P r o j e k t K e r a t i n a s e, A b s h l u s s s b e r i h t, p a ge 1 - PDF gratuit
Proiect Keratinază, Raport final, 3 0. 0 4. 2 0 1 4 P vârsta 1 Raport final Proiect: Dezvoltarea unui curățător de scurgere enzimatic pe bază de keratinaze AZ 28332 Durată: 01/01/2012 31/12/2013 Partener de proiect: ASA Spezialenzyme GmbH (ASA, Coordonator) Universitatea din Mannheim, Institutul pentru Ingineria Proceselor Biologice (HSM) Bio-Logic Control, Prof. Dr. Peter M. Kunz (BLC) Autor: Dr. Arno Cordes, ASA Spezialenzyme GmbH Ines Lobes, Universitatea Mannheim Prof. Dr. Peter M. Kunz, Bio-Logic-Control Finanțat de: Deutsche Bundesstiftung Umwelt
P r o j e k t K e r a t i n a s e, A b s c h l u s s b e r i h t, 3 0. 0 4. 2 0 1 4 P vârsta 5 Dezvoltarea unui curățător de scurgere enzimatic pe bază de keratinază. 2. Prezentarea etapelor de lucru și a metodelor utilizate 2.1 Etapele de lucru Proiectul poate fi împărțit în următoarele etape de lucru și pachete de lucru: WP 1 Dezvoltarea unei pregătiri de enzime de divizare a cheratinei 1.1 Testarea proteazei tehnice de pe piață pentru activitatea lor de keratinază 1.2 Creșterea activității de keratinază prin adăugarea de agenți biologici de reducere 1.3 Îmbunătățirea accesibilitatea substratului prin metode fizico-chimice 1.4 screening pentru microorganisme care degradează cheratina 1.5 Determinarea condițiilor optime de cultivare 1.6 Producerea probelor de cheratinază prin fermentarea microorganismelor selectate Investigația efectului celor mai bune keratinază (e) pe o scară de laborator 2.3 Investigarea efectului amestecurilor de enzime la scară semi-industrială pe L abortestsystem 2.4 Schița unui concept de marketing
P r o j e k t K e r a t i n a s e, A b s c h l u s s b e r i h t, 3 0. 0 4. 2 0 1 4 pagina 10 incubează la 45 C. după adăugarea enzimei, câte 2 ml de prelevare după ore, după ore. Tab. 1 (valori duble pentru loturile de enzime, unice pentru loturile martor) Se amestecă fiecare exces de 2 ml cu 2 ml soluție 10% TCA. Centrifugați loturile timp de 15 minute la 5000 rpm, îndepărtați supernatantul și măsurați dispariția la 440 nm. Pentru absorbanțe> 1, proba trebuie diluată cu dist Apă de diluat. Se lasă să se stabilească după incubare, se îndepărtează cu atenție reziduul, se resuspendă reziduul de azokeratină în 4 ml de apă deionizată, se centrifugează de pe supernatant, se usucă prin congelare reziduul, se determină rezultatele TS Tab. Doar cu agentul reducător, ditionitul de sodiu este o creștere măsurabilă pentru protează K și N-01 în comparație cu loturile fără agent reducător. Totuși, dacă se iau în considerare toate valorile necompletate, devine evident (Tab. 4) că aproape toate abordările au ca rezultat valori negative. Este posibil ca colorantul azoic să fie transformat de agenții reducători. Acest lucru este susținut de observația că supernatanții din aceste loturi au fost mai mult albastru decât galben-verde.
P r o j e k t K e r a t i n a s e, A b s c h l u s s b e r i c h t, 3 0. 0 4. 2 0 1 4 S e i te 24 Lo_Bak_Kompost Summer Lo_Bak_Friseur Lo_Bak_Reiterhof Wenz Lo_Bak_Kompostfirma
P r o j e k t K e r a t i n a s e, A b s c h l u s s b e r i h t, 3 0. 0 4. 2 0 1 4 p a g e 25 Se poate observa că ceva a crescut pe toate farfuriile, în timp ce farfuria coaforului a crescut cel mai puțin. Mai ales cu farfuriile cu ciuperci puteți vedea că cresc tulpini diferite. Următoarea fig. 5a-h prezintă plăcile de agar balon Lo_Bak și Lo_Pil cu păr uman după o perioadă de incubație de 7 zile. 5a: Lo_Bak_Kompost vară 5b: Lo_Bak_Friseur 5c: Lo_Bak_Reiterhof Wenz 5d: Lo_Bak_Kompostfirma 5e: Lo_Pil_Kompost vară 5f: Lo_Pil_Friseur
P r o j e k t K e r a t i n a s e, A b s c h l u s s b e r i c h t, 3 0. 0 4. 2 0 1 4 P age 26 5g: Lo_Pil_Reiterhof Kunz 5h: Lo_Pil_Kompostfirma Fig. 5a-h: Plăci acoperite cu păr real în loc de făină de păr. Se poate observa că ciupercile cresc mult mai bine și mai rapid pe păr decât bacteriile, ceea ce se datorează probabil faptului că pot ajunge mai bine la păr prin formarea hifelor (în special vizibile în proba de vară Lo_Pil_Kompost). Următoarele figuri 6a-i prezintă fotografiile cultivării microorganismelor din culturile lichide din făină de păr în mediu fără făină de păr, dar cu păr. 6: Lo_Bak_Kompost vara 6b: Lo_Bak_Friseur 6c: Lo_Bak_Reiterhof Wenz 6d: Lo_Bak_Kompostfirma