Text abstract Al 10-lea simpozion DGfZ 1997
Al 10-lea Simpozion Heidelberg
23-25 octombrie 1997
Rezumate DGfZ
Rezumatele sunt tipărite în: Proceedings of the DGZ Heidelberg Meetings, DKFZ, Heidelberg 1997, ISSN 0949 - 5347

=== PREZENTĂRI ORALE ===
=== APOPTOSIS ===
=== ANALIZA IMAGINILOR ===
Al 7-lea. MICROSCOPIA DE DISTANȚĂ SPECIALĂ DE PRECIZIE ÎN CERCETAREA GENOMULUI
C. Cremer * (1,2), H. Bornfleth (1), J. Bradl (1), P. Edelmann (1), A. Esa (1), H. Münch (1), J. Rauch (1 ), B. Rinke (1), L. Trakhtenbrot (3), M. Hausmann (1), T. Cremer (4,2) (1) Institutul de Fizică Aplicată și (2) Centrul Interdisciplinar de Calcul Științific (IWR), Universitatea din Heidelberg, D-69120 Heidelberg; (3) Institutul de hematologie, Tel. Hashomer/Israel; (4) Institutul de genetică umană de la Universitatea din München, D-80333 München.
* Autor de prezentare
Sunt prezentate noi abordări metodologice, cu ajutorul unei combinații de tehnici de marcare biologică moleculară multispectrală cu noi procese optoelectronice, cum ar fi microscopie confocală cu scanare cu fluorescență cu laser sau microscopie cu fluorescență cu câmp de undă stimulată cu laser, o „microscopie spectrală de înaltă precizie”, „microscopie cu rezoluție înaltă de înaltă precizie”, dincolo de limitele microscopiei clasice de înaltă rezoluție Realizați obiecte. Pe termen lung, apar posibilități de a efectua examinări microscopice ușoare ale topologiei spațiale a genomului în nuclei de celule conservate tridimensional („intacte”) cu rezoluție moleculară „echivalentă” și astfel să contribuie la o înțelegere mai profundă a relației structură-funcție a genomului uman.
=== Premiul KLAUS GOERTTLER ===
=== STANDARDIZARE ȘI CONTROL AL CALITĂȚII ===
=== SÂNGĂ PERIFERICĂ ȘI OASĂ ===
32. ANALIZA CITOMETRICĂ DE DEBIT A PEPTIDELOR DE ANTIGEN PE CELULE PREZENTATE DE ANTIGEN
D. Kunkel, A. Scheffold și A. Radbruch,
Centrul german de cercetare a reumatismului Berlin
Pentru a controla o reacție imunitară, limfocitele T-helper trebuie să recunoască antigenul lor specific sub formă de peptide antigenice, care sunt procesate de celule care prezintă antigen și sunt prezentate pe molecule MHC clasa II.
Folosind o peptidă de ovalbumină haptenizată, am examinat prezentarea acestei peptide prin citometrie în flux. S-a demonstrat legarea specifică a peptidei la molecula MHCII. În plus, au fost determinate condițiile necesare pentru absorbție și prezentare, precum și relația dintre concentrația peptidică și numărul de molecule MHCII încărcate pe celulă.
Rezultatele noastre arată că prin intermediul citometriei în flux este posibilă detectarea și separarea celulelor care prezintă antigen pe baza prezentării peptidelor specifice.
Limfocitele sunt filtrate selectiv de CPB. Concluzionăm că în timpul intervenției chirurgicale celulele cu CD3 25 54
fenotipul migrează în părți discrete ale organismului (homing). Datorită capacității lor crescute de a produce și secreta citokine, aceste celule ar putea fi parțial inductoare ale inflamațiilor locale și ale CLS postoperator. (Sprijinit de Ministerul Saxon al Științei și Artei).
=== ANALIZA MEDIULUI ===
=== METODE ȘI APLICAȚII NOI ===
=== SESIUNEA POSTERULUI ===
53. Cât de groasă este secțiunea ta? - O METODĂ SIMPLĂ DE EVALUARE A GROSIMII SECȚIUNII SECȚIUNILOR PARAFINĂ
Gschwendtner A., Lorenz M., Mairinger T.
Dpt. Patologie, Universitatea din Innsbruck, Innsbruck, AUSTRIA
Măsurarea exactă a grosimii secțiunilor de parafină utilizate pentru orice tip de analiză cantitativă (de exemplu, ADN - citometrie, colorare IHC - cuantificare, metode stereologice) este importantă pentru a obține rezultate fiabile. Deși grosimea secțiunii poate fi măsurată cu mare precizie și precizie folosind microscopia laser confocală, astfel de instrumente sunt scumpe și nu sunt ușor accesibile multor laboratoare. Această lucrare descrie o metodă simplă de cuantificare a grosimii secțiunii secțiunii de parafină prelucrată de mai multe ori, utilizată efectiv pentru analiza imaginii.
