Dezvoltarea unui model hepatic fibrotic indus de etanol la peștele zebră pentru a studia progenitorul
Introducere
În ciuda capacității regenerative remarcabile a hepatocitelor 1, care sunt principalul tip de celule parenchimatoase ale ficatului, insuficiența hepatică cronică afectează această capacitate, ducând la celule progenitoare hepatice regenerative (HPC) 2.
Afectarea hepatică cronică provine în principal din abuzul de alcool, virusul hepatitei C cronice (VHC) 3 și boala hepatică grasă nealcoolică (NAFLD) 4. Aceasta duce la o fibroză hepatică susținută, care este asociată cu acumularea proteinelor din matricea extracelulară (ECM). Acumularea persistentă a ECM distorsionează arhitectura hepatică intactă prin formarea țesutului cicatricial fibros 5, care duce ulterior la ciroză cu morbiditate și mortalitate ridicată. S-au făcut multe încercări de atenuare a răspunsului fibrotic în primul rând prin concentrarea asupra inhibării citokinelor și a miofibroblastelor activate profibrogen 6. Acesta din urmă este derivat în principal din celulele stelate hepatice (HSC), principalele celule parenchimatoase non-hepatice responsabile. De formarea cicatricilor hepatice 4. Cu toate acestea, terapiile regenerative care stimulează sursele celulare endogene, inclusiv CAH-urile pentru a regenera hepatocitele în prezența insultelor fibrogene susținute, așteaptă investigații suplimentare.
Multe modele experimentale de fibroză hepatică au fost descrise la mamifere. Injecția repetitivă de tetraclorură de carbon (CCl 4) a fost utilizată pe scară largă pentru a induce fibroza hepatică la șoareci și șobolani model 7. Când este combinat cu o dietă bogată în grăsimi (HF), alcoolul duce la o reglare substanțială a expresiei genelor profibrogene și la fibroza hepatică 8. Deși steatoza (acumularea de lipide) rezultă din expunerea acută la alcool, face ficatul susceptibil la leziuni hepatice mai severe 9.
Peștele zebră, Danio rerio, a apărut ca un sistem valoros de model de vertebrate pentru studiul regenerării. Deși alte vertebrate inferioare, cum ar fi tritonii și axolotelurile, au o capacitate remarcabilă de regenerare, peștele zebră are avantaje față de alte sisteme model în ceea ce privește strategiile de manipulare genetică și vizualizare necesare pentru a manipula potențialul regenerativ.10 factori. studierea bolilor alcoolice hepatice (ALD) prin simpla adăugare de etanol (EtOH) în apa lor. Expunerea acută la EtOH la pești zebri larvați și adulți a cauzat steatoză hepatică 11-13. Când peștii zebra adulți au primit expunere prelungită la EtOH, s-a observat depunerea de colagen cu reglarea în sus a genelor legate de fibroză 14. Cu toate acestea, este necesară dezvoltarea de modele pentru studierea regenerării ficatului în răspunsul la EtOH ca stimulant fibrogen.
Abonament necesar. Vă rugăm să recomandați JoVE bibliotecarului dvs.
Protocol
Peștele zebră a fost crescut și crescut folosind un protocol standard care îndeplinește criteriile Institutului Național de Sănătate și aprobat de Comitetul instituțional de îngrijire și utilizare a animalelor din Georgia Institute of Technology.