Philipp Pierre Markwerth - Descărcare gratuită PDF

De la Institutul de Virologie de la Universitatea Heinrich Heine din Düsseldorf Director: Prof. univ. Dr. med. Jörg Timm Detectarea serologică și moleculară a infecțiilor cu polomavirusuri umane JC și BK la pacienții cu disertație de leucoencefalopatie multifocală progresivă (LMP) pentru obținerea gradului de doctor în medicină la Facultatea de Medicină a Universității Heinrich Heine Düsseldorf prezentată de Philipp Pierre Markwerth 2018

descărcare

Tipărit ca disertație inaugurală cu aprobarea Facultății de Medicină a Universității Heinrich Heine Düsseldorf. semnat: Decan: Prof. univ. Dr. med. Nikolaj Klöcker Prim recenzor: Prof. Dr. med. Ortwin Adams Al doilea recenzor: PD Dr. med. Philipp Albrecht

Au fost publicate părți ale acestei lucrări: Indicele anticorpului CSC JCV pentru diagnosticarea LML asociată cu natalizumab. Warnke C, von Geldern G, Markwerth P, Dehmel T, Hoepner R, Gold R, Pawlita M, Kümpfel T, Mäurer M, Stangel M, Wegner F, Hohlfeld R, Straeten V, Limmroth V, Weber T, Hermsen D, Kleinschnitz C, Hartung HP, Wattjes MP, Svenningson A, Major E, Olsson T, Kieseier BC, Adams O. Annals of neurology 2014, dec. 76 (6): 792-801.

Lista abrevierilor 5HT2A 5-hydroxytryptamine receptor 2A AI JCV AKT ANOVA ATP AU BKV BSA CCD CSF/ser anticorp quotient-JCV protein kinase B Analiza varianței Adenozină 5 trifosfat unitate arbitrară BK Virus ser albuminic încărcat cuplat devicenă D Timp de măsurare 1 DMSO Desoxyrsul dezoxiribonucleic DX1 Acid timp de masurare 2 DX2 timp de masurare 3 E. coli Escherichia coli EDTA etilendiamin tetraacetic EIA enzimatic proces imunoabsorbia enzimatic ELISA legat testul de imunosorbție FAM HAART 6-carboxi-fluorescein extrem de activ G IgM-IgM-immunopropyl controlul antiretroviral β-imunoglobulina IgM-IgMTunglobulin G β-imuno-IgMTunglobulin de control G IgM-imune IgMTunglobulin G ß-imunoglobulina G IgM-IgMTunglobulin G beta-IgMTunglobulin G control al ß-imune D-tiogalactopiranozid virus JCV JC kbp perechi kilobază KI interval de încredere LB lizogenie bulion LPOS control pozitiv scăzut MAPK proteină kinază activată mitogen mirna micro ARN ml mililitri MPOS control mediu mrna messenger ARN RMN rezonanță magnetică imagistică MRZ rujeolă-rubeolă-zoster reacție MS scleroza multiplă valori medii NAT natalizumab II

NCCR regiune de control necodificatoare NEM N-Etilmaleimidă NF-1/X factor nuclear 1 clasă X NLS semnal de localizare nucleară nm nanometru OD X densitate optică la x nm PBS fosfat tamponat salină pmal antigen dizolvat PML leucoencefalopatie multifocală progresivă PP2A proteină fosfatază 2A prb retinoblastom genă qpcr polimerază cantitativă reacție în lanț ARN acid ribonucleic SAPK proteină kinază activată prin stres Eroare standard S-fază de sinteză fază SMPB succinimidil 4- [p-aleimidofenil] -butirat SV-40 virus simian 40 TAMRA tetrametil-rodamină T-antigen antigen tumoral U unități VP-1 virus proteină 1 2P VP-3 virus proteina 3 SNC sistemul nervos central III

Cuprins 1 Introducere 1 1.1 Poliomavirusuri. 1 1.1.1 Clasificare. 1 1.1.2 Morfologie. 2 1.2 virusul JC. 4 1.2.1 Istorie. 4 1.2.2 Morfologie și proteine ​​virale. 4 1.2.3 Genomul. 6 1.2.4 Ciclul de replicare. 6 1.2.5 Tipuri și subtipuri. 8 1.2.6 Patogenie. 8 1.2.7 Epidemiologie. 10 1.2.8 Terapie. 10 1.3 Scleroza multiplă. 11 1.4 Natalizumab. 12 1.5 Număr. 13 2 Material și metode 14 2.1 Materialul pacientului. 14 2.2 JCV-BKV-IgG ELISA recombinant. 15 2.2.1 Principiu. 15 2.2.2 Obținerea proteinei recombinante VP-1. 16 2.2.3 Anti-JCV/Anti-BKV IgG ELISA. 18 2.2.4 ELISA subclasa IgC JCV recombinantă. 21 2.2.5 Măsurători ale afinității folosind JCV-IgG ELISA recombinant. 22 2.3 Reacția MRZ/indicele Reiber. 24 2.4 Determinarea proteinei Bradford. 25 2.5 PCR cantitativ în timp real. 26 3 Evaluare 28 3.1 ELISA. 28 3.1.1 IgG anti-JCV. 28 3.1.2 IgG anti-BKV. 31 3.1.3 Cocient LCR/ser. 33 3.1.4 Subclase anti-JCV IgG. 35 3.1.5 IgM anti-JCV și anti-BKV. 36 3.1.6 Afinitate IgG anti-JCV. 40 3.2 Rezultate PCR. 41 3.2.1 Rezultatele grupurilor de comparație. 41 3.2.2 ADN JCV. 43 3.2.3 ADN-BKV. 44 IV

Cuprins 4 Discuție 45 4.1 JCV IgG. 45 4.2 BKV IgG. 47 4.3 Cocient CSF/ser. 48 4.4 Subclase IgC JCV. 49 4,5 JCV IgM. 50 4,6 BKV IgM. 51 4.7 Afinitate IgG anti-JCV. 52 4.8 PCR-JCV. 53 4,9 PCR-BKV. 54 5 Concluzie 55 6 Bibliografie 56 V

1 Introducere Fig. 1.1: Clasificarea familiei Polyomaviridae; Fig. Modificat în conformitate cu Grupul de studiu Polyomaviridae al Comitetului internațional pentru taxonomia virusurilor. 3

1 Introducere Scleroza multiplă (SM) cu anticorpul anti-alfa-4-integrină umanizat natalizumab (Tysabri) poate apărea, de asemenea, ca efect secundar grav al LMP. 12,22,50 Fig. 1.4: imagini RMN ale unui pacient cu LMP. Focarele medulare hiperintense sunt emisfera dreaptă temporo-occipitală (săgeți roșii). Ilustrația a fost oferită cu amabilitate de Priv.-Doz. Dr. med. Michael Mull, Clinica de Neuroradiologie Diagnostică și Intervențională, Spitalul Universitar Aachen. 9