Rapoartele Aurich Science Days DIfE (III)
Raport de stagiu
Stagiu la DIfE Potsdam-Rehbrücke
în perioada 7-18 octombrie 2019
De Antje Soeken
Datorită Zilelor Științei Aurich, am putut face un stagiu de două săptămâni la Institutul German pentru Cercetări Nutritive din Potsdam în pauza de toamnă. Am vrut să fac un stagiu la Institutul german de cercetare nutrițională, pentru că vreau să mă orientez profesional în domeniul nutriției. La Institutul german de cercetare nutrițională am fost repartizat în domeniul diabetologiei sub conducerea profesorului Schürmann. Persoana mea de contact a fost Dr. Leager, postdoctorul meu, supraveghetorul Teresa.
ziua 1
În prima zi am fost primit de secretară, care mi-a arătat institutul și mi-a dat o haină de laborator și chei pentru dulap și laborator.
Apoi am fost prezentat Dr. Leager și echipa sa au prezentat. Cercetarea se referă la evitarea diabetului de tip 2. Diabetul de tip 2 are loc atunci când organele devin rezistente la insulină, care ar trebui să stimuleze organele să absoarbă glucoza. Cu toate acestea, dacă organele sunt rezistente la insulină, glucoză este absorbită puțin sau deloc. Acest lucru determină pancreasul să producă mai multă insulină, crezând că există mai multă glucoză, deoarece nu este absorbită. După un timp, pancreasul suferă multe daune și produce mai puțină sau nu mai multă insulină.
Prin cercetări referitoare la diete, aceștia au descoperit că zahărul din sânge al diabeticilor de tip 2 nu este la fel de ridicat într-o dietă cu conținut scăzut de proteine ca și în alte diete. Acest lucru a ridicat întrebarea „de ce?”. De ce cei cu o dietă săracă în proteine absorb glucoza din sânge și cei cu o dietă diferită nu?
S-a dovedit că proteina FGF21 este produsă în ficat printr-o dietă săracă în proteine, ceea ce face ca organismul să observe că are nevoie de energie și astfel stimulează organele să absoarbă glucoza. FGF21, care înseamnă „Fibroblast Growth Factor 21”, își asumă astfel rolul de insulină. Cu toate acestea, evitarea completă a proteinelor este foarte dificilă și o dietă aproape insuportabilă. Apoi s-a luat în considerare dacă nu ar trebui să se ia doar un anumit tip de proteină esențială și anume metionina. Se evită metionina urmând o dietă cu conținut scăzut de carne.
La întâlnirea echipei am fost apoi întâmpinat de profesor și au discutat despre sarcini pentru săptămâna următoare.
Apoi am urmărit-o pe supraveghetorul meu, Teresa, lucrând pe un complot occidental care poate fi folosit pentru a determina mărimea proteinelor. Mai târziu am pregătit farfurii Petri pentru cercetarea viitoare a celulelor insulelor.
ziua 2
A doua zi a început cu pregătirea din nou a vaselor Petri. Apoi mi s-a arătat laboratorul de celule, unde celulele sunt cultivate pentru diferite experimente. Mai târziu am făcut un test cu Teresa pentru un experiment pentru ziua următoare în care ficatul a fost îndepărtat de la un șoarece pentru a obține material pentru cercetări ulterioare.
După pauza de masă, am efectuat o determinare a proteinelor cu un alt stagiar, în care proteinele sunt comparate cu standardele. Acest lucru a durat până la sfârșitul zilei de lucru, deoarece a trebuit să pipetăm foarte mult, ceea ce sa dovedit a fi foarte consumator de timp.
Ziua 3
Dimineața, eu și supraveghetorul meu am pregătit laboratorul pentru experimentul dorit pe șoarece. Este un șoarece B7, sunt foarte subțiri și au aproximativ 10-18 săptămâni în experiment. Am prezentat toate lucrurile de care aveam nevoie și am amestecat soluțiile pentru experiment.
După ce totul a fost pregătit, primul șoarece a fost anesteziat. După câteva minute a fost efectuat un test pentru a determina dacă șoarecele nu mai putea simți nimic. Apoi a fost deschis în burtă și stomacul cu intestinul subțire și gros a fost așezat cu atenție din corp pentru a expune vena cavă. A fost introdus un ac în vena cavă, care pompează tamponul 1 prin el. Între timp, vena portală este deschisă, astfel încât sângele să poată scăpa din corp. Tamponul 1 face ficatul mai ușor și puțin mai mare. După un timp, tamponul 1 este schimbat cu tamponul 2. Tamponul 2 asigură că celulele hepatice se dizolvă în ficat.
