Efectele acaricidelor asupra albinei Apis mellifera intermissa și analiza activității

REPUBLICA DEMOCRATĂ OAMENI Algeriană MINISTERUL EDUCAȚIEI SUPERIOR ȘI CERCETARE ȘTIINȚIFICĂ BADJI- MOKHTAR-ANNABA FACULTATEA DE STIINTE CATEDRA DE LABORATOR LABORATOR DE BIOLOGIE ANIMALE APLICAT DE MEDIU BIOLOGIE THEESIS DE PHYSICIDE 3-lea ANIMICIDE PHARSIOLOGY 3 rd CYOTOCIDAL PHARSIOLOGY: OPICOIDAL PHARSIOLOGY 3 TEZĂ ANIMICIDE ACIDICIDĂ 3 albină Apis mellifera intermissa și analiza activității antimicrobiene a propolisului și a mierii. Prezentat de: Mme Neila NEDJI În fața juriului compus din: Președinte: M. Noureddine SOLTANI Director de teză: Mme Wahida AYAD-LOUCIF Examinator: Mme Fouzia TINE-DJEBAR Examinator: M. Kamel LOUADI Examinator: M. Mohamed ACHOU Examinator: Mme Selima BERCHI Pr., Univ. Annaba MCA, Univ. Annaba MCA, Univ. Tébessa Pr., Univ. Constantin Pr., Univ. Annaba Pr., E.N.S.B. UNIVERSITATEA Constantin ANUL 2014/2015

Dorim să îi mulțumim foarte mult prof. D. KIRANE, care mi-a permis să fac toate analizele de microbiologie la nivelul Laboratorului de microbiologie, Universitatea din Annaba. Mulțumim, de asemenea, dr. I. BITAM, de la Institutul Pasteur din Alger, pentru ajutorul său neprețuit, oferindu-ne tulpini microbiene de referință. Un mare mulțumire domnului F. BOUSSOUAK, apicultor, precum și colaboratorilor săi pentru ajutorul lor prețios și generos în stupină. De asemenea, vreau să-mi exprim mulțumirile din toată inima tuturor persoanelor care au contribuit direct sau indirect la realizarea muncii mele. Mulțumesc călduros profesorilor din departamentul de biologie pentru ajutor și îndrumare în timpul instruirii noastre. Tuturor celor care au participat direct sau indirect la realizarea acestei lucrări.

Dedicații Dedic această lucrare părinților mei; că îmi găsesc aici toată recunoștința pentru sprijinul lor pe parcursul studiilor mele. Dragului meu soț Kamel care m-a susținut atât de mult. Dragilor mei socri. Copiilor mei Nourhene, Faten și Youness. Pentru surorile și frații mei. Nepoților și nepoatelor mele. Pentru prietenii mei. Pentru oricine a contribuit direct sau indirect la dezvoltarea acestei teze.

4.2. Conținutul total de flavonoide din propolis. 33 5. Analiza activității antimicrobiene a propolisului. 34 5.1. Diametre ale zonelor de inhibare a creșterii tulpinilor microbiene. 34 5.2. Concentrația minimă inhibitoare de propolis. 37 6. Efectul acidului oxalic prin aplicare topică asupra activității specifice a glutationului S-Transferază la lucrătorii A.mellifera intermissa. 38 7. Efectul acidului oxalic asupra histopatologiei intestinului mediu al lucrătorilor A. mellifera intermissa. 39 II. DISCUȚIE.40 CAPITOLUL II: Activitatea antimicrobiană a mierii și a propolisului împotriva bacteriilor patogene transmise de alimente. I. REZULTATE 1. Compararea parametrilor fizico-chimici ai mierii din diferite regiuni fitogeografice. 46 2. Compararea conținutului de polifenoli și flavonoide totale din miere și propolis în diferitele regiuni fitogeografice. 47 3. Analiza activității antimicrobiene a mierii și a propolisului din diferite regiuni fitogeografice în ceea ce privește bacteriile patogene transmise de alimente. 48 II. DISCUŢIE. 49 CONCLUZII ȘI PERSPECTIVE. 54 REZUMATE. 56 franceză. 56 engleză. 58 arabă. 60 REFERINȚE BIBLIOGRAFICE. 62 ANEXE (PRODUCȚIE ȘTIINȚIFICĂ). 100

