UPR 9025 Lipoliza enzimatică
Aprilie 1998 - nr. 27
UPR 9025: Lipoliză enzimatică
UPR 9025 este dedicat în principal dezvoltării unei "enzimologii interfaciale" și studiului structurii funcției lipazelor vegetale, pancreatice și gastrice. Interesul acestei cercetări este subliniat de faptul că majoritatea reacțiilor enzimatice in vivo au loc la nivelul membranelor biologice, adică la interfețe.
Acest UPR 9025 este alcătuit din 4 echipe de cercetare dedicate studiului lipazelor, care pot fi definite ca carboxil esteraze care catalizează hidroliza acilglicerolilor cu lanț lung:
- Lipoliza enzimatică a plantelor.
Se constată că enzimele lirolitice sunt responsabile de mobilizarea rezervelor lipidice care condiționează dezvoltarea semințelor oleaginoase în timpul germinării. Se pare astfel necesar să se analizeze modul de acțiune al acestor enzime și reglarea activității acestora pentru a înțelege mecanismele de creștere ale unei plante. Un alt aspect al acestui studiu este conservarea semințelor. Într-adevăr, acumularea de produse de hidroliză depreciază grăsimile conținute în semințele uleioase și reduce capacitatea lor de germinare.
Această echipă studiază lipazele și fosfolipazele purificate din semințe (floarea soarelui și bobul de ricin), dar și frunze (varză) sau culturi celulare (soia).
- Cinetica, structura și funcția enzimelor lipolitice.
Această echipă este interesată de relațiile structură-funcție în sistemul pancreatic lipază/colipază. Ea a determinat structura tridimensională a acestui complex pancreatic în prezența micelelor mixte de săruri biliare și fosfolipide. Deși fenomenul activării interfaciale este considerat a fi o caracteristică cinetică originală a familiei așa-numitelor lipaze adevărate clasice, lipaza pancreatică a cobaiului nu prezintă acest fenomen. Activitatea sa catalitică pe o emulsie de tributirină este independentă de prezența sărurilor biliare și a colipazelor. În plus, lipaza de cobai este la fel de activă pe fosfolipide ca și pe trigliceride utilizate ca substraturi.
Un alt domeniu de cercetare, în care s-a specializat această echipă, este dezvoltarea unui tensiometru automat pentru măsurarea continuă a tensiunilor interfațiale lichid/lichid sau gaz/lichid. Această metodă face posibilă monitorizarea continuă a acțiunii lipazei.
- Imunochimia enzimelor lipolitice.
Acest domeniu de cercetare se referă la aspectul imunologic (utilizarea anticorpilor monoclonali și policlonali) a relațiilor structură-funcție a lipazelor digestive, gastrice și pancreatice. Echipa a dezvoltat o analiză imunosorbentă legată de enzimă ELISA, de exemplu, pentru a măsura nivelurile de lipază din fluidele corporale și pentru a determina densitatea suprafeței enzimelor absorbite pe filmele lipidice monomoleculare. Originalitatea lipazei acidului lizozomal este că hidrolizează esterii colesterolului la fel de eficient ca și trigliceridele. Definirea caracteristicilor structurale, cinetice și fiziologice ale acestei enzime pare a fi unul dintre obiectivele acestei lucrări.