C0 Impactul ridicării punctelor de control ADN în progresia autorilor NAFLD

Introducere: Boala ficatului gras nealcoolic (NAFLD) este cea mai frecventă boală hepatică cronică, a cărei prevalență este în creștere în țările industrializate. În mod alarmant, NAFLD poate evolua către boli hepatice grase nealcoolice (NASH), ciroză și/sau HCC. În această secvență, am demonstrat o modificare a diviziunii hepatocitelor prin activarea „Răspunsului la deteriorarea ADN-ului” mediat de kinazele ATR și ATM. Munca noastră își propune să înțeleagă rolul acestor kinaze în dezvoltarea NAFLD.

ridicării

Pacienți și metode/sau materiale și metode: Am generat șoareci C57BL6/J vechi de 5 săptămâni ATR și/sau ATM (ko) mutați în mod specific în hepatocite prin tehnica CRISPR/Cas9 printr-un vector AAV8 hepato-tropical. Acești șoareci mutați au fost puși pe o dietă bogată în grăsimi cu deficiență de colină (CD-HFD) timp de 16 luni, recapitulând secvența NASH/CHC. Pentru a studia impactul delețiilor ATR-ATM asupra țesutului hepatic în acest context, analize biologice (test AST/ALT); histologic; s-au efectuat imunohistochimice și bioenergetice (Metabolomică). Culturile primare de hepatocite NAFL-NASH mutante ATR și/sau ATM (4 luni de dietă CD-HFD) au fost utilizate pentru studiul modificărilor diviziunii celulare (abordări de biologie celulară și moleculară) și pentru studiul metabolic prin analize bioenergetice (Metabolomică, Testul Seahorse).