Preanalitice. Instrucțiuni pentru manipularea materialelor de probă în cabinetul veterinar
Instrucțiuni de pre-analiză pentru manipularea materialelor de probă în cabinetul veterinar
Tuburi serice de chimie clinică albe cu granule (Sarstedt), galbene cu gel (BD) hematologie Tuburi EDTA roșii (Sarstedt) sau violet (BD) tuburi de heparină portocalie (Sarstedt) sau verde (BD) tuburi citrate analize coagulare verzi (Sarstedt) sau albastre (BD) Tuburi speciale Tuburi de aprotinină EDTA roz (determinarea ACTH) Glucoză și lactat Tuburi de fluorură de sodiu galben (Sarstedt) sau gri (BD) Autocolantele cu coduri de bare apăsați ferm astfel încât să adere bine și să nu se desprindă în timpul transportului sau prelucrării mașinii. Al 7-lea
Prelevarea de sânge la câini și pisici Prelevarea de sânge la câini și pisici se efectuează la animale cooperante la dexterul vena cephalica antebrachii (pentru dreapta), care este situat deasupra și oarecum medial pe suprafața antebrațului. Membrul frontal drept este fixat și întins din spate de un asistent, astfel încât vena să fie strânsă. Acest lucru face mai ușor de găsit și împiedică venarea să se rostogolească. La animalele neliniștite, sângele poate fi, de asemenea, prelevat din vena safenă laterală (câine) sau vena mediană (pisică) de deasupra gleznei de pe membrul posterior. Pentru a strânge vena, membrul este întins, iar vena este congestionată în golul genunchiului (câinelui) sau la înălțimea medie la interiorul coapsei (pisica). Recoltarea sângelui din vena cefalică 10
Vena jugulară, vena jugulară, este, de asemenea, potrivită pentru a lua sânge. Capul sau botul sunt ținute sus și fixate de un asistent, în timp ce persoana care ia sângele congestionează vena jugulară la nivelul intrării toracice cu mâna stângă. În cazul animalelor cu păr dens sau neliniștit, locul puncției ar trebui să fie ras și dezinfectat cu atenție înainte de a fi plasat un cateter care locuiește. Recoltarea sângelui din vena jugulară Recoltarea sângelui din vena cefalică cu fluture și con monovette 11
Sânge Anticoagulant Luarea de sânge de la animale de companie mici Viteza fluxului sanguin este crucială pentru obținerea unei cantități suficiente de sânge. Prin urmare, se recomandă utilizarea canulelor cu lumen mare (20 G) și a vaselor de colectare adecvate. La iepuri și dihori, la fel ca la câini și pisici, sângele poate fi colectat cu tuburi EDTA și ser de dimensiuni normale; la cobai și chinchilla, se recomandă utilizarea vaselor mici de probă cu capac înșurubat sau a vaselor de unică folosință cu acțiune capilară (de exemplu, Multivette, Microvette, Sarstedt) . Microcannule În cazul venelor mici, noi tipuri de microcannule (micro-canule, Sarstedt) sunt adecvate în special pentru a susține o retragere suficientă a sângelui. Deoarece canulele nu au un con, sângele poate curge optim chiar dacă tensiunea arterială este scăzută. Mânerul canelat asigură că canula este ghidată în siguranță. Vă recomandăm să utilizați micro-canula cu lumen mare 21 G (verde). Al 12-lea
Metoda de alegere pentru preluarea sângelui de la iepuri, cobai, chinchilla și dihorii în practică este din vena safenă laterală, dar sunt posibile și alte puncte de puncție. Situri de puncție la mamifere mici Specii Situri de puncție Iepure V. saphena lateralis 1, V. cephalica antebrachii 1, A./V. auricularis lateralis 1 (doar cantitate mică), ureche 2 cobai V. saphena lateralis 1, V. cephalica antebrachii 1, tampoane 2 Chinchilla V. jugularis, V. saphena lateralis 1, V. cephalica antebrachii 1, V. caudali, V. sublingualis 2, pad 2, urechea 2, dihor, vena jugulară Skunk, vena safenă laterală 1, vena antebrahială 1, bila 2, urechea 2 vena jugulară Degu, vena safenă laterală 1, vena sublinguală, vena cefalică antebrachii, bilă de hamster V. sublingualis 2, venă saphena lateralis, venă cefalică, bilă 2 șoarece, șobolan V. facial 2, V. sublingualis, V. saphena lateralis, V. cephalica antebrachii, V. caudalis, bila 2 1 sunt potrivite pentru catetere venoase 2 care picură cantități mici direct de la locul puncției 13
