Diagnostic clinic de laborator Digestia blocului de organe, metabolizare - PDF Descărcare gratuită
Diagnostic clinic de laborator Digestia blocului de organe, metabolismul M. Stirn, R. Hofmann-Lehmann Facultatea Vetsuisse, Universitatea din Zurich http://www.epi4dogs.com/ Claire dog
Conținutul mal digerării, malabsorbției (pancreasului și funcției intestinale) examinarea fecalelor teste de absorbție (cal de testare a xilozei) imunoreactivitate similară cu tripsina (TLI) vitamina B12, pancreatită cu acid folic funcție hepatică pagina 2
Studiu de caz Jack Russel Terrier Cruna femeie, 2 ani, 6 kg greutate corporală Anamneză Pierdere masivă în greutate (3,5 kg) O mulțime de excremente, deseori, moale, maro deschis, mirositor, diaree cronică Polifagie Slabă, nu-i place mersul pe jos Examinare clinică Stare generală moderată Abdomen apatic tensionat Imagine simbolică Jack Russell Pagina 3
Chimie clinică Cruna F2 Material Hemolitic; Măsurarea marcată poate fi perturbată. pagina 5
Chimie clinică Cruna ff F3 material hemolitic; Măsurarea marcată poate fi perturbată. pagina 6
Interpretarea valorilor de laborator ale pacientului, preanalitice Pacientul sau valoarea de laborator sunt anormale? Specie, vârstă, rasă, pretratament, stres acut? Hemoliză, lipemie etc.? Combinați valorile de laborator în grupuri semnificative. Modificări specifice organelor? Puse în context clinic Există o explicație pentru schimbări? Elaborați un plan de diagnostic Bazat pe Leslie C Sharkey, Universitatea din Minnesota: Optimizarea utilizării biochimiei clinice de diagnostic, a 13-a Conferință a ESVCP/ECVCP, 2011 Trinity College, Dublin, Irlanda Pagina 7
Interpretarea valorilor de laborator (nu exhaustive) Leucocitoză, limfocitoză, ușoară monocitoză Excitare? Anemie normocitară ușoară, normocromă hipoproliferativă? evenimente cronice (inflamație, infecție), rinichi (eritropoietină), hipometabolice (deficiență tiroidiană, proteică) ALT și AST hemoliza crescută deranjează ficatul? (Lectură hepatică) fosfataza alcalină a crescut moderat - (prelegere hepatică; canal biliar, intestin, rinichi, osteoblaste; câine: legat de corticosteroizi, apoi puternic crescut, adesea plus limfopenie) amilază scăzută (pancreas, rinichi, ficat, următoarea prelegere, pancreatită. Crește important; Scăderea de obicei nu la câini) proteinele serice au scăzut, limita inferioară a albuminei a crescut pierderea (tractul gastro-intestinal, rinichii), a scăzut producția (ficat, malabsorbție)? Colesterolul scade rar, mal digestie, malabsorbție Cruna pagina 8
Posibile cauze ale pierderii în greutate Infecție bacteriană? Infectie virala? Parazitoza? Întreruperea absorbției în intestinul subțire? Tulburări digestive? Disfuncție în pancreas? (insuficiență pancreatică exocrină, EPI) inflamația pancreasului? Tulburare de drenaj biliar? Indigestie, malabsorbție Dacă Cruna suspectează o problemă pancreatică sau o boală cronică a intestinului, alte teste. Pentru a face acest lucru, introduceți câinele din nou sobor a doua zi, pagina 9
Maldigestie Insuficiență pancreatică exocrină Secreție inadecvată a enzimelor pancreatice 14 mai 2013 tract digestiv, II JK, Regina Hofmann-Lehmann pagina 10
Enzime digestive din pancreas Enzimele pancreatice joacă un rol important în digestie: carbohidrați a-amilazici (polizaharide) grăsimi lipazice (în glicerol și acizi grași; necesită emulsificare prin acizi biliari) proteină tripsină (endopeptidază, arginină, lizină) chimotripsină A proteină carboxipeptidază (proteină) Exopeptidază, capăt carboxil) elastază elastină DNază, ADN RNază, eliberare de ARN à ca forme inactive (zimogeni), clivaj în intestin pentru a evita autodigestia pagina 11
Maldigestie Insuficiență pancreatică exocrină Secreție inadecvată de enzime pancreatice pentru câini și pisici! Nu la cai și bovine Forme: - Juvenil datorat atrofiei acinare (ciobanesc german) - Pancreatită cronică la distrugerea pancreasului exocrin și, eventual, endocrin - obstrucția canalelor pancreatice 14.05.2013 tract digestiv, II JK, Regina Hofmann-Lehmann pagina 12
