Titlul tezei
Teza de diplomă Titlul tezei de diplomă Influența fumatului asupra profilului lipidic, precum și parametrii selectați ai stresului oxidativ la adulții sănătoși Autor Julia Pöschl Gradul academic dorit Magistra de Științe ale naturii (Mag.rer.nat) Viena, 2011 Numărul studiului conform fișei de studiu: A 474 Zona de studiu conform fișei de studiu: Studiu de diplomă în științe nutriționale Supervizor: o. Prof. univ. Dr. Ibrahim Elmadfa
P vârsta III Mulțumiri Aș dori să profit de această ocazie pentru a mulțumi părinților mei în special, și mamei mele în special. Îi dedic această lucrare pentru a-i mulțumi din suflet pentru sprijinul, răbdarea și asistența ei nelimitate în timpul studiilor mele. Mulțumiri speciale merg și domnului o. Prof. univ. Dr. Ibrahim Elmadfa pentru preluarea subiectului tezei mele și sprijinul prietenos din timpul muncii mele, precum și pentru co-conducătorul meu Dr. Elisabeth Fabian, care, în ciuda accidentului de circulație și a lungului ei sejur de reabilitare, a fost întotdeauna alături de mine cu sfaturi și acțiuni. În cele din urmă, totuși, aș dori să vă mulțumesc celui mai mare model al meu, tatăl meu. Susținerea lui m-a întărit pentru a-mi face visele să devină realitate și pentru a-mi atinge obiectivele.
P vârsta VI 3.4.1. Metodă. 26 3.4.2. Materiale și echipamente utilizate. 26 3.4.3. Executarea hotărârii. 27 3.4.4. Evaluare. 28 3.5. Determinarea colesterolului LDL oxidat (oxldl). 29 3.5.1. Metodă. 29 3.5.2. Materiale și echipamente utilizate. 29 3.5.3. Diluarea probelor. 30 3.5.4. Executarea hotărârii. 30 3.5.5. Evaluare. 30 3.6. Determinarea produselor proteice de oxidare avansată (AOPP). 31 3.6.1. Metodă. 31 3.6.2. Materiale și echipamente utilizate. 31 3.6.3. Executarea hotărârii. 31 3.6.4. Evaluare. 32 3.7. Control de calitate. 32 3.8. Evaluarea statistică. 33 4. Rezultate. 34 4.1. Distribuția în funcție de vârstă și sex. 34 4.2. Comportamentul de fumat. 37 4.3. Parametri antropometrici. 40 4.3.1. Înălţime. 42 4.3.2. Greutate corporala. 42 4.3.3. IMC. 44 4.3.4. Circumferinta taliei. 44 4.3.5. Circumferința șoldului. 45 4.3.6. Raportul W/H. 46 4.4. Profilul lipidic. 47 4.4.1. Colesterol total. 47 4.4.2. HDL colesterol. 48 4.4.3. Colesterol total/HDL. 49 4.4.4. Trigliceride. 49 4.4.5. Colesterol LDL. 50 4.4.6. Cocient LDL/HDL. 51 4.5. Parametrii pentru determinarea stresului oxidativ. 52 4.5.1. Capacitatea antioxidantă totală (TAC). 52 4.5.2. MDA. 53 4.5.3. AOPP. 54 4.5.4. oxldl. 55
P vârsta VII 5. Discuție. 57 5.1. Luarea în considerare a întregului colectiv în ceea ce privește diferențele dintre sexe. 57 5.1.1. Profilul lipidic, antropometria și riscul cardiovascular. 57 5.1.2. Fumatul, stresul oxidativ și riscul cardiovascular. 60 5.2. Fumatul și efectul său asupra profilului lipidic, antropometriei și riscului cardiovascular. 64 6. Concluzie. 66 7. Rezumat. 69 8. Rezumat. 71 9. Bibliografie. eu
P vârsta IX Lista figurilor Figura 2-1: Patogenia reacțiilor inflamatorii aterosclerotice. 13 Figura 2-2: Stresul oxidativ. 18 Figura 3-1: Distribuția comportamentului fumatului. 21 Figura 4-1: Diferența dintre femei și bărbați în ceea ce privește profilul lipidic și capacitatea antioxidantă totală (*: p 0,85 la femei și un WHR> 1,00 la bărbați, există obezitate abdominală și, prin urmare, un risc cardiovascular crescut ( ELMADFA, 2004). O reducere a grăsimii viscerale și subcutanate duce la o reducere a factorilor de risc cardiovascular și uneori îmbunătățește profilul lipidic, tensiunea arterială, glicemia, HbA1cs și rezistența la insulină (HAUSTEIN, 2004).
