Detectarea heroinei și a produselor de degradare a heroinei în textile - Descărcare gratuită PDF
Dovada heroinei și a produselor de degradare a heroinei în textile.Teză finală, studiu postuniversitar în toxicologie la Universitatea din Leipzig Manja Krammer Berlin, 13.07.2008
1. Introducere 1.1 Întrebare de cercetare 1.2 Descrierea cazului 1.3 Istoricul heroinei 1.4 Farmacocinetica 1.5 Efectele acute 1.6 Efectele cronice 1.7 Intoxicarea 1.8 Terapia 1.9 Degradarea heroinei în corpul uman 2. Experimental 2.1 Teste preliminare 2.1.1 Material de probă 2.1.2 Standarde pentru cromatografia în strat subțire 2.1.3 Metoda de extracție pentru cromatografia în strat subțire 2.2 Metoda de cromatografie lichidă de înaltă performanță (HPLC) 2.2.1 Program de gradient 2.2.2 Standarde și soluții utilizate pentru analiza HPLC 2.2.3 Verificarea programului de gradient 2.3 Pregătirea probelor pentru HPLC 3. Rezultate 4. Discuție 5 Anexa 6. Literatură 7. Mulțumiri 2
Figura 1: Evoluția concentrației de heroină monoacetilmorfină și morfină în sângele integral după o singură aplicare intramusculară de 6 mg heroină HCI. Media a 6 subiecți. [2] Figura 2: Ilustrația descompunerii extrem de rapide a heroinei în sângele integral. După o singură administrare intravenoasă, în medie, de 4,5 mg de heroină HCl, nivelul de sânge al heroinei scade cu aproximativ 90% între a doua și a zecea minute. Valori medii de la 4 persoane testate. [2] 5
Pe de altă parte, este eritrocitul acetilcolinesterazei (AChE) care, conform cineticii de prim ordin, hidrolizează rapid heroina la 6-monoacetilmorfină, iar într-o a doua etapă de hidroliză 6-MAM la hidroliza la morfină. Al doilea pas este mai lent decât primul. [5] Pe baza faptului că colinesterazele din sânge ale propriului corp hidrolizează heroina in vitro în două etape de hidroliză prin 6-MAM pentru a forma morfină, în experiment sângele uman a fost amestecat cu heroină, care a fost aplicată anterior pe o bucată de material textil. Scopul a fost de a testa dacă sângele uman proaspăt din afara corpului (extracorporeal) este capabil să hidrolizeze heroina. Colinesterazele din sânge sunt active în afara corpului și, dacă da, pentru cât timp? Figura 3 [6] 8
În timp ce coeficientul de morfină/cofeină crește foarte lent, dar continuu, de la aproximativ 10 minute. Figura 4 Figura 5 După evaluarea testelor preliminare, timpul de incubație a fost stabilit la 90 de minute, deoarece reacția chimică nu sa încheiat în mod evident după 60 de minute. Al 12-lea
2.3 Pregătirea probelor pentru HPLC Patru angajați ai institutului s-au pus la dispoziție ca subiecți testați. Subiecții testului au fost trei femei și un bărbat. Vârsta subiecților a fost între 30 și 60 de ani. De la fiecare dintre aceștia s-au luat aproximativ 10 ml de sânge venos, care a fost utilizat imediat pentru experiment. S-a testat influența timpului asupra conversiei chimice. Mai bine, cât timp colinesterazele din sânge din afara corpului sunt capabile să transforme heroina în monoacetilmorfină. Au fost realizate 4 serii de teste, 1 serie de teste pe subiect. Această serie de test a constat din 7 loturi, a fost compusă din 1 valoare necompletată și 6 ori diferite. Reacția chimică este întreruptă după 5 minute, după 10 minute, după 20 de minute, după 40 de minute, după 60 de minute și după 90 de minute prin adăugarea de metanol. Pregătirea probelor Figura 6 13
