Determinarea grupelor de sânge în sistemul ABO (kit de testare) - PDF descărcare gratuită

Determinarea grupelor de sânge în sistemul ABO (kit de testare 109.3140) Nivel de clasă Subiecte principale Subiecte Nivel de cerință Nivel de implementare Pregătire preliminară Implementare SII Imunologie Grupe de sânge Alele multiple 30 min Autor: Dr. Evi Derouet-Hümbert Determinarea grupului sanguin Încă din 1875, Landois a descoperit că, dacă eritrocitele miei sunt amestecate cu sânge de la câini și incubate la 37 C, celulele roșii din sânge ale mielului sunt lizate după 2 minute. În 1901, Karl Landsteiner (Premiul Nobel pentru medicină din 1930, vezi Fig. 41) a descoperit primul sistem de grupe sanguine umane și l-a numit sistemul AB0. Acesta a rămas până astăzi cel mai important sistem de grupe sanguine în schimbul de sânge. După analize extinse cu sânge de la membrii laboratorului său, el a definit 4 grupe de sânge: A, B, AB și 0. Pagina 1 din 21

Anticorpii (aglutinine, în principal IgM sau IgG), care pot avea cele patru proprietăți antigenice diferite (au ca rezultat o substanță diferită a grupului sanguin), apar și în plasma sanguină. Aceasta diferențiază între cele 4 grupe sanguine A, B, 0 și AB. Plasma de la persoanele cu grupa sanguină A conține aglutinină anti-B (anticorpi împotriva substanței grupului sanguin B). Plasa grupei sanguine B conține aglutinină anti-A. Plasa grupei sanguine 0 are anticorpii aglutinină anti-A și anti-B. În schimb, nu există anticorpi împotriva substanței grupului sanguin A și B în plasma grupei sanguine AB. Dacă eritrocitele (celulele roșii din sânge) ale unui anumit grup sanguin sunt aduse împreună cu plasma sanguină care are anticorpi împotriva grupului sanguin, cheagurile de sânge. Pe masa de laborator arată astfel: Pagina 3 din 21

0 rhesus pozitiv 35% B rhesus pozitiv 9% A rhesus negativ 6% 0 rhesus negativ 6% AB rhesus pozitiv 4% B rhesus negativ 2% AB rhesus negativ 1% distribuția frecvenței în diferite țări (selecție) pagina 6 din 21

Leucocitele sau celulele albe din sânge sunt împărțite în continuare în eozinofile, bazofile și neutrofilele, granulocitele, monocitele și limfocitele. Granulocitele sunt numite după comportamentul colorant al protoplasmei lor și, la fel ca monocitele, servesc apărării imune nespecifice, în timp ce limfocitele participă la apărarea imunitară specifică. Trombocitele sunt folosite pentru a opri sângerarea și astfel formează baza primei faze de vindecare a rănilor. Compoziția numerică a celulelor sanguine poate varia între speciile individuale de vertebrate. Caprele au un număr deosebit de mare de eritrocite (până la 14 milioane/µl), păsările de curte deosebit de scăzute (3 4 milioane/µl). Numărul de leucocite are variații la fel de mari: bovinele, caii și oamenii au aproximativ 8.000/µl, în timp ce oile (până la 17.000/µl) și păsările (până la 25.000/µl) au proporții deosebit de mari de celule albe din sânge. Proporția subtipurilor individuale de leucocite variază, de asemenea, considerabil. În timp ce granulocitele domină la oameni și cai (număr sanguin granulocitar), la bovine este limfocitele (număr sanguin limfocitar); la porci raportul dintre granulocite și limfocite este echilibrat (număr sanguin granulolimfocitar). Pagina 13 din 21

Cum arată componentele sângelui la microscop? Trombocite Neutrofile (conectate și segmentate) Eozinofile Stânga: Lobii nucleului acționează ca doi nuclei individuali. Cu toate acestea, în celulă conține un singur nucleu. Basofile pagina 14 din 21