LISTA TABELELOR Tabelul 1. Comparația valorilor medii ale parametrilor fizico-chimici ai mierii înainte de tratamentul cu acaricide ... 26 Tabelul 2. Compararea valorilor medii ale parametrilor fizico-chimici ai mierii după tratamentul cu acaricide ... 27 Tabelul 3. Concentrații minime inhibitor de miere (mg/ml) înainte și după tratamentul cu acaricide pentru fiecare tulpină microbiană. 32 Tabelul 4. Concentrația minimă inhibitoare a extractului etanolic de propolis (µg/ml) înainte și după tratamentul cu acaricide pentru fiecare tulpină microbiană. 37 Tabelul 5. Compararea valorilor medii ale parametrilor fizico-chimici ai mierii în funcție de regiuni. 46 Tabelul 6. Compararea valorilor medii ale conținutului de polifenoli și flavonoide totale din miere și propolis în funcție de regiune. 47

Figura 17. Activitatea specifică a glutationului S-transferaze (μm/min/mg proteină) a intestinului mediu al lucrătorilor nou-născuți după aplicarea topică a acidului oxalic 38 Figura 18. Imagini microscopice ale epiteliului intestinal al unei albine tratate cu acid oxalic ( 3,5%). 39 Figura 19. Imagini microscopice ale epiteliului intestinal al unei albine tratate cu acid oxalic (20%) 39 Figura 20. Diametre ale zonelor de inhibare (mm) a creșterii bacteriene de către miere la nivelul fiecărei regiuni fitogeografice. 48 Figura 21. Diametre ale zonelor de inhibare (mm) a creșterii bacteriene de către extractul etanolic de propolis la nivelul fiecărei regiuni fitogeografice. 49

Intrducție Dintre paraziții albinelor, Varroa destructor (Acari: Varroidae) (Anderson și Trueman, 2000) este considerat a fi una dintre cele mai grave amenințări la adresa Apis mellifera (de la Rúa și colab., 2009; vanengelsdorp & Meixner, 2010; Brodschneider și al., 2010; Chauzat și colab., 2010; Dahle, 2010; Genersch și colab., 2010; Guzmán-Novoa și colab., 2010; Potts și colab., 2010; Rosenkranz și colab., 2010; Schäfer și colab. ., 2010; Topolska și colab., 2010; Vanengelsdorp și colab., 2010; Noireterre, 2011; Martin și colab., 2012). V. destructor este un acarian de albină ectoparazitar care se hrănește cu hemolimfa sa (Dahle, 2010; Martin și colab., 2010; 2012; Nazzi și colab., 2012). Poate avea trei tipuri de acțiune asupra Apis mellifera: mecanică (Kanbar & Engels, 2003), vector al multor agenți infecțioși ai albinelor (Weinberg și Madel, 1985; Tentcheva și colab., 2004; Shen și colab., 2005; Prisco și colab. al., 2011; Wendling, 2012; Dainat și colab., 2012) și spoiler (Duay și colab., 2003). Consecințele varroazei asupra albinelor sunt în principal o reducere a corpului corpului, a concentrației de proteine și glucide hemolimfatice la apariție (Smirnov 1978; De Jong și colab., 1982; Weinberg și Madel, 1985; Achou și Soltani, 1997; Bowen -Waker & Gunn, 2001) și longevitate (De Jong & De Jong, 1983; Schneider & Drescher 1987; Kovak & Craisheim, 1988, Amdan și colab., 2004). De asemenea, observăm o activitate timpurie de hrănire a lucrătorilor (Schneider & Drescher 1987) și dificultăți de supraviețuire în timpul iernii (Kovac și Crailsheim, 1988). Alte trăsături fiziologice constau în degenerarea corpurilor grase și subdezvoltarea glandelor hipofaringiene (De jong și colab., 1982; De Jong și De Jong, 1983; Schneider și Drescher, 1987). Există, de asemenea, o modificare a ontogeniei și expresiei glicoproteinelor spermatozoizilor, cu o reducere a diametrului glandei mucusului și a veziculelor seminale, precum și a numărului de spermatozoizi (Rinderer și colab., 1999). O scădere a dimensiunii flagelului antenal și a numărului de senzile antenale (Abd EL-Wahab și colab., 2006), precum și o scădere a supraviețuirii până la apariție (Rinderer și colab., 1999); s-a înregistrat numărul de bondari care au atins vârsta maturității sexuale (Collins & Pettis, 2001) și frecvențele de zbor (Schneider, 1987). Toate aceste efecte afectează negativ procesul de împerechere competitiv (Bubalo și colab., 2005). 4