Pentru hemogramele diferențiale, se recomandă pregătirea și trimiterea a două frotiuri de sânge imediat după recoltare. Mărimea suficientă a eșantionului este adesea dificil de obținut de la păsări și reptile. Cantitățile specificate în specificația serviciilor reprezintă cantități minime pentru examinările respective, dar se referă doar la examinarea parametrilor individuali. Probele admise Probele de sânge de la păsări și reptile Probele de sânge de păsări și reptile sunt foarte susceptibile la hemoliză și dezintegrarea celulelor. EDTA are un efect hemolitic asupra sângelui reptilelor. Prin urmare, heparina cu litiu este cea mai potrivită ca anticoagulant (sânge de heparină cu litiu pentru determinarea numărului de sânge și determinarea conținutului de plumb, plasmă de heparină de litiu pentru parametrii clinico-chimici și teste serologice). Pasăre până la 1% din greutatea corporală Budgerigar (40 g greutate corporală) maxim 0,4 ml cockatiel (100 g greutate corporală) maxim 1,0 ml papagal mare (400 g greutate corporală) maxim 4,0 ml reptilă până la 0,5% din greutatea corporală, adică maximum 0,5 ml la 100 g greutate corporală. 16
Luarea de sânge la păsări La păsări, sângele este preluat fie din vena aripii, fie din vena jugulară dreaptă. Tehnica de prelevare a sângelui din vena aripii Asistentul fixează pasărea în poziție culcat și examinatorul scoate o aripă într-o parte cu o mână. După umezirea regiunii cotului, vena ulnară care se desfășoară în unghi drept cu tendoanele devine vizibilă și poate fi blocată cu degetul mare al mâinii ținând aripa. Vena este perforată cu cealaltă mână. Sângele este extras prin aspirație cu seringa atașată. După îndepărtarea canulei, zona de puncție este ușor comprimată cu un tampon înmuiat în clorură ferică. Luarea sângelui din vena aripii unui amazon De regulă, pacientul este așezat înapoi în cușcă cu tamponul atașat. Tamponul lipit de piele din cauza coagulării sângelui cade ulterior. 17
Luarea de sânge de la cai La cabaline, sângele venos este de obicei preluat de la una dintre cele două vene jugulare (vena jugulară externă). Punctura venoasă se efectuează la tranziția de la mijlocul la treimea superioară a gâtului, deoarece mușchiul omohioideu este localizat în mod protector între vena jugulară superficială și artera carotidă comună mai profundă, ceea ce reduce riscul unei puncții arteriale. Venele sunt examinate pentru congestie, drenaj de sânge, circumferință crescută sau dovezi de inflamație sau deteriorare anterioară. De regulă, dezinfectarea superficială a părului și a pielii este suficientă. În cazul blănii foarte lungi și dense (de exemplu, ponei Shetland, islandezi), poate fi util să tundem părul pentru a arăta mai bine vena și pentru a dezinfecta locul puncției. Alternativ, sângele poate fi preluat și din vena cefalică, din vena safenă (în special la mânji) sau din vena epigastrică superficială. Recoltarea sângelui din vena jugulară 20
Recoltarea sângelui din camelide Recoltarea sângelui din camelide se efectuează și din vena jugulară. Spre deosebire de majoritatea animalelor domestice, vena jugulară și artera carotidă din camelidele din Noua Lume se desfășoară împreună pe cea mai lungă parte a gâtului și sunt separate doar cu trei până la patru centimetri în fața unghiului mandibular de către mușchiul omohyoideus. Puncția accidentală a arterei poate duce, prin urmare, la formarea extinsă de hematom. Deoarece camelidele pot împinge activ mușchii mobili ai gâtului în fața venei, valori CK foarte mari (> 10.000 U/l) sunt posibile datorită pătrunderii mușchilor. Datorită calității valoroase a stratului, bărbierirea punctului de prelevare a sângelui este contraindicată la camelide. Deoarece venele se prăbușesc foarte repede, de obicei nu este posibil să se extragă sânge cu un sistem de vid. Pentru a nu contamina blana cu sânge, se recomandă recoltarea sângelui prin aspirație (de exemplu, S-Monovette, Sarstedt). Luarea de sânge din alpaca 21
Sânge Anticoagulant Preluarea sângelui de la bovine, oi și capre Vena jugulară externă este de obicei folosită pentru a lua sânge de la bovine, oi și capre. Este ușor accesibil și se arată clar atunci când este îndiguit.La bovine, sângele poate fi prelevat și din vena caudală mediană de pe partea inferioară a cozii. Retragerea sângelui din vena cozii Retragerea sângelui din vena jugulară 22
