Lectina de tip C indusă de macrofage stă la baza fibrozei țesutului adipos indusă

lectina

  • Subiecte
  • Abstract
  • introducere
  • Rezultate
  • Țesut adipos Expresie amenda în obezitate
  • Modificarea distribuția lipidelor la șoareci Mincle KO
  • Îmbunătățirea metabolismului glucozei la șoareci Mincle KO
  • Reducerea fibrozei țesutului gras la șoareci Mincle KO
  • Reducerea formării CLS în țesutul adipos al șoarecilor Mincle KO
  • Exprimarea genelor fibrogene stimulate de Mincle în macrofage
  • Creșterea miofibroblastelor stimulată de oțelă în FCS
  • Fibroza interstițială stimulată de trentil în țesutul adipos
  • Discuţie
  • Metodele
  • Reactivi
  • Animale
  • Analiza histologică
  • Hibridizare în daca tu
  • Analize citometrice de flux
  • Analiza microscopică confocală
  • Conținutul de colagen în țesutul adipos
  • Conținutul de trigliceride în ficat
  • Teste de toleranță la glucoză și insulină
  • Western blot a lui Akt
  • Analiza serului
  • Stimularea CT
  • PCR cantitativă în timp real
  • Analiza microarray-ului ADN
  • Experimente BMT
  • analize statistice
  • Informatii suplimentare
  • Aderări
  • Expresie genică Omnibus
  • Informatii suplimentare
  • Fișiere PDF
  • Informatii suplimentare
  • comentarii

Subiecte

  • Monocite și macrofage
  • Obezitatea
  • Patogenie

Abstract

introducere

Întrucât este locul crosstalk-ului între adipocite și macrofage, există o structură unică în țesutul adipos obez numită structură a coroanei (CLS), unde se crede că macrofagele colectează picăturile lipidice reziduale din adipocitele moarte 9, 10. Din punct de vedere histologic, macrofagele M1 pro-inflamatorii se agregă pentru a forma SLC în țesutul adipos obez al oamenilor și al rozătoarelor. În schimb, macrofagele M2 sunt dispersate în spațiile interstițiale dintre adipocite 10. În special, numărul de CLS este corelat pozitiv cu rezistența sistemică la insulină la subiecții obezi 11, 12, ceea ce sugerează rolul fiziopatologic al CLS în inflamația țesutului adipos și în metabolismul energetic sistemic. Cu toate acestea, nu este bine înțeles cum se formează țesutul adipos în cursul obezității și cum este implicat în remodelarea țesutului adipos.

Arătăm aici că Mincle, atunci când este indus în timpul dezvoltării obezității, este localizat la macrofagele care constituie CLS în țesutul adipos. Interesant este că șoarecii Mincle KO sunt protejați împotriva formării CLS induse de obezitate și fibroza țesutului adipos, urmată de acumularea redusă de lipide ectopice și rezistența la insulină în ficat. Mai mult, tratamentul cu trehaloză-6, 6'-dimicolat (TDM), un glicolipid al peretelui celular micobacterian cunoscut a fi un ligand Mincle 13, induce formarea CLS și fibroză interstițială în țesutul adipos la șoareci. Stimularea fină promovează, de asemenea, expresia puternică a genelor legate de fibroză în macrofage in vitro. Acest studiu oferă dovezi că Mincle joacă un rol în diafragma dintre adipocite și macrofage în CLS, ducând astfel la activarea programului fibrogen. Datele noastre sugerează, de asemenea, că antagonismul lui Mincle în macrofage oferă o nouă strategie terapeutică pentru a preveni sau trata fibroza țesutului adipos indusă de obezitate și, astfel, acumularea de lipide ectopice.

Rezultate

Tesutul gras Expresie fina in obezitate

( la ) Evoluția în timp a expresiei mRNA și Emr1 a lui Mincle (F4/80) în țesutul adipos epididimal al șoarecilor de tip sălbatic hrăniți cu HFD sau SD pentru o perioadă de până la 50 de săptămâni. Valorile sunt medii ± săptămânale. Datele sunt analizate prin test t nepereche; n = 5 la 11; † P †† P § P §§ P -, CD45 + CD11b - F4/80 - și CD45 + CD45 + CD11b + F4/80 + izolate din SVF, mRNA, Emr1, Acta2 (αSMA). Valorile sunt medii ± săptămânale; n = 4. ( e ) Procentul de celule care exprimă Mincle în diferite celule imune FCS. Valorile sunt media a patru eșantioane.

Imagine la dimensiune completă

Distribuția modificată a lipidelor la șoarecii Mincle KO

( la ) Greutatea corporală și greutatea grăsimii și a ficatului la șoareci Mincle KO și șoareci sălbatici la 16 săptămâni. Valorile sunt medii ± săptămânale. Datele sunt analizate prin analiza varianței (ANOVA) urmată de testul Tukey-Kramer. ## P # P ## P ¶ P

( la ) Ilustrarea experimentelor stimulate de TDM folosind SVF. FSV-urile preparate din țesut adipos epididimal al șoarecilor ob/ob au fost stimulate prin CT timp de până la 3 zile. ( ) Efectul stimulării CT asupra expresiei ARNm a Mincle, Tnfa, genelor legate de fibroză (Tgfb1, Pdgfb, Timp1) și Acta2. Valorile sunt medii ± săptămânale. Datele sunt analizate prin test t nepereche; n = 4, ** P - CD31 - în FCS, bogat în fibroblaste, preparat din țesut adipos epididimal al șoarecilor ob/ob utilizând sistemul de sortare a celulelor magnetice (MACS). Celulele au fost stimulate cu CT timp de 7 zile. ( d ) Efectul stimulării CT asupra expresiei ARNm a Acta2 și Col1a1 (colagen I). Valorile sunt medii ± săptămânale. Datele sunt analizate prin test t nepereche; n = 4, ** P

Pe baza observațiilor noastre, ipotezăm un rol al Mincle în inflamația țesutului adipos în obezitate (Fig. 8). În timpul dezvoltării obezității, expresia Mincle este indusă în primul rând de TLR4 în macrofagele infiltrate, după cum sa raportat anterior 18. Activat de un ligand endogen eliberat din adipocitele pe moarte, Mincle este implicat în agregarea macrofagelor pentru a forma CLS, unde există o interacțiune susținută între adipocite și macrofage. Activarea felierii induce, de asemenea, expresia genelor legate de fibroză prin Syk, ducând astfel la formarea miofibroblastelor, posibil prin comunicarea intercelulară între macrofage și fibroblaste. Ca urmare, supraproducția ECM poate limita hipertrofia adipocitelor induse de HFD, care joacă un rol în acumularea de lipide în ficat și în intoleranța la glucoză.