Modificarea unei metode MEKC - Descărcare gratuită PDF

Departamentul de Economie Agricolă și Științe Alimentare Diplomă în Tehnologia Bioproduselor Modificarea unei metode MEKC pentru determinarea micotoxinei patuline în suc de mere Lucrare de licență înaintată de: Anne Weber Pentru obținerea diplomei universitare Bachelor of Science (B.Sc.) Primul recenzent: Al doilea recenzor: Prof. Dr. rer. nat. Christine Wittmann Dr. rer. nat. Bettina Albrecht Perioada de procesare: 18 ianuarie 2010 2 martie 2010 URN: urn: nbn: de: gbv: 519-thesis2010-0114-9 Neubrandenburg, 2 martie 2010

modificarea

Cuprins II Cuprins Lista abrevierilor. IV Lista unităților. VI 1 Introducere. 1 1.1 Patulin. 2 1.1.1 Structura și apariția. 2 1.1.2 Biosinteza. 3 1.1.3 Evaluarea toxicologică. 5 1.2 Temei juridic. 7 1.2.1 Ordonanța privind cantitatea maximă de micotoxină. 7 1.2.2 Regulamentul (CE) nr. 1425/2003. 7 1.2.3 Directiva 2003/598/CE. 8 1.3 Procedura de verificare. 9 1.3.1 Cromatografie lichidă de înaltă performanță. 9 1.3.2 Cromatografia gazoasă. 10 1.3.3 Cromatografia în strat subțire. 10 1.3.4 Metode imunochimice. 10 1.3.5 Determinarea patulinei utilizând MEKC-DAD. 11 1.4 Obiectiv. 17 2 Material și metode. 18 2.1 Material. 18 2.1.1 Substanțe chimice și agenți. 18 2.1.2 Soluții de bază și tampon necesare. 19 2.1.3 Dispozitive. 23 2.1.4 Proba examinată. 23 2.2 Metode. 24 2.2.1 Determinarea fotometrică a concentrației PAT/5-HMF. 24 2.2.2 Optimizarea efectului de separare. 26 2.2.3 Pregătirea probei. 26 2.2.4 Creșterea probei de suc de mere. 29 2.2.5 Măsurare. 31

Cuprins III 3 Rezultate. 32 3.1 Stabilitatea soluțiilor stoc. 32 3.2 Optimizarea efectului de separare. 33 3.2.1 Investigații ale compoziției electrolitului. 33 3.2.2 Pregătirea probei. 35 4 Discuție. 39 5 Rezumat. 48 Glosar. VII Bibliografie. Lista XI a figurilor. XVI Lista tabelelor. XVII declarație pe propria răspundere. XVIII anexă. XIX

Lista abrevierilor IV Lista abrevierilor Numeral 5-HMF 6-MSA Acid 5- (hidroximetil) -furfural 6-metilsalicilic; Acid 6-metilsalicilic B BSTFA N, O-bis-trimetilsilil-trifluoroacetamidă C CE CMC electroforeză capilară; Concentrația micelară critică de electroforeză capilară; concentrație micelară critică D DAD DC DIN detectarea matricei de diode; Detectarea matricei de diode Cromatografie în strat subțire Institutul german de standardizare E ECD EI Detector de captare electronică EOF; Detector de captare electronică ionizare electronică; Flux electroosmotic de ionizare cu impact de electroni F Organizația FAO pentru Alimentație și Agricultură G GC cromatografie gazoasă; Cromatografie gazoasă H HFBI HPCE HPLC heptafluorobutirillimidazol electroforeză capilară de înaltă performanță; Cromatografie lichidă de înaltă performanță; Cromatografie lichidă de înaltă performanță

Lista abrevierilor V L LFGB LMBG Codul produselor alimentare, bunurilor de consum și hranei pentru animale Actul privind produsele alimentare și bunurile de consum M MEKC MG MS Cromatografie capilară electrocinetică micelară Greutate moleculară Spectrometru de masă N Ionizare chimică NCI negativă; ionizare chimică negativă P p.a. Analiza PAT PMDI pro Patulin aportul zilnic maxim provizoriu R RT timp de retenție S SDS SPE dodecil sulfat de sodiu; Dodecil sulfat de sodiu/laurilsulfat de sodiu extracție în fază solidă; Extragere în fază solidă Organizația Mondială a Sănătății OMS

Lista unităților VI Lista unităților mbar presiune mbar zona integrală mau. s milli unități de absorbție. secunde masă μg, mg microgramă, miligram molaritate mol/l mol per litru greutate moleculară g/mol gram per mol intensitate semnal mau milli unități de absorbție tensiune kv kilovolt temperatura C grade Celsius volum μl, ml, l microlitru, mililitru, litru lungime de undă nm nanometru timp s, min, h secundă, minut, oră

1 Introducere 2 1.1 Patulină 1.1.1 Structură și apariție Patulina (4-hidroxi-4H-furo [3,2-c] piran-2 (6H) -ona, vezi Figura 1) este o polichetidă lactonă heterociclică nesaturată produsă de diferite specii poate fi sintetizat prin mucegaiuri din genurile Penicillium, Aspergillus și Byssochlamys în produsele agricole (LAWLEY, 2008; MILIOTIS, 2003; WEIDENBÖRNER, 1998). Cei mai importanți reprezentanți sunt rezumați în Tabelul 1, în cadrul căruia Penicillium expansum are cea mai mare importanță (LAWLEY, 2008; MILIOTIS, 2003). Sinteza micotoxinei în sine este favorizată de anumite condiții din mediul înconjurător și variază de la specie la specie. Intervalul optim de formare a micotoxinelor P. expansum este la o temperatură cuprinsă între 20 C și 25 C, un interval de pH Fig. 1: Produse chimice de la pH 3 la pH 6,5 (KRÄMER, 2007) și o valoare a W de 0,99 Structura patulinei (WEIDENBÖRNER, 1998). Unii formatori de patulină sunt chiar capabili să îndepărteze micotoxina la temperaturi