Sânge Anticoagulant Prepararea unui frotiu de sânge După ce ați șters prima picătură de sânge din tubul bine amestecat cu un capilar sau o pipetă pe capătul diapozitivului, apoi așezați al doilea diapozitiv în fața locului de aplicare și mutați-l ușor înapoi Sângele este distribuit uniform de-a lungul marginii diapozitivului în 45 - Țineți unghiul și conduceți rapid și uniform către partea îngustă opusă. Sângele este tras în spatele marginii, nu împins! Un frotiu care are aproximativ 2/3 lungimea suprafeței glisante, lasă o margine liberă pe ambele părți și se termină cu un steag clar este ideal. Lăsați frotiul să se usuce plat Marcați diapozitivul de pe marginea covorului cu un creion sau o etichetă cu cod de bare (lipiți-vă pe partea îngustă a punctului de atașare; nu pe steag) Trimiteți în manșonul glisant
corect greșit număr de coduri de bare număr de coduri de bare număr de coduri de bare număr de coduri de bare număr de coduri de bare număr de coduri de bare număr de coduri de bare număr de coduri de bare ideal prea scurt prea lung fără semnal OT bold prea îngust prea larg neuniform 27
Pivotarea insuficientă a tubului EDTA după îndepărtare și astfel amestecarea insuficientă a sângelui cu EDTA adăugat ca anticoagulant conduc, de asemenea, la formarea cheagurilor (vezi și secvența de recoltare a sângelui, p. 9). apare (viscozitate crescută a sângelui). Pentru a distinge între aglutinarea spontană și formarea ruloului, este util să spălați sângele de 3 ori cu aceeași cantitate de soluție salină. Dacă aglutinarea persistă, se consideră dovedită anemia hemolitică imună. Aglutinarea eritrocitelor Aglutinarea spontană a eritrocitelor trebuie diferențiată de o coagulare preanalitică a sângelui. Aceasta poate fi o indicație a anemiei hemolitice imune, în care prezența autoaglutinelor (IgG și IgM) poate duce la o aglomerare vizibilă macroscopic a eritrocitelor. Există o posibilitate de confuzie cu așa-numita formare de rulouri, care este o constatare întâmplătoare mai ales la cai și pisici sau în contextul inflamației acute aglutinare spontană în anemia imunohemolitică (câine) 33
Testele de urină Probele de urină trebuie să fie lipsite de contaminare externă, astfel încât tulburarea sau schimbările de culoare să poată fi evaluate fără artefacte. Cu excepția examinărilor microbiologice, toate examinările se efectuează cu urină nativă. Eventual. Pentru un rezultat semnificativ, proba trebuie împărțită și trebuie trimise atât urina stabilizată, cât și cea nativă. Pentru transport sunt necesare nave înșurubabile. Cistocenteza Cistocenteza este cea mai potrivită metodă de colectare a urinei la câini și pisici. Dacă este făcut corect, este o procedură sigură și ușoară. În funcție de experiența personală și de echipamentul tehnic al cabinetului, cistocenteza poate fi efectuată cu ajutorul ultrasunetelor sau al blindului. Pentru puncție sunt necesare o canulă (22 G, neagră) și o seringă (10 ml). În funcție de starea stratului, locul puncției este ras și pielea dezinfectată sau haina despărțită după aplicarea alcoolului. Pregătirea aseptică a punctului de puncție nu este necesară. 34
Dacă este posibil, vezica urinară este perforată sub control sonografic. Dacă vezica urinară este suficient de umplută și palpabilă, cistocenteza poate fi efectuată și în condiții de siguranță fără un dispozitiv cu ultrasunete și se efectuează pe câine în poziție în picioare sau în decubit dorsal sau lateral. La pisici, puncția este mai ușoară în poziție laterală. Vezica urinară este fixată cu o mână, cealaltă mână introduce canula cu seringa atașată în zona ventrală la cea ventrolaterală a vezicii urinare și o aspiră. Cateterizare La cai și bovine, se folosește un cateter urinar dacă nu se poate colecta urină descărcată spontan. În cazul animalelor mici, cateterul urinar trebuie utilizat în primul rând pentru a verifica permeabilitatea uretrei, altfel predomină dezavantajele acestei metode de îndepărtare (traumatisme ale membranei mucoase, risc de introducere a germenilor). Cistocenteza cu ghidaj ecografic 35
Obținerea de avantaje și dezavantaje Examinări de laborator colectare spontană directă - genă de stare nesterilă a urinei 1 genă (de exemplu, cu contaminare prin sedimentul urinar 1 uretru, prepuciu, clinico-chimic sau vascular) examinări vaginale și de mediu (de exemplu UP/C) 1, 2 din neadecvate pentru examinări imunologice cutie de gunoi microbiologic (de ex. UCC) 1,2 (cateter, examinări gunoi de perle) cateter vezică urinară - contaminare scăzută - stare urină 1 cateter pericol urină sediment 1 leziune uretrică/clinico-chimică și vezică (contaminare cu examinări imunologice 1,2 sânge) examen microbiologic 2 germeni sunt împinși în vezică din exterior cisto-transcutanat vezică pură urină examen microbiologic 2 puncție centrală a oricărei contaminări cu toate celelalte examinări (vezi mai sus) sânge vezical 1 = urină nativă (tub steril, neacoperit) ) 2 = urină stabilizată (tub special cu acid boric) În funcție de examinările dorite Dacă este necesar, împărțiți urina și trimiteți atât urină nativă cât și urină stabilizată. 37
