Studii comparative privind penetrarea și permeabilitatea dermică în celulele de difuzie - PDF
De la Institutul de Farmacologie, Toxicologie și Farmacie al Universității de Medicină Veterinară din Hanovra Studii comparative privind penetrarea și permeația cutanată în celulele de difuzie DISERTATURA INAUGURĂ Pentru obținerea diplomei de Doctor în Medicină Veterinară (Dr. med. Vet.) De către Universitatea de Medicină Veterinară din Hanovra. Prezentat de Silke Riedel (n. Franzbach) de la Gronau Hanovra 23
Supraveghere științifică: Prof. univ. Dr. M. Kietzmann Recenzant 1: Prof. univ. Dr. M. Kietzmann Recenzorul 2: Prof. univ. Dr. H.C. Ziua examinării orale a cancerului: 27, 23 mai
Dedicat în recunoștință părinților și familiei mele
1 INTRODUCERE 1 2 PREZENTARE GENERALĂ A LITERATURII 2 2.1 Structura și funcția pielii 2 2.1.1 Epidermă 2 2.1.2 Dermă 5 2.1.3 Hipodermă 7 2.1.4 Anexe 7 2.1.5 Sistemul vascular al pielii 8 2.2 Pătrundere, permeație și absorbție transdermică 9 2.2. 1 Funcția barieră a pielii 9 2.2.2 Penetrarea în piele și farmacocinetica substanțelor aplicate topic 12 2.2.3 Influența penetrării 19 2.3 Modele de investigare a penetrării și permeației transcutanate 22 2.3.1 Modele in vivo 22 2.3.2 Modele in vitro 23 2.3.2.1 Celule de difuzie 23 2.3.2.2 Model de penetrare Saarbrücken 26 2.3.2.3 Culturi celulare și piele artificială 29 2.3.2.4 Modele de perfuzie 3 2.4 Acid benzoic, testosteron și hidrocortizon ca substanțe de testare pentru penetrare și permeație transdermică 32 3 MATERIALE ȘI METODE 35 3.1 Material de testare 35 3.2 Substanțe de testare utilizate 37 3.2.1 Acid benzoic 37 3.2.2 Hidrocortizon 37 3.2.3 Testosteron 38 3.3 Celule de difuzie 38
3.4 Efectuarea experimentului 39 3.5 Detectarea substanțelor testate 4 3.5.1 Imunoanaliza enzimei 4 3.5.2 Determinarea acidului benzoic prin cromatografie lichidă de înaltă presiune (HPLC) 41 3.6 Evaluarea statistică 43 4 REZULTATE 44 4.1 Penetrarea și permeația acidului benzoic 44 4.1.1 Pielea șobolanului 44 4.1.2 Piele de câine 45 4.1.3 Piele de cal 46 4.1.4 Pielea de porc 46 4.1.5 Pielea de vacă 49 4.2 Pătrunderea și permeabilitatea hidrocortizonului 51 4.2.1 Pielea de șobolan 51 4.2.2 Pielea de câine 52 4.2.3 Pielea de cal 53 4.2.4 Pielea de porc 54 4.2.5 Pielea de vacă 55 4.3 Penetrarea testosteronului și permeație 57 4.3.1 Pielea șobolanului 57 4.3.2 Pielea câinelui 58 4.3.3 Pielea calului 59 4.3.4 Pielea porcului 6 4.3.5 Pielea bovinelor 61 5 DISCUȚIE 63 5.1 Compararea locațiilor pielii în cadrul speciilor animale 63 5.1.1 Permeația acidului benzoic 63 5.1.2 Permeabilitatea hidrocortizonului 64
5.1.3 Permeabilitatea testosteronului 65 5.2 Comparația speciilor de animale pe baza regiunilor corpului 66 5.2.1 Permeabilitatea acidului benzoic 66 5.2.2 Permeabilitatea hidrocortizonului 69 5.2.3 Permeabilitatea testosteronului 7 5.3 Compararea substanțelor testate Acid benzoic, testosteron și hidrocortizon 73 5.4 Concluzie 76 6 REZUMAT 79 REZUMAT 77 7 SUMAR 79 9 TABELE APENDICE 99
Lista abrevierilor A. Arteria Fig. Ilustrație cm centimetri cm² centimetri pătrați Test imunosorbent legat de enzime ELISA g grame C grade Celsius h ore HPLC cromatografie lichidă de înaltă performanță i.v. intravenos l litru ln logaritm m masculin mg miligram min minut ml mililitru mm milimetru µg microgram µl microlitru µm micrometru n număr de încercări ng nanograme. vezi p. fila tab. tabelul V. Vena w femeie
32 (BRONAUGH și colab. 1982b) Câine 12-45 (SCHWARZ și MEYER 1994) 1-45 (CREED 1958) Cal 25-45 (MEYER 22) 3-9 (TALUKDAR și colab. 1972) Porc 34-47 (m ) (MEYER 1986) 41-57 (w) 7-14 (MEYER și NEURAND 1975) bovine
32 (MEYER 21) 4-6 (GOLDSBERRY și CALHOUN 1958) Rindereuter 5-8 (SEEGERS 23) 6-2 (LUDEWIG și colab. 1996) Tab. 1: Grosimea epidermei pielii păroase la diferite specii (date în µm)
3 În figurile următoare (Fig. 1-6) epiderma (pielea abdominală) a speciilor de animale examinate în această lucrare este prezentată histologic. 1 2 3 4 5 6 5 µm Fig. 1-6: Epidermă (piele abdominală) de șobolan (1), câine (2), cal (3), porc (4), bovine (5) și piele de uger (6)