Vârsta 5 Conform Statisticilor Austria, 44% dintre bărbați și 55% dintre femei în Austria au o greutate normală. 43% din populația masculină este considerată supraponderală și 12% chiar ca obeză. În populația obeză de sex feminin, procentul este de 13%. În grupul de vârstă de la 60 la 74 de ani, frecvența supraponderalității și a obezității este cea mai mare la ambele sexe (bărbați: 19%; femei: 21%). Dacă acum se compară rezultatele sondajului IMC din 2006/07 cu întrebările speciale ale sondajului de microcensă privind sănătatea din 1999, s-a ajuns la următoarea concluzie: O creștere semnificativă a persoanelor obeze poate fi observată la ambele sexe și la toate grupele de vârstă. În ceea ce privește gradul de subponderalitate (IMC 200 mg/dl sau 5,2 mmol/l trigliceride:> 160 mg/dl sau 1,8 mmol/l colesterol LDL:> 130 mg/dl sau 3,4 mmol/l Colesterol HDL: ph = 7,4 3.3 Determinarea malondialdehidei în plasmă 3.3.1 Metodă Malondialdehida este un produs de descompunere a peroxidării lipidelor. Prin urmare, este o metodă importantă pentru determinarea deteriorării oxidative a biomoleculelor. Concentrația plasmatică a MDA a fost determinată în În cursul acestei lucrări determinat de HPLC (WONG și colab., 1996).
Pagina 24 3.3.2. Materiale și dispozitive utilizate Tabelul 3-3: Dispozitive pentru determinarea MDA Coloană: LichroCART 125-4 Lichrosher 100 RP-18,5 µm, coloană de protecție Merck: LichroCART 250-4 Lichrosher 100 RP-18, 10 µm, Merck LaChrom Merck Hitachi Pompa sistemului de cromatografie L-7100 Spectrofotometru de fluorescență F-1050 Integrator D-7500 Tabelul 3-4: Reactivi pentru determinarea MDA substanțelor chimice utilizate legate de tetraetoxipropan Sigma Nr. T-9889 etanol pa Riedel de Haën Nr. 32221 acid fosforic 85% Riedel de Haën Nr. 30417 acid tiobarbituric Sigma Nr. T-5500 metanol Merck LiChrosolvo Nr. 1.06007.2500 potasiu dihidrogen fosfat Riedel de Haën Nr. 04245 Tabel 3-5: Condiții HPLC pentru determinarea MDA Faza mobilă A: B = 60:40 A: tampon fosfat (pre-dizolvă 6,8 g dihidrogen fosfat de potasiu în 800 ml apă distilată; reglați pH = 6,8 cu 1 M KOH; umpleți până la 1 l cu apă distilată; filtru) B: Volum injecție metanol 20 µl debit 1,0 ml/min presiune 85 bar Sensibilitate 20 detectare lungime undă emisie: 563 nm lungime de undă de excitație: 532 nm timp de funcționare 5 minute
Pagina 28 Tabelul 3-8: Reactivi PBS ABTS soluție tampon Plasma standard Mioglobină H 2 O 2 martor 410 µl 400 µl - - 20 µl 170 µl standard 410 µl 400 µl 10 µl - 20 µl 170 µl probă 400 µl 400 µl - 20 µl 20 µl 170 µl După adăugarea de H202 la amestecul testat, cursul de dispariție se măsoară fotometric la 734 nm timp de 6 minute. Aceasta este cantitatea de timp în care cel mai înalt standard Trolox poate inhiba reacția. 3.4.4. Evaluare Punctele finale ale celor 5 standarde și eșantioanele sunt exprimate ca procente din spațiul gol. (Valoare gol abs. - abs standard.)/Valoare gol abs. = [%] (Valoare gol abs. - abs mostră)/Valoare gol abs. = [%] Evaluarea se efectuează prin regresie liniară a nivelurilor standard, deoarece există o relație directă între procentele% ale standardelor și concentrația acestora. Capacitatea antioxidantă a probei este dată ca echivalenți în mmol Trolox (Trolox-Ä)/l. Tabelul 3-9: Concentrații standard pentru evaluarea TAC Nr. Trolox [2,5 mm] Concentrația tamponului PBS [µl] [µl] [mmol/l] Standard 1 100 400 0,5 Standard 2 200 300 1 Standard 3 300 200 1,5 standard 4 400 100 2,0 standard 5 100-2,5