Oamenii aparțin și care trebuie considerați străini. Limfocitele aparțin astfel sistemului imunitar adaptiv - apărării specifice - spre deosebire de sistemul imunitar înnăscut (înnăscut) (de exemplu macrofage). Durata de viață a limfocitelor poate varia de la câteva ore la câțiva ani. Celulele plasmatice formate prin diviziunea celulară a limfocitelor B au o durată de viață de câteva săptămâni, celulele de memorie, care sunt, de asemenea, formate din diviziunea celulară a limfocitelor B, rămân în organism timp de câțiva ani până la viață. Limfocitele își îndeplinesc sarcina în moduri diferite. De exemplu, eliberează substanțe mesager (citokine) care induc alte celule imune și celule normale să lupte împotriva pericolelor potențiale, cum ar fi bacteriile și virusurile. În plus, produc anticorpi care îi marchează pe acești atacatori ca fiind străini și distrug celulele infectate. Pagina 16 din 21

Experimentele prezentate mai jos pot fi efectuate cu seturile noastre de determinare a grupelor de sânge: 109.3140 Pregătirea experimentului În următoarele experimente vă veți aprofunda cunoștințele anterioare despre subiectul grupelor de sânge și le veți sprijini experimental. Vă rugăm să purtați haine de siguranță adecvate pentru toate experimentele (haina de laborator, ochelarii de protecție și mănușile sunt obligatorii atunci când lucrați în laborator). Experiment: test de hemaglutinare Fiecare grup primește o bandă de microtitrare. Etichetați această bandă așa cum se arată mai jos: Profesorul dvs. amestecă acum 700 µl de grupă de sânge A și 700 µl de grupă de sânge B într-un vas de reacție separat (martor pentru grupa de sânge AB). Acum adăugați 3 picături de sânge din fiecare probă de pacient și controlul în puțul prevăzut pentru aceasta. Utilizați întotdeauna un vârf de pipetă nou pentru a evita contaminarea. Acum adăugați (cu un nou vârf de pipetă) 20 µl de ser anti-A în fiecare godeu din primul rând. Pagina 18 din 21

Apoi adăugați (cu un nou vârf de pipetă) 20 µl de ser anti-B în fiecare godeu din al doilea rând. Plăcile trebuie să rămână neperturbate timp de 5-10 minute, apoi puteți începe evaluarea. Uitați-vă la puțurile individuale și notați reacția în care a avut loc aglutinarea. Rezultate: 1. Introduceți valorile (+/-) în următoarea diagramă: 2. Ce grupă sanguină au cei patru pacienți? 3. Ce transfuzie ar putea primi pacientul # 1 fără probleme? 4. Care este diferența dintre aglutinare și hemaglutinare? 5. Din ce este făcut sângele? 6. Care este diferența dintre plasma sanguină și serul sanguin? 7. Care sunt diferitele grupe de sânge? Rezultate așteptate: Următoarele rezultate ar trebui obținute experimental: Pagina 19 din 21

Soluții la întrebări: Tipul de sânge este un exemplu de test clinic de aglutinare. Deoarece antigenii specifici din sânge se află pe celulele roșii din sânge (eritrocite), o astfel de reacție se numește hemaglutinare. Sângele este format dintr-o fază lichidă și componente solide. Plasma reprezintă aproximativ 55% din volumul total al sângelui. Alte componente biologice din plasmă (aproximativ 10%) sunt proteinele și substanțele dizolvate, cum ar fi electroliții și nutrienții. Plasma este partea lichidă a sângelui. Unele proteine din plasmă sunt implicate în mod semnificativ în coagularea sângelui. Dacă aceste proteine sunt eliminate din plasmă, lichidul rămas se numește ser. Pe baza antigenelor de pe suprafața celulelor roșii din sânge, există patru grupe de sânge posibile în sistemul de grupe sanguine ABO: (1) Un antigen (2) Antigen B (3) AB (A și B) antigene (4) O (nici A. sau antigene B). Pagina 20 din 21