Experiment preliminar de cromatografie în strat subțire Figura 7 3.2 Rezultate HPLC Heroina de stradă conține cofeină, motiv pentru care cofeina a fost aleasă ca standard intern, deoarece nu se modifică atunci când se adaugă sânge integral. Colinesterazele din sânge nu au nicio influență asupra cantității de cofeină, ceea ce înseamnă că aceeași cantitate de cofeină trebuie să fie conținută în toate probele. Cantitățile de heroină, MAM și morfină au fost măsurate în ng/ml sânge. Pentru o mai bună evaluare, rezultatele au fost prezentate ca niște coeficienți. Valorile raportului au fost alese deoarece heroina de stradă este cunoscută ca fiind prezentă în concentrații diferite. Alegând coeficientul, este posibilă o reprezentare și o interpretare independente de concentrație. Coeficient de heroină/cafeină (Q 1) Coeficient MAM/cafeină (Q 2) Coeficient de morfină/cafeină (Q 3) Subiecții au fost numerotați 1-4 (de exemplu Q 1/1, Q 1/2, Q 1/3, Q1/4) 15
Prezentare tabelară a rezultatelor Time Heroin/Caffeine MAM/Caffeine Morphine/Caffeine min Q 1/1 Q 1/2 Q 1/3 Q 1/4 Q 2/1 Q 2/2 Q 2/3 Q 2/4 Q 3/1 Q 3/2 Q 3/3 Q 3/4 5 3,1 2,86 2,98 3,0 0,14 0,19 0,15 0,17 0 0 0 0 10 3,0 2,89 2 .90 3.0 0.19 0.20 0.19 0.19 0 0 0 0 20 2.66 2.75 2.58 2.74 0.29 0.31 0.40 0.34 0 0 0, 04 0 40 1,40 1,79 2,27 2,23 0,91 0,82 0,58 0,61 0,15 0,14 0,05 0,11 60 1,30 1,34 2,07 1 .59 0,98 1,07 0,70 0,87 0,13 0,19 0,05 0,17 90 1,18 1,45 1,66 1,21 1,09 1,02 0,77 1, 08 0,18 0,14 0,17 0,25 Subiect 1, Subiect 2, Subiect 3 și Subiect 4 16
Reprezentarea grafică a rezultatelor 17
De ce un posibil polimorfism în citocromul P450-2D6 nu ar trebui să aibă o influență asupra descompunerii heroinei în MAM și în continuare în morfină? Ceea ce poate explica de ce subiectul 4 descompune heroina mai repede decât ceilalți subiecți. 5. Anexă program gradient pentru HPLC 20
6. Literatură [1] Hans Marquard și Sigfried Schäfer (2004) Manual de toxicologie, pagina 952f Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft mbh Stuttgart [2] PXIten (1994) Conducerea sub influența medicamentelor sau a medicamentelor: interpretare și evaluare criminalistică/Institutul de medicină legală IRM, criminalistică Toxicology of the University of Zurich, Zurich publishing house IRM 1994, pages 188-191 [3] Wolfgang Dekant și Spiros Vamvakas, (2005) Toxicology, O introducere pentru chimiști, biologi și farmaciști, pagina 242, Editura Academic Spectrum [4] Franz-Xaver Reichl (2002) Taschenatlas der Toxikologie, pagina 76, Thieme Verlag [5] Asher Y Salomon, Zafir Goren, Yaniv Avissar și Hermona Soreq, Eritrocit uman dar nu Acetilcolinesterază cerebrală Hidroliză Heroină la morfină, Farmacologie clinică și experimentală și Fiziologie (1999) 26,596- 600 [6] Jan G. Hengstler (2004) Drugs in Forensic Toxicology, PGS Toxikologie der Universität Leipzig, 9. Matriculare Abrevieri AChE BuChE Erythrocyte- Acetilcolinesterază Ser Butirilcolinesterază 6 -MAM 6-Monoacetilmorfină GC-MS DC HPLC Cromatografie gazoasă-Spectrometrie de masă Cromatografie în strat subțire Cromatografie lichidă de înaltă performanță 23
7. Mulțumesc Mulțumirile mele merg dr. Rießelmann și echipa sa de la Institutul de Stat pentru Medicină Legală și Socială din Berlin. Fără ele, această lucrare nu ar fi fost posibilă pentru mine. Mi-ai dat ocazia să fac o lucrare cu un fundal practic. Mi-au oferit ocazia să mă uit mai atent la procedurile analitice și să lucrez independent cu ele. Aș dori să le mulțumesc medicilor legali pentru că au găsit încă timp în timpul muncii lor pentru a-mi extrage sângele, astfel încât să pot realiza experimentele mele. Aș dori să mulțumesc dnei Kastner, Köhler, Roscher, Vejmelka și Wangering, care au fost mereu alături de mine cu sfaturi și acțiuni. 24