P 32 de ani 3.6.4. Evaluare Concentrația AOPP a fost evaluată utilizând o curbă standard liniară directă care a fost creată din șase standarde (concentrație: 0 µmol/l 100 µmol/l). 3.7. Asigurarea calității Pentru a valida calitatea și acuratețea metodelor utilizate, s-au efectuat atât o analiză intra (determinarea a 10 din același eșantion), cât și o analiză inter (determinarea aceluiași eșantion în cinci zile diferite) pentru fiecare detecție (Tabelul 3.12). Tabelul 3-12: Coeficienți de variație (CV) a parametrului intra-test și a parametrului inter-test CV intra-test (%) CV inter-test (%) Lipide totale 2,9 4,3 Colesterol total 2,1 2,3 HDL Colesterol 1,4 4, 3 Trigliceride 1,6 2,4 MDA 0,4 1,5 TAC 0,3 0,8 AOPP 1,0 1,4 oxldl 1,4 3,6
V 33 ani 3.8. Evaluare statistică Evaluarea statistică a rezultatelor analizei a fost efectuată cu software-ul statistic SPSS 16.0 pentru Windows. Testul Kolmogorov-Smirnov a fost efectuat pentru a verifica parametrii individuali pentru distribuția normală și omogenitatea varianței. Comparația medie a caracteristicilor distribuite în mod normal a fost efectuată folosind testul t pentru probe independente, în timp ce testul U Mann-Whitney a fost utilizat pentru datele care nu au fost distribuite în mod normal. Analizele de regresie liniară au fost efectuate în conformitate cu Pearson.
P vârstă 47 1,2 1 [a] [b] 0,8 raport W/H 0,6 0,4 0,2 0 Femei Bărbați Fumători nefumători Ex-fumători Figura 4-6: Compararea raportului W/H între grupurile individuale a: femei femei p 200mg/dl sau> 5,2 mmol/l. Având în vedere colectivul total, valoarea a fost în medie de 5,2 ± 1,2 mmol/l și, astfel, la 51% din persoanele testate peste intervalul de referință recomandat. Aproape nu au existat diferențe între sexe, dar s-a găsit o valoare crescută la 56% dintre fumători, 49% dintre nefumători și 46% dintre foștii fumători. S-au găsit, de asemenea, corelații semnificativ pozitive (se dă p 5. Această valoare a fost depășită doar la 12% dintre persoanele testate, 36% dintre ele femei și 64% dintre ele bărbați. Coeficientul a diferit semnificativ între sexe (p 160 mg/dl și 1, 8 mmol/l, ceea ce reprezintă astfel un risc cardiovascular crescut. În comparație între sexe, bărbații examinați au avut o valoare medie mai mare decât femeile participante (p 1,8 mmol/l a fost de 10% la subiecții de sex feminin, la bărbați (20%) a fost de două ori mai mare, o diferență semnificativă în comparație cu media-
Nu a fost posibil să se stabilească dacă subiectul testat se descrie pe sine însuși ca fumător, fost fumător sau nefumător strict la valoarea a 50-a trigliceridă (Tabelul 4.4.). Cu toate acestea, riscul a fost mai mare în rândul foștilor fumători (22%) și al fumătorilor (16%) comparativ cu nefumătorii (8%). Rezultatul acestui studiu arată o corelație semnificativă între greutate (GK: r = 0,311, p 130 mg/dl sau 3,4 mmol/l, care a fost cazul pentru peste 30% dintre subiecții participanți. O diferență semnificativă (p 3, 4 mmol/l) și riscul crescut asociat de boli cardiovasculare a fost mai pronunțat la participanții la studiu de sex masculin. Doar puțin sub 60% dintre bărbați și 71% dintre femei aveau un fumător de valoare, p