Malabsorbție intestinală Malabsorbție locală sau difuză a diferiților nutrienți (de ex. Carbohidrați, grăsimi, proteine) sau nutrienți specifici (de ex. Cobalamină) Cauze: - Inflamator - Neoplazic - Limfangieectazie 14 mai 2013 Tract digestiv, al doilea JK, Regina Hofmann-Lehmann pagina 14
Examen fecal Examen fecal macroscopic Culoare Argilă Indicarea perturbării scurgerii Lumină biliară Indicarea oaselor, antibiotice, insuficiență pancreatică exocrină Negru Indicație a sângerării Tract digestiv proximal Amestec de sânge Indicarea sângelui din secțiunile distale ale intestinului Miros Consistență Examinare fecală parazitologică Vezi Parazitologie De mai multe ori la pagina 15
Examenul fecal Examenul microscopic fecal (importanță scăzută) Examinări semicantitative pentru detectarea grăsimii, amidonului, fibrelor musculare pagina 16
Picături de grăsime în fecale, culoare Sudan (roșu) Bucăți de grăsime, culoare Sudan (roșu) Boabe de amidon, fecale, culoare Lugol (albastru-negru) pagina 17
Examenul fecal Examenul microscopic fecal (semnificație în scădere) Examinări semicantitative pentru detectarea grăsimii, amidonului, fibrelor musculare »Metode istorice» Detecția tripsinei folosind testul de digestie cu raze X Stratul de gelatină nu este digerat Stratul de gelatină digerat (enzimă prezentă) pagina 18
Examinare fecală Examinare microscopică fecală (semnificație în scădere) Examinări semicantitative pentru detectarea grăsimii, amidonului, fibrelor musculare »Metode istorice» Detecția tripsinei cu ajutorul testului de digestie cu raze X
Examenul fecal: fecale oculte cu sânge proaspăt. Nu hrăniți carnea cu 3 zile în prealabil (carnea conține hemoglobină și mioglobină -> rezultat fals pozitiv) Scrisoare de test, de ex. Test Hemo-FEC (Roche), Haemoccult (Beckmann Coulter). Omul: screeningul cancerului de colon Principiu: Efectul peroxidazic al hemoglobinei Cromogen + H 2 O 2 + peroxidază -> decolorare pagina 25
Maldigestie, malabsorbție - diagnostic de laborator Diferențierea insuficienței pancreatice exocrine (EPI) și a bolilor intestinale primare adesea dificil de diferențiat EPI poate duce la modificări ale digestiei la nivelul intestinului subțire proximal, cum ar fi supraaglomerarea bacteriană. astăzi cu câini și pisici în special panou biochimic: imunoreactivitate de tip tripsină (TLI), acid folic, vitamina B12 (cobalamină) TLI scăzut: dovezi puternice ale EPI Acidul folic a crescut și/sau vitamina B12 a fost redusă cu TLI în intervalul de referință: modificarea intestinului subțire proximal? Teste de absorbție: în trecut și la animale mici; încă cu calul azi pagina 26
Imunoreactivitate similară cu tripsina (TLI) Un pancreas funcțional eliberează cantități mici de tripsinogen, tripsină și fragmente ale acestuia în sânge. Acestea (inclusiv tripsina legată de inhibitori de protează) pot fi detectate ca imunoreactivitate de tip tripsină în sânge. Dacă pancreasul este subactiv (EPI), TLI din sânge este scăzut. Pagina 30
Procese fiziologice care influențează TLI (și PLI) TLI = Imunoreactivitate asemănătoare tripsinei PLI = Imunoreactivitate lipazică pancreatică (vezi lecția următoare) TAP = Peptida de activare a tripsinogenului Stockham și Scott, 2008: Patologie clinică veterinară pagina 31
Metode pentru detectarea testului imunologic TLI, tripsina nu este foarte conservată imunologic, prin urmare teste specifice speciei Anterior RIA (sensibil și specific), acum și ELISA, pentru câini și imunocromatografie (test rapid) EPI câine: TLI 2,5 µg/l 2,5 5,0 µg/l = zona gri EPI cat: TLI 8,0 µg/l 8,0 12,0 µg/l = zona gri Material: Ser preferat. TLI este stabil la temperatura camerei (2 săptămâni). Factori perturbatori: lipemie, animalul trebuie să fie sobru! Pagina 32
Acid folic și vitamina B12 Acid folic Anumite bacterii intestinale pot sintetiza și secreta vitamine, care sunt absorbite în intestin (jejun proximal). De exemplu: acid folic. În cazul creșterii excesive a bacteriilor, este posibilă creșterea producției de acid folic și, prin urmare, creșterea nivelului de acid folic în sânge. Vitamina B12 (cobalamină) Anumite bacterii consumă vitamina B12. În cazul creșterii bacteriene excesive, consumul de vitamina B12 în intestin este crescut și/sau absorbția vitaminei B12 este perturbată, reducând astfel vitamina B12 în sânge. Vitamina B12 este absorbită doar în jejunul distal și ileonul. Pagina 33
