Influența unei diete cu rafinoză și a semințelor de leguminoase gătite asupra unor procese din intestinul gros
Documente
Transcrierea Influenței unei diete de rafinoză și a semințelor de leguminoase gătite asupra unor procese din colon.
The Food 31 (1987) 10.971-980
Institute for Food and Nutrition (Director: Prof. Dr. med. W. B. sZOSTAK), warSZaWa, VR Polonia
Influența unei diete de rafioză și a semințelor de leguminoase gătite asupra unor procese din șobolanul colon B. JAC
S-au examinat modificările valorii pH-ului, a activității enzimatice și a microflorei din conținutul intestinului gros al șobolanilor după hrănirea unei povești de rafinoză și semințe de leguminoase fierte (soia, mazăre, fasole). Atât hrănirea cu o dietă care conține 12% rafinoză, cât și hrănirea cu semințe de legurnoză au dus la scăderea pH-ului; Cu toate acestea, când s-au administrat alte diete (de exemplu lapte praf sau orz crud), s-a observat scăderea valorii pH-ului. O activitate α-galactozidază remarcabilă a fost găsită în intestinul gros al șobolanilor după leguminoză, dar nu și în intestinul subțire. Sursa activității galactozidazei este probabil bacteriile din conținutul intestinului gros (Lactobacillus sp., Enterococncr, Escherichia colq. Nu s-au putut stabili relații între tipul diitului și microflora izolată.
Se presupune că zaharidele familiei rafinozei (rafinoză, stachioză, verbascoză) se numără printre factorii care reduc valoarea nutritivă a semințelor de leguminoase. Deoarece există o lipsă de enzime în sistemul digestiv care descompun a-galactozaharidele, nici oamenii, nici multe animale nu le pot asimila [1-31.
Când șobolanii mănâncă semințe fierte de soia, mazăre și fasole timp de câteva zile, fecalele animalelor conțin o cantitate de galactozaharide care cu greu reprezintă 2-5% din cantitatea administrată împreună cu dieta [4]. Scindarea acestor zaharide poate avea loc în intestinul gros sub influența enzimelor florei intestinale. Acest lucru creează o mulțime de gaze, în special hidrogen și dioxid de carbon [de ex. B. 5-71. Cantitatea de hidrogen excretată în timpul „procesului de formare a gazelor” care se creează după ingestia de leguminoase prezintă o corelație pozitivă cu cantitatea de galactozaharide administrate în dietă [8,9].
CRISTOFARO u. A. [lo] a atras atenția asupra modificării pH-ului în intestinul gros al șobolanului în timpul digestiei făinii de soia. Ei au văzut acest fenomen în legătură cu formarea gazelor după consumul de făină. O dietă cu cazeină sau carne nu a dus la dezvoltarea gazelor sau la scăderea pH-ului în intestinul gros. Autorii au constatat o scădere a pH-ului în intestinul gros al șobolanilor chiar și atunci când 1-3% Verbascose a fost administrat împreună cu dieta, dar nu au investigat influența altor galactozaharide.
Obiectivul tezei: aprofundarea cunoștințelor biochimice și microbiologice
972 The Food 31 (1987) 10
Procese care apar în organism după consumul semințelor de leguminoase. Această problemă este o continuare a studiilor anterioare [4] și este legată de interesul crescut care s-a manifestat în Polonia în ultimii ani în creșterea proporției semințelor de leguminoase în alimentația umană și animală.
Animale experimentale urid Pluri de investigații biologice
Pentru investigații, s-au folosit șobolani Wistar masculi de vârsta de aproximativ 6 luni (crescuți), cu o greutate (350-10) g din propria rasă. În perioada dintre evacuarea șobolanilor și începerea experimentelor, animalele au fost hrănite cu mufă de reproducere produsă industrial "Murigran". În timpul studiilor, șobolanii au fost ținuți individual în cuști metabolice; ), unde s-a verificat cantitatea de alimente consumate și s-a determinat creșterea în greutate. Durata examinărilor: 96 h. Planul de examinare este prezentat în Tab.
Tabelul 1 Programul investigațiilor biologice (numărul de șobolani examinați între paranteze)
Tipul dietei Durata examinării [h]
Absolvent de reproducție Murigran (absolvent de control I) PH (12) E (5) B (5)
Absolvent de reproducție Murigran + 4 "/, rafinoză Absolvent de reproducție Murigran + 8"; Dieta pentru reproducere rafinoză Murigran + 12 "', soia gătită cu rafinoză
Grâu de orz (crud) Fulgi de ovăz chifle de făină de grâu Cartofi fierți Lapte integral uscat Dieta cu amidon de cazeină fără RaEnose PH (6) (dieta de control 11) E (3)
B (6) Dieta cu amidon de cazeină + 4? O Dieta de amidon cu cazeină Rafinose + 8 4; Dieta cu amidon de cazeină rafinoză + rafinoză 12? C
pH - determinarea valorii pH-ului, determinarea enzimei E, B
RZYNSKI: Raffinose Diet 973
Înainte de efectuarea determinărilor chimice, enzimatice și bacteriologice, animalele au fost decapitate între orele 8 și 9 dimineața și conținutul de colon al fiecărui șobolan a fost luat pentru sine. În plus, pH-ul conținutului intestinal a fost determinat la 21 de șobolani după ce li s-au administrat 300 mg de rafinoză (2 ml soluție 15%) printr-o sondă. Modificările pH-ului conținutului de colon au fost testate la 160 din totalul de 200 de animale testate. Au fost determinate activități enzimatice suplimentare la aproximativ 30 de șobolani în care s-a determinat pH-ul conținutului de colon. Dacă activitatea enzimatică din intestinul subțire trebuia determinată, mucoasa a fost îndepărtată din epiteliul interior al unei secțiuni a intestinului care a fost situată la aproximativ 20 cm de intestinul gros. Examenele bacteriologice au fost efectuate la aproximativ 45 de șobolani, pe lângă determinarea pH-ului conținutului de colon.
