Deci pregătiți soluție salină tamponată cu fosfat
PBS, sau soluție salină tamponată cu fosfat, este o soluție tampon care este deosebit de valoroasă deoarece imită concentrația de ioni, osmolaritatea și pH-ul fluidelor corpului uman. Cu alte cuvinte, este izotonic pentru soluțiile umane, deci este mai puțin probabil să provoace daune celulare, toxicitate sau precipitații nedorite în cercetările biologice, medicale sau biochimice.
Compoziția chimică PBS
Există mai multe rețete pentru a face soluția PBS. Soluția esențială conține apă, hidrogen fosfat de sodiu și clorură de sodiu. Unele preparate conțin clorură de potasiu și dihidrogen fosfat de potasiu. EDTA poate fi, de asemenea, adăugat în prepararea celulei pentru a preveni aglomerarea.
Soluția salină tamponată cu fosfat nu este ideală pentru utilizarea în soluții care conțin cationi divalenți (Fe 2+, Zn 2+), deoarece pot apărea precipitații. Cu toate acestea, unele soluții de PBS conțin calciu sau magneziu. De asemenea, rețineți că fosfatul poate inhiba reacțiile enzimatice. Fiți deosebit de atenți la acest potențial dezavantaj atunci când lucrați cu ADN. În timp ce PBS este excelent pentru știința fiziologică, rețineți că fosfatul dintr-o probă tamponată cu PBS poate precipita dacă proba este amestecată cu etanol.
O compoziție chimică tipică de 1X PBS are o concentrație finală de 10 mM PO 4 3-, 137 mM NaCI și 2,7 mM KCl. Iată concentrația finală a reactivilor în soluție:
| NaCI | 137 | 8.0 |
| KCl | 2.7 | 0,2 |
| Na2 HPO4 | 10 | 1,42 |
| KH 2 PO 4 | 1.8 | 0,24 |
Protocol pentru fabricarea soluției saline tamponate cu fosfat
În funcție de scopul dvs., puteți crea PBS 1X, 5X sau 10X. Mulți oameni cumpără pur și simplu comprimate tampon PBS, le dizolvă în apă distilată și ajustează pH-ul cu acid clorhidric sau hidroxid de sodiu, după cum este necesar. Cu toate acestea, este ușor să faceți soluția de la zero. Iată rețete pentru soluție salină tamponată cu fosfat 1X și 10X: