Institutul f; r Biomedicină experimentală - funcția trombocitară a catedrei I
După leziuni, trombocitele joacă un rol esențial în oprirea sângerării. Cu toate acestea, există în prezent cunoștințe extinse că trombocitele joacă, de asemenea, un rol esențial în bolile grave care nu sunt asociate în primul rând cu sângerarea. Cercetăm rolul funcției trombocitelor în bolile relevante, cum ar fi septicemia.
Am analizat diferite aspecte ale formării și funcției trombocitelor umane.
I) Diagnosticare standardizată a funcției trombocitelor
Trombocitele umane sunt foarte delicate. Trebuie respectate standardele de calitate pre-analitice din momentul prelevării și prelucrării sângelui până la examinările necesare. O metodă bine stabilită pentru analiza funcției trombocitelor este agregometria. Cu toate acestea, această tehnică necesită o cantitate relativ mare de sânge și, prin urmare, nu este potrivită pentru persoanele cu un număr foarte scăzut de trombocite sau pentru copiii mici. Citometria în flux oferă o alternativă care necesită cantități minime de sânge și permite examinarea simultană a multor aspecte ale funcției trombocitelor. Aceasta include echipamentul și densitatea receptorilor de suprafață, eliberarea granulelor interne (alfa și dense) și capacitatea de a activa receptorii de integrină. Am dezvoltat o abordare practică a diagnosticării funcției trombocitelor și propunem un algoritm pentru identificarea modificărilor genetice subiacente în tendințele de sângerare ereditară.
II) Funcția trombocitelor în sepsis
Sepsisul este o boală foarte complexă, cu o dereglare sistemică a multor componente, care poate fi adesea declanșată de bacterii sau ciuperci. În faza inițială a bolii, numărul de trombocite din sânge crește inițial (trombocitoză reactivă), dar scade semnificativ odată cu durata septicemiei. Trombocitopenia severă (un număr foarte scăzut de trombocite în sânge) este asociată cu un prognostic slab. În cooperare cu unitatea de terapie intensivă a Clinicii Medicale I a Spitalului Universitar, investigăm reactivitatea trombocitelor la pacienții cu sepsis în cursul bolii și sperăm să caracterizăm mai bine modificările care stau la baza trombocitelor și, astfel, să dezvoltăm markeri prognostici și diagnostici.
III) Biogeneza trombocitelor și terapia genică
Trombocitele din sânge provin din celulele precursoare (celule stem hematopoietice) din măduva osoasă. Aceștia reacționează la factori specifici de creștere, cum ar fi trombopoietina, apoi se diferențiază în celule precursoare (megacariocite) și în cele din urmă în celule sanguine mature, cum ar fi megacariocite. Acestea se găsesc în principal pe vasele din măduva osoasă, unde eliberează trombocite în sânge. Deoarece trombocitele nu au un nucleu, nu le puteți modifica genetic. Am dezvoltat un protocol în care lăsăm celulele stem hematopoietice din măduva osoasă (așa-numitele celule CD34-pozitive) să se diferențieze în megacariocite în cultura celulară, care apoi sunt tăiate ca celule mature „propulsori” din care provin trombocitele. În plus, putem folosi „celule stem pluripotente induse” (celule iPS), care pot fi izolate și diferențiate de un donator, posibil cu un fond patologic. Aceste celule pot fi modificate cu vectori de terapie genică, astfel încât să putem examina efectul asupra formării trombocitelor în cazul unei deficiențe sau a unui exces de proteine individuale. În cele din urmă, obiectivul este de a permite o corecție sigură a propriilor celule stem care formează sânge, pentru a efectua un transplant de celule stem autolog și, astfel, pentru a vindeca trombocitele congenitale rare și bolile sângerante.