Colectarea trebuie făcută înainte de a începe tratamentul cu antibiotice. Dacă nu este posibilă trimiterea probelor direct la laborator, probele pot fi păstrate la frigider timp de 1 până la 2 zile pentru teste bacteriologice culturale. Acest lucru se aplică și probelor de lapte și urină din tuburi cu un stabilizator adăugat. Material de testare microbiologică Selecția corectă a materialului de probă este esențială pentru rezultatul unui test bacteriologic. Pentru a atinge un nivel ridicat de valoare informativă, materialul trebuie obținut și expediat astfel încât agenții patogeni prezenți inițial să rămână capabili de reproducere sau să poată fi detectați în timpul transportului. Anaerobi și bacterii deosebit de sensibile, cum ar fi B. Streptococi β-hemolitici sau Haemophilus spp., Nu trebuie depozitați, ci aduși imediat la laborator. Materialul eșantion principal steril (hemocultură, sinovie etc.) ar trebui, de asemenea, examinat cât mai repede posibil, deoarece, în cazul unei infecții, cea mai mică modificare a numărului de germeni sau a spectrului de germeni poate duce la un rezultat falsificat. 38
Pentru prelucrarea microbiologică și evaluarea unui material de examinare, următoarele informații sunt absolut necesare, pe lângă asigurarea identității: Informații preliminare importante Data îndepărtării/data Originea materialului de examinare (de exemplu, frotiu de col uterin, puncție pleurală) Ordinea și întrebarea examinării (de exemplu, detectarea germenilor patogeni și/sau Germeni) Tampoane La îndepărtarea tamponului, asigurați-vă că nu intră în contact cu obiecte nesterile sau cu mucoase colonizate bacterial etc. Frotiurile din zone colonizate fiziologic de bacterii (piele/cavitate bucală/nas) sunt indicate numai pentru întrebări specifice. În cazul tampoanelor nazale, trebuie asigurată cea mai profundă îndepărtare posibilă după curățarea oglinzii nazale. Pentru cele mai bune rezultate posibile ale examinării, tamponul trebuie transferat pe un suport de transport imediat după îndepărtare. Diagnostic preliminar/informații clinice (de ex. Debutul bolii, simptome clinice, ședere în străinătate) Prelucrarea antibioticelor Detalii despre examinările preliminare, de ex. B. MRSA deja detectat. Tampon gros Tampon subțire 39
Citologia vaginală Imaginea citologică a unui frotiu vaginal la cățea permite determinarea stării ciclului și oferă informații despre procesele patologice. În acest scop, dacă este posibil sub controlul speculului, se obține un frotiu din bolta vaginală craniană, dorsală sau laterală, desfășurată pe o lamă și specimenul este apoi uscat la aer. Datorită fragilității celulelor, tampoanele care nu au fost striate nu pot fi evaluate. Tehnica de lansare a frotiului vaginal 45
Expediere Expediere/transport de probe După etichetarea tuburilor și completarea formularului de testare, probele sunt ambalate pentru transport. SYNLAB.vet oferă materialele necesare în mare parte gratuite. Ambalajul trebuie să aibă un efect protector suficient împotriva încărcăturilor de transport care apar inevitabil în timpul transportului (în special, nu trebuie să se rupă sau să rupă) și nu trebuie să provoace nicio perturbare în procesul de prelucrare. În cazul transportului poștal și al serviciilor naționale de curierat, trebuie, prin urmare, să fie utilizate întotdeauna ambalajele cu mai multe părți, care constă din containerul de probă propriu-zis, un manșon de protecție sau de transport și ambalajul exterior. Dacă se trimite material lichid, un strat absorbant (tampon absorbant) trebuie plasat între vasul primar și cel secundar. Ambalajul de expediere constă din 3 componente: 1.) eșantionul însuși (vas primar) 2.) un vas secundar etanș În loc de o cutie de carton, poate fi utilizat și un plic de transport PE. Eticheta pentru materialul eșantionat scutit (a se vedea mai jos) indică eșantionul medical veterinar scutit. Substanțele din categoria B trebuie etichetate cu eticheta UN 3373 pentru mărfuri periculoase. 3.) ambalajul exterior 48