Pentru a atinge acest obiectiv, secțiunea dată este împărțită în două părți, cea mai mare este utilizată pentru cuantificare, în timp ce cea mai mică este reîncorporată și resecționată prin grosimea sa. Grosimea secțiunii reîncorporate poate fi acum ușor măsurată cu orice tip de dispozitiv de măsurare a lungimii disponibil în microscopie cu lumină.
67. TERITORIILE CROMOZOMATE SUNT VARIABILE ÎN CICLUL CELULAR
S.Monajembashi, H.Dittmar, C.Bock și K.O. Greulich
Institutul pentru Biotehnologie Moleculară, Beutenbergstrasse 11, D-07745 Jena, Tel./Fax: ** 49-3641-656409/10
Corelația spațială și forma cromozomilor selectați (2, 7, 9, X) în nucleul interfazic a fost investigată prin hibridizarea fluorescentă în situație (FISH). Microscopia convențională de epifluorescență și procesarea imaginilor au fost folosite pentru a vizualiza toate sondele de vopsire a cromozomilor care au fost colorate fie cu CY3, fie cu CY5. Deoarece limfocitele nu sunt sincronizate, nucleele interfazice din diferite faze ale ciclului celular ar putea fi găsite pe lamela de acoperire.
S-au putut observa două tipuri de imagini: a) în câteva cazuri, domeniile cromozomiale sunt extrem de compacte și clar separate între ele și dispuse în perechi de omologi. Cromozomii au apărut pe un cerc din volumul exterior al nucleului. Probabil că aceste nuclee reprezintă situația apropiată de mitoză. b) în majoritatea cazurilor, domeniile sunt mai mari și sunt mai ambalate. Ele umple regiuni mult mai mari ale nucleului celular. Aceste rezultate indică o dinamică considerabilă a teritoriilor cromozomiale în timpul ciclului celular.
71. CARIOTIPUL DE DEBIT AL CROMOZOMELOR INTERFAZICE ALE ARABIDOPSIEI THALIANA
Tatiana 1. Samoylova, Armin Meister și Simon Misera
Institutul pentru Genetica Plantelor și Cercetarea Plantelor Culturale, D-06466 Gatersleben
Conținutul de ADN al diverselor linii aneuploide de Arabidopsis thaliana a fost determinat prin citometrie de flux pe nuclee interfazice colorate cu DAPI în suspensie și comparat cu tipul sălbatic. Abaterile tuturor liniilor de la tipul sălbatic au fost foarte ușor de reprodus și au permis estimarea conținutului relativ de ADN al fiecărui cromozom Arabidopsis sau brațelor individuale ale cromozomului.
Cu excepția liniei cu cel mai mic telotrisom (Tr 3A), toți trisomii examinați au prezentat diferențe semnificative față de tipul sălbatic. Din aceasta se poate concluziona că, în condițiile experimentale prezente, pot fi detectate diferențe care depășesc 3% din genomul Arabidopsis.
Suma tuturor diferențelor dintre trisomii individuali și tipul sălbatic a fost de acord bine cu conținutul de ADN așteptat pentru setul de cromozomi haploizi.
74. GALECTIN -1 IMUNOSUPRESIUNEA MEDIATĂ ESTE ASOCIATĂ CU INDUCȚIA APOPTOZEI
U. Schulz 1, p Neels 2, J. Brock 2, H. Walzel 2
Institutul de Imunologie 1 Institutul de Biochimie Medicală 2, Universitatea din Rostock, Germania
Galectina -1 placentară, un membru al familiei galectinei de proteine solubile de legare a 13-galactozidelor, inhibă proliferarea indusă de alloantigen și mitogen a limfocitelor din sângele periferic uman. S-a constatat că inhibarea proliferării mediate de Galectin -1 a liniei de celule T leucemice umane Jurkat este asociată cu o creștere a concentrației intracelulare de calciu ([Ca 2+] i) și cu inducerea apoptozei.
Măsurătorile citometrice de flux au arătat că lectina induce o creștere dependentă de timp și de concentrație în expresia fosfatidilserinei, așa cum a fost detectată de colorarea anexinei - V FITC/PJ. Aceste efecte asupra expresiei fosfatidilserinei s-au dovedit a fi reduse semnificativ în prezența lactozei. Fragmentarea ADN-ului a apărut în gelurile de agaroză ca model de scară după incubarea celulelor T Jurkat cu galectină -1 timp de 6 ore. Aceste rezultate indică faptul că galectina -1 modulează răspunsul imun prin inducerea apoptozei în celulele T activate.