Explicație acid folic, vitamina B12 Cbl = cobalamină, vitamina B12 folat = acid folic IF = factor intrinsec, produs în pancreas (câine și pisică) și stomac (câine) Proteină R = cobalofilină/haptocorină, produsă în stomac Trans = transcobalamina 2, transport proteine bacterii nevoie de bacterii cobalamină produc acid folic Multe bacterii (creșterea excesivă a bacteriilor): se consumă mai multă cobalamină, se produce mai mult acid folic Deficiență de cobalamină: cobalamina este necesară pentru a cataliza acidul folic în forma sa biologic activă. Deficitul de cobalamină poate duce la un deficit funcțional de acid folic Stockham și Scott, 2008 Patologie clinică veterinară
Relația dintre vitamina B12 și acidul folic Stockham și Scott, 2008 Patologie clinică veterinară Vitamina B12 (cobalamina) este un cofactor pentru sinteza metioninei și servește ca primitor pentru grupul metil al N5-metiltetrahidrofolatului. În cazul deficitului de vitamina B12, grupul metil nu este transferat și apare în Celula până la un deficit de tetrahidrofolat 5-metiltetrahidrofolat este, de asemenea, măsurată ca acid folic, deci deficit funcțional de acid folic, nu absolut pagina 35
Măsurarea vitaminei B12 Analize competitive de legare a proteinelor Analize umane nu întotdeauna fiabile pentru alte specii; De exemplu, din cauza proteinelor care leagă cobalamina în serurile câinilor și pisicilor. Material: ser, nu stabil la temperatura camerei! la 4 1 zi; la -20 6-8 săptămâni trimiteți cu excluderea luminii Crește: de obicei vine nu inainte. Cu excepția suplimentării. Sau cu necroză a celulelor hepatice. Celulele hepatice stochează vitamina B12. Umilire: numai atunci când memoria corpului este epuizată. Cazul mai repede la animale decât la oameni. Pagina 36
Măsurarea acidului folic Măsurarea acidului folic total (inclusiv N5-metiltetrahidrofolat). Acidul folic nu a scăzut neapărat în măsurare, deși deficiența funcțională (de tetrahidrofolat), cauzată de deficiența vitaminei B12 Analiză competitivă de legare a proteinelor (β-lactoglobulină) Material: Ser, nu stabil la temperatura camerei! la 4 1 zi; la -20 6-8 săptămâni, supunerea sub lumină, hemoliza interferează! Scurgerile de acid folic din eritrocite. Pagina 37
Interpretare TLI, vitamina B12, acid folic TLI acid folic vitamina B12 ò ò (pisică, parțial câine) Insuficiență pancreatică exocrină (EPI) ò (GI proximal) ò (GI distal) sindrom de malabsorbție + +/- ò creșterea bacteriană a intestinului subțire pagina 38
Test de absorbție: calul testului Xilozei Enterocitele funcționale transportă xiloză prin mucoasă (duoden, jejun) în sânge (transport activ). Eliminarea rinichilor Valorile subnormale susțin diagnosticul de malabsorbție. Procedură: Calul repede timp de 15 ore, informați laboratorul, greutatea calului (xiloză: 0,5 g/kg greutate corporală; 0,1 g/ml în apă călduță) luați sânge în tuburi de fluor, înainte de administrarea xilozei prin NSS și la fiecare 30 de minute după 4 ore pagina 39
Calul testului xilozei Cal sănătos: cele mai mari valori după 1-2 ore 15 mg/dl peste valoarea bazală mg/dl curbă minute în formă de clopot Valorile sunt oarecum dependente de dieta calului. Vârfuri mai ridicate bogate în cioburi decât hrănirea cu energie ridicată Curbă plană datorită absorbției reduse în cazul bolilor intestinului subțire, transport incomplet la intestin (vărsături, tulburare de golire gastrică) sau tranzit intestinal rapid (diaree) Influența GFR asupra ratei de excreție (eliminare întârziată) pagina 40
Acid folic, Vit B12, TLA Cruna (eșantion de sânge ziua 2, post) 7.7-24.2 ð ð Compatibil cu insuficiența pancreatică exocrină (EPI) (TLI 2,5 µg/l) Deficitul de vitamina B12, secundar EPI pagina 43
Terapie Cruna Puneți pulbere de enzimă pancreatică pe furaje. Înlocuirea enzimelor lipsă. Injecție cu vitamina B12 (Vitarubin). Eliminați deficiența. Metronidazol (antibiotic) împotriva inflamației potențiale și a creșterii bacteriene a intestinului. Cruna crește injecțiile repetate de vitamina B12, controlul regulat al terapiei EPI pe tot parcursul vieții! Pagina 44