Tuberculoza la copii noi teste de sânge diagnostice
TABELUL 1
Screeningul orientat asupra tuberculozei (TB): indicații pentru reacția intradermică a tuberculinei la copii
| Contacte cu cazuri cunoscute de TBC activă |
| Copii cu suspiciune de TBC activă |
| Copiii cu factori de risc cunoscuți pentru ca infecția să se transforme în boală |
| Copii care călătoresc sau locuiesc timp de cel puțin trei luni într-o zonă cu o incidență ridicată a TBC, mai ales dacă vizita implică contactul cu populația locală |
| Copiii care au ajuns în Canada mai puțin de doi ani dintr-o țară cu o incidență ridicată a TBC |
Adaptat de la referința 9
PROGRESUL ÎN DIAGNOSTICUL TBC: TESTAREA INTERFERONULUI GAMMA
Testele de detectare a interferonului gamma (TDIG) măsoară producția in vitro de interferon gamma de către limfocitele sensibilizate ca răspuns la antigeni specifici Mycobacterium tuberculosis. Genele care codifică antigenele sunt prezente în tuberculoza M, dar nu și în tulpinile BCG sau în mai multe tulpini de mediu ale MNT (12-14). Prin urmare, aceste teste sunt mult mai specifice (cauzând mai puține pozitive false) decât IDR. De asemenea, acestea sunt mai puțin subiective în momentul interpretării, pot fi tratate rapid și necesită doar o vizită pentru a finaliza procesul. Două TDIG comerciale care utilizează aceste antigene specifice tuberculozei M sunt aprobate în Canada: testul QuantiFERON-TB Gold In-Tube (QFT-G-IT; Cellestis Inc., Australia) și testul T.SPOT - TB (Oxford Immunotec, United Regatul). O scurtă descriere a acestor teste este prezentată în Tabelul 2. Ele nu sunt încă disponibile pe scară largă în majoritatea centrelor sau laboratoarelor de referință din Canada. Ambele sunt, de asemenea, aprobate de Administrația SUA pentru Alimente și Medicamente (15,16). Testul ELISpot, deși similar cu testul T.SPOT, este un test de casă care nu este disponibil comercial, dar este adesea menționat în studiile TDIG.
MASA 2
Testarea interferonului gamma
| Testul QuantiFeRON-TB Gold In-Tube (Cellestis Inc., Australia) | |
| Ce măsoară | ELISA din sânge integral, care măsoară concentrația de interferon gamma în sânge după incubare cu antigenele specifice tuberculozei ESAT-6, CFP-10 și TB7.7. Răspunsul la stimularea mitogenului și un control sunt, de asemenea, măsurate pentru a asigura calitatea testului |
| Cerințe de colectare și prelucrare | Necesită colectarea a 3 ml de sânge, la o rată de 1 ml per tub (antigen, mitogen, valoare zero). Probele trebuie procesate în decurs de 12 ore. Aceste tuburi sunt incubate timp de 16 până la 24 de ore, apoi cantitatea de interferon gamma produsă este măsurată prin ELISA |
| Interpretarea rezultatelor | Rezultatele sunt raportate ca fiind pozitive (cel puțin 0,35 UI/ml de interferon gamma măsurat și cu mai mult de 50% peste control), negative (0,35 UI/ml sau mai puțin de interferon gamma măsurat) sau necunoscute (mai puțin de 0,35 UI/mL interferon gamma măsurat și răspunsul mitogen suboptimal mai mic de 0,5 UI/mL sau 0,7 UI/mL interferon gamma măsurat sau mai puțin peste răspunsul de control/valoarea zero) |
| Testul T.SPOT - TB (Oxford Immunotec, Marea Britanie) | |
| Ce măsoară | Imunoanaliză enzimatică ex vivo pentru a evalua numărul de limfocite T care produc interferoni gamma după expunerea la antigeni specifici Mycobacterium tuberculosis. Celulele sanguine mononucleare periferice izolate de pacient sunt plasate în microlitri, grupa A (ESAT-6), grupa B (CFP-10), control zero sau godeuri mitogene, apoi incubate pentru a promova stimularea oricărui limfocit T sensibilizat. Numărul de limfocite T care produc interferon gamma este apoi numărat și cuantificat |
| Cerințe de colectare și prelucrare | Necesită colectarea a 8 ml de sânge de la copiii cu vârsta peste 10 ani, 4 ml de la cei 2 până la 10 ani și 2 ml de la cei cu vârsta sub 2 ani (iar volumul ar trebui să fie dublat la pacienții imunocompromiși). Probele trebuie prelucrate în aceeași zi (în termen de 8 ore de la colectare) |
| Interpretarea rezultatelor | Rezultatele sunt prezentate ca număr de celule T care formează pete (LTT) și clasificate ca pozitive, negative, limită sau necunoscute. Un rezultat este definit ca pozitiv atunci când grupul A sau B conține cel puțin 8 LTT mai mult decât controlul negativ, ca negativ atunci când grupurile A sau B conțin 4 LTT sau mai puțin decât controalele negative și ca o limită atunci când rezultatul mai mare dintre grupul A B conține 5,6 sau 7 LTT mai mult decât controlul negativ. Un test de limită este considerat echivoc și trebuie repetat. |
| Prezența unei reacții satisfăcătoare (mai mare de 20 LTT) la controlul mitogen pozitiv demonstrează funcția celulelor T și validează rezultatele testului. Se declară un rezultat nedeterminat atunci când zgomotele puternice de fond împiedică interpretarea (mai mult de 10 LTT în zero sau godeuri de control) sau mai puțin de 20 LTT sunt detectate în godeurile de control pozitiv mitogen | |
Tradus și adaptat din referințele 15 și 16
ROLUL IDDD LA COPII: CÂND TREBUIE SĂ FIE UTILIZAT?
Există, de asemenea, o sensibilitate variabilă la copiii cu TB activă, variind între 50% și 92% pentru testul QFT-G-IT, între 81% și 93% pentru testul ELISpot și între 40% și 83% pentru T.SPOT - Test TB (18-20,27-29). Diferența largă de sensibilitate declarată pare să reflecte randamentele diferite ale acestor teste în funcție de vârstă și mediu (endemic sau non-endemic). La copiii foarte mici cu tuberculoză, testul poate fi insensibil, dar există cazuri notabile în care IDR este negativ și TDIG este pozitiv (29). Astfel, combinația celor două teste ar putea crește sensibilitatea diagnosticului de tuberculoză latentă sau activă în cazurile în care IDR nu este fiabil, cum ar fi în prezența tuberculozei active sau diseminate și a bolii latente la sugarii foarte tineri și la pacienții imunocompromiși.