Experimentele biologice propriu-zise au fost precedate de experimente preliminare pe alți 40 de șobolani; De asemenea, s-a determinat în ce măsură animalele au acceptat dietele administrate (inclusiv glucoză pură, galactoză, zaharoză, lactoză și rafinoză).
Au fost administrate următoarele diete: 1. Dieta cu amidon de cazeină (fără rafinoză) conform HEDIN u. A. [Am folosit 11 în investigații anterioare
a fost. [4] Conținea: 18% cazeină, 8% ulei de soia, 5% amestec de sare minerală, 14% celuloză, 1% amestec de vitamine, 54 7; Amidon de grâu. Această dietă a fost una dintre cele două diete de control.
2. Dietele de amidon de cazeină cu 4, 8 și 12% rafinoză. În aceste diete, o parte din amidonul de grâu (4, 8 și 12%) a fost înlocuit cu rafinoză. S-a utilizat D (+) - rafinoză (pentahidrat) de la Sigma.
3. Murigran de reproducere pregătit industrial (ca grad de control) 4. Murigran de reproducție de calitate, cu pantaloni de plută de 4, 8 și 12%. 5. Semințele fierte de soia, mazăre și fasole utilizate în studiile anterioare-
ren [4]. Soia (soiul Ajma) conține, înmuiat, fiert și pre-uscat (43,4% proteine; 5,9 ani sawharide solubile). Mazăre, conținute, înmuiate, fierte și pre-uscate (22,6 proteine; 3,4% zaharide solubile). Fasole albă, înmuiată, gătită și pre-uscată (23,8% proteine; 3,3% zaharide solubile).
6. Pentru a determina valoarea pH-ului conținutului de intestin gros, animalele au fost hrănite și cu alte produse disponibile în comerț: gri de orz, fulgi de ovăz, pâine de grâu, cartofi fierți și lapte uscat.
METODE I. Valoarea pH-ului conținutului intestinal a fost măsurată cu pH-metrul Radiometer (cu două pahare și
Electrozi Calomel) cu o precizie de până la 0,05 (valori medii de la 3 determinări fiecare, care au fost efectuate în paralel pe același conținut intestinal al aceluiași animal).
2. Întrucât un standard de α-galactozidază nu ne era disponibil, investigațiile efective au fost precedate de experimente metodice introductive: au inclus obținerea unui preparat enzimatic nepurificat din drojdia de bere, determinarea condițiilor optime pentru hidroliza enzimatică in vitro pentru rafinoză și compararea efectului preparatului de drojdie obținut cu efectul enzimatic al conținutului de colon al șobolanului.
În cele din urmă, optimul pentru hidroliza enzimatică a rafinei (in vitro) a fost considerat a fi: pH = 6,0 (amestec tampon acid citric: 9,5 ml acid citric 0,1 M (21,0 g/l) + 4,5 ml 0,1 M citrat de sodiu C., H, 0, Na3 x 2H, O (29,41 g/l), compus până la 100 ml cu H, O); o concentrație a enzimei care corespunde la 2 ml de preparat (sau 40 mg din conținutul intestinal), o concentrație de zaharide în probă de 0,2 g; o temperatură de test de 37 "C în decurs de 2,5 ore.
În condițiile menționate, 30 μl din probă au fost reperate pe hârtia de șters; acest lucru a dat o imagine cromatografică bună a zaharidelor obținute prin hidroliza rafinozei, atât cu aplicarea preparatului de drojdie, cât și a enzimelor conținutului de colon al șobolanului.
Zaharidele au fost identificate prin cromatografie pe hârtie. Condiții: creastă de dezvoltare Chropa, descendentă; Amestec de solvenți: acetat de etil - acid acetic - apă 3: 1: 3; Hârtie Whatman nr. 3; Dezvoltare 48 h la 18 "C; tehnica de imersie în soluția de reactiv conform TREVELYAN [12].
Cantitatea de galactoză luată ca valoare de activitate a or-galactozidazei a fost presupusă a fi sub 0. a. Condițiile devin gratuite. Cantitatea de zaharide (produsele de degradare ale rafinozei) a fost determinată indirect (ca suprafață a petei cauzată de Ex-
914 The Food 31 (1987) 10
Curba densității a fost determinată direct pe hârtia de cromatografie utilizând metoda densitometrică 1131).
3. Din motive tehnice, investigațiile bacteriologice s-au limitat la determinarea bacteriilor aerobe în intestinul gros al animalelor. În timpul examinărilor bacteriologice, animalele au primit diferite diete de testare (un aport