Genotiparea și analiza țesuturilor limfoide asociate cu mucoasa recto-anală pentru detectarea
Boala de pierdere cronică (CWD) este confirmată la detectarea prionului CWD în țesutul cerebral sau în țesutul limfoid. Proprietarii de cervide pot solicita laboratoarelor terțe să efectueze analize ale țesuturilor limfoide asociate cu mucoasa recto-anală și/sau genotiparea cervidelor lor, ceea ce va permite detectarea cervizelor potențial infectate și, astfel, va ghida gestionarea.
Ca și în cazul tuturor testelor pentru CWD, analiza țesutului limfoid asociat cu mucoasa recto-anală oferă informații limitate. O listă de întrebări frecvente cu privire la analiza acestor țesuturi și genotipare este prezentată mai jos; poate ajuta crescătorii să stabilească dacă doresc să integreze aceste teste în gestionarea efectivelor lor.
Ce este o analiză a țesuturilor limfoide asociate cu mucoasa recto-anală?
Analiza țesutului limfoid asociat cu mucoasa recto-anală implică biopsia unei fâșii mici de țesut limfoid, care se află chiar în interiorul anusului cervidului viu. Această bandă de țesut conține foliculi limfoizi în care prionul care provoacă CWD poate fi prezent dacă cervidul are această boală. Țesutul este apoi fixat și colorat cu anticorpi anti-MDC marcați, iar un patolog veterinar examinează foliculii limfoizi pentru a vedea dacă au fost colorați. Acest test se numește imunohistochimie (IHC). Cel puțin șase foliculi limfoizi trebuie să fie vizibili pentru ca rezultatele să fie semnificative.
Ce este genotiparea?
Genotiparea este, de asemenea, cunoscută sub numele de analiză ADN. Este un proces de determinare a machiajului genetic al unui animal prin examinarea unei secvențe de ADN. În genotiparea predispoziției unui animal la CWD, analiza ADN va determina variația genetică a genei care codifică proteina prionică celulară normală. Cursul CWD la un animal poate depinde de cât de bine rezistă gena care codifică proteina normală la modificarea într-o formă anormală care provoacă CWD.
Cum influențează genotipul predispoziția la CWD?
Cercetările au arătat că variațiile genetice nu conferă rezistență împotriva CWD, dar pot afecta cât de repede progresează boala atunci când animalul este infectat. La animalele cu genotipuri susceptibile la CWD, perioada de incubație este scurtă, iar semnele clinice progresează rapid. Proprietarii de cerbi pot folosi aceste informații atunci când își depozitează sau sacrifică efectivele.
Cum influențează speciile de cervide și genotipul rezultatelor analizei țesuturilor limfoide asociate cu mucoasa recto-anală?
Durata de timp dintre momentul infecției și apariția prionului care provoacă CWD în țesuturile limfoide variază în funcție de specie și genotipul cervidului. De exemplu, scanările cerebrale ale unor elani care nu prezintă încă semne clinice arată rezultate pozitive, dar nu există o concentrație detectabilă de prioni asociați cu CWD în ganglionii limfatici retro-faringieni. Într-o astfel de situație, analiza țesutului limfoid asociat cu mucoasa recto-anală poate da un rezultat fals negativ. Elkii care poartă gena 132LL sunt considerați a avea cea mai lungă perioadă de incubație. Astfel, un animal poate fi infectat mult timp înainte ca prionul să fie detectabil în țesutul limfoid, care poate produce, de asemenea, un rezultat fals negativ atunci când se analizează țesutul limfoid asociat cu mucoasa recto-anală.
Cu toate acestea, la căprioarele cu coadă albă, prionii care cauzează CWD se acumulează în țesutul limfoid cranian (cum ar fi în ganglionul limfatic retrofaringian) înainte de a fi detectat în creier. Căprioarele cu coadă albă care poartă gena 96GG sunt cele în care boala apare cel mai devreme după infecție; prin urmare, prionii pot fi detectabili în țesutul limfoid la scurt timp după infecție. Analiza țesutului limfoid asociat cu mucoasa recto-anală la un cerb infectat cu acest genotip poate da un rezultat pozitiv.