Efectele antrenamentului neurodermatitei Gießen asupra stării pielii și a experienței de stres - Descărcare gratuită PDF
Efectele instruirii neurodermatitei Gießen asupra stării pielii și a experienței de stres Disertație inaugurală pentru obținerea gradului de doctor al secției medicale a Universității Justus Liebig Gießen prezentată de Michael Hartmut Schock de la Gießen Gießen 2017
De la Centrul medical pentru psihoneuroimunologie Clinica pentru psihosomatică Director: Prof. univ. Dr. med. Kruse de la Universitatea Justus Liebig Giessen Recenzant: Recenzant: Prof. Dr. med. Eva Peters Prof. Dr. med. Thilo Jakob Ziua disputelor: 07.08.2018
2.8.3 MĂSURĂRI ELISA (IMUNOASAY-ENZYME-LINKED) 31 2.8.4 FACS (ORGANIZAREA CELULELOR ACTIVATE CU FLUORESCENȚA) 32 2.9 METODE DE COLECȚIE ȘI MĂSURARE 37 2.9.1 MATERIALE DE LABORATOR ȘI ECHIPAMENTE DE MUNCĂ 37 2.9.2 MĂSURI DE ECHIPAMENTE 42. 2.9.4 MĂSURĂRI FACS 46 2.10 STATISTICI 49 2.10.1 GESTIONAREA DATELOR 49 2.10.2 FORMA DE ANALIZĂ ȘI REZUMATUL EȘANTIONULUI 49 2.10.3 ANALIZA DESCRIPTIVĂ 50 2.10.4 EVALUARE STATISTICĂ 50 3 REZULTATE 52 3.1 DATE DE BAZĂ 52 3.2 REZULTATE DE INVESTIGARE 53 3.2.2 CHESTIONARUL 54 3.2.3 CORTISOL, BDNF, SLURP-1 ȘI IGE 58 3.2.4 IMMUNSTATUS 60 3.2.5 L-MFOCIT T-REGULATOR 62 3.2.6 CELULE DENDRITICE 64 3.3 EVENIMENTE NEAȘTEPTATE 66 4 DISCUȚIE 67 4.1 DISCUȚIA REZULTATELOR 67 4.1 .1 CONDIȚIA ÎMBUNĂTĂȚIRII PIELEI DATRE ANTRENAMENTULUI 67 4.1.2 ANXIETATEA REDUSĂ DATĂ DE DEȘEