate pentru exprimarea preferențială a FNDC5 în mușchiul scheletic sau pentru rolul transcripțional al PGC1-α în reglarea sa superioară.
În orice caz, gena FNDC5 pare a fi mutată la oameni, așa cum a arătat grupul de lucru al Jürgen Eckel de la Centrul German de Diabet din Düsseldorf într-o publicație PLOS-ONE. Locul FNDC5 în sine este modificat în codonul său de pornire ATG în așa fel încât să nu fie posibil niciun nivel de expresie demn de menționat. În ceea ce privește derivatul FNDC5 irisin în sine, prezența acestuia nu mai este sigură la nicio specie.
Nu există urme de iris la oameni, cai sau șoareci
Potrivit lui Steffen Maak, irisele circulante nu au putut fi găsite nici la oameni, nici la cai de curse sau la alte animale de fermă supuse sportului. Irisina nu a putut fi detectată în mod fiabil chiar și la șoareci, despre care se referea lucrarea Entdecker-Nature.
Maak și colegii săi au folosit linii speciale de mouse selectate pe termen lung, care arată performanțe ridicate pe banda de alergat și au fost inițial capabili să detecteze irisina. Cu toate acestea, investigațiile cu alți anticorpi au ridicat îndoieli cu privire la reproductibilitatea rezultatelor.
Spre deosebire de majoritatea cercetătorilor Irisin, laboratorul lui Maak a folosit metoda Western blot oarecum mai complexă în locul ELISA. Avantajul decisiv: la separarea dimensiunii cu SDS-PAGE, specificitatea unui anticorp poate fi bine evaluată. Banda de dimensiuni „corecte” este groasă și ascuțită și se evidențiază suficient de clar de restul nespecific? Abia atunci poți avea încredere în acest anticorp. Cu testul ELISA, totuși, întreaga „supă” este măsurată peste tot. Deci, practic nu se știe ce dimensiune are proteina recunoscută de anticorpul ELISA și câte proteine diferite sunt detectate în același timp. Dacă sângele, cu o bogată diversitate de proteine, este, de asemenea, utilizat ca probă, atunci în cazul epitopilor exotici, cum ar fi irisina, este pur și simplu naiv - sau chiar extrem de neglijent - să renunțe la controalele de specificitate ale anticorpilor. Deoarece producătorii industriali își testează de obicei doar anticorpii împotriva epitopilor recombinați purificați și rareori împotriva lizatului celular sau a țesuturilor.
Anticorpii irisinei arată ceva care nu există deloc
Astfel de anticorpi comerciali și truse ELISA provin de la Boström și colab. și în numeroasele publicații de urmărire ca mijloc de alegere. Deci, s-a întâmplat că totul între 0,01 ng/ml și peste 2.000 ng/ml irisină ar putea fi detectat fericit în sângele uman. În publicația lor actuală, Maak și colegii săi au constatat prin numeroase experimente de control cu peptide de irisină că toți anticorpii comerciali și kiturile ELISA recunosc irisina recombinantă și sintetică, dar sunt foarte nespecifice și se leagă, de asemenea, de proteinele sanguine complet neimplicate.
Anticorpii comerciali au prezentat semnale pozitive nespecifice chiar și în probe care nu conțineau peptidă de irisină. Anticorpul de la Abcam, care a fost utilizat pentru descoperirea Irisinei de către Boström și colab. folosit nu era tocmai fiabil. Aceasta a fost îndreptată împotriva domeniului C-terminal al proteinei FNDC5; deci exact împotriva secțiunii care NU ar trebui să conțină deloc Irisin.
Faptul că Boström și Spiegelman și-au pescuit irizele cu el este surprinzător și toți cei implicați, inclusiv evaluatorii colegi, ar fi trebuit să fie conștienți. Cu toate acestea, lucrarea care caută senzații a fost acceptată de Natură. Șeful studiului, Spiegelman, a răspuns nepăsător la criticile PubPeer spunând că Abcam a specificat incorect epitopul anticorpului. Maak a descris argumentul său ulterior către Laborjournal ca fiind „nu foarte convingător”. Când colegii au vrut să vadă dovezi credibile pentru această afirmație, Spiegelman, insultat, a întrerupt discuția. De atunci, el nu a mai răspuns la alte critici ale publicațiilor sale de pe PubPeer.
Boström este acum lider de grup la Institutul Karolinska din Suedia, dar recent a fost condamnat pentru abatere științifică, manipulare a datelor și falsificare a rezultatelor de către Universitatea din Göteborg. Nu este surprinzător faptul că Natura lasă necomentată hârtia nerecuperabilă și de necredibil, la fel ca numeroase alte publicații zombie strigoi. Studiul Maak a fost respins de revista sora Nature Communications din cauza „insuficienței sale semnificative conceptuale”. Oricum ar fi, finanțarea suplimentară nu ar trebui, deocamdată, să fie introdusă în cercetarea Irisin.
Ultimele modificări: 05/12/2015