Când ficatul devine spongios, este tăiat din corp. Ficatul este așezat pe o secțiune textilă și micșorat cu o pereche de pensete. Ficatul devine fluid. Celulele hepatice au fost apoi aduse în contact cu tamponul 3 și centrifugate. Ca rezultat, celulele dorite sunt depuse pe podea și „deșeurile” plutesc în tamponul 3. Tamponul 3 este eliminat cu atenție, tamponul proaspăt 3 este adăugat la celulele hepatice și celulele sunt îndepărtate cu grijă de pe podea folosind o pipetă. Este centrifugat din nou și tamponul 3 este eliminat din nou. Apoi, o mică parte din proteine este numărată, care este apoi calculată în funcție de dimensiuni și apoi calculată câte microlitri sunt într-o zonă. O altă substanță este adăugată celulelor, care este ca hrana pentru celule. Celulele pot supraviețui aproximativ trei zile.
Ziua 6
Dimineața am pregătit vârfurile de pipetă pentru autoclavă și apoi am pregătit vasele Petri. Apoi am continuat experimentul din ziua 3. Am tratat celulele obținute cu anticorpi pentru a desprinde proteinele de acestea. Am numărat aceste proteine cu ajutorul unei mașini, adică am făcut o determinare a proteinelor. FGF21 este, de asemenea, numărat pentru a afla dependența sau legătura dintre FGF21 și proteine.
Ziua 7
Dimineața am pregătit din nou sfaturi de pipetă pentru autoclavă. Apoi, eu și supervizorul meu am vrut să repetăm experimentul din ziua a 3-a. Din păcate, totuși, nu am reușit să finalizăm experimentul, deoarece nu a funcționat din cauza problemelor apărute. După-amiaza, am ajutat un alt doctorand cu lucrările ei pregătitoare pentru un experiment. Ea a scos organele de la opt șoareci, pe care apoi i-am cântărit și le-am documentat. Am măsurat, de asemenea, nivelul zahărului din sânge al șoarecilor. Apoi am înghețat organele folosind azot lichid.
Ziua 8
În a opta zi, am urmărit mai întâi cum ucidem șoareci pentru a ajunge la pancreas. Când pancreasul a fost expus, colagenaza a fost injectată în vasul de sânge adiacent, determinând pancreasul să se umfle și să devină o masă asemănătoare gelului. Pancreasul a fost apoi îndepărtat din corpul șoarecelui cu un contact cât mai mic posibil pentru a preveni scurgerea celulelor insulelor. Am repetat procesul pe alți șapte șoareci. Apoi supraveghetorul meu a numărat celulele insulelor din pancreasul individual. După-amiaza, pentru a practica pipetarea, am efectuat o altă determinare a proteinelor cu tehnicianul de laborator, deoarece pipetarea este o abilitate importantă în domeniul cercetării în laborator.
Ziua 9
În acea zi am făcut un western blot. Proteinele sunt transferate într-o membrană purtătoare. Pentru a face acest lucru, am făcut mai întâi un gel care trebuia să se odihnească o vreme. Apoi am adăugat pigmenți de culoare foarte mici. Gelul a fost apoi plasat într-un dispozitiv care fusese umplut cu lichid și electrificat astfel încât proteinele să curgă în jos prin gel.
După aproximativ o oră și jumătate, pigmenții de culoare au ajuns chiar în partea de jos și au apărut mici semne de culoare izolate în gel. Gelul este apoi plasat pe o hârtie cu membrană și înfășurat în hârtie de filtru și bureți într-un alt dispozitiv, care asigură că proteinele din gel sunt transferate pe hârtia cu membrană. Mai târziu, hârtia cu membrană este spălată de câteva ori cu o soluție și apoi potențată cu o substanță asemănătoare laptelui. După aproximativ 30 de minute, este potențat în continuare într-un mediu rece.
Ziua 10
În ultima zi am pregătit anumite substanțe pentru alte experimente. De asemenea, am spălat și uscat hârtia cu membrană de mai multe ori. Am evaluat-o apoi într-o mașină. La prânz mi-am început plecarea.
Concluzie
Mi-a plăcut foarte mult stagiul la DIfE pentru că am fost primită cu căldură și a fost foarte instructiv pentru mine. A fost foarte distractiv și foarte interesant să văd cum funcționează într-un laborator. Mi-a plăcut în mod deosebit munca de laborator.
Am, de asemenea, o perspectivă asupra cercetării și abia acum îmi pot imagina cu adevărat cum funcționează. Are mult de-a face cu munca de birou și trebuie să faci o mulțime de cercetări și cereri înainte de a putea începe chiar. De asemenea, mi-am dat seama că o mulțime de cercetări nu funcționează și este o chestiune reală de răbdare să mergi înainte în cercetare. A fost o perspectivă frumoasă asupra lumii profesionale. Am cunoscut o mulțime de oameni care au studiat cu toții în diferite domenii și au primit o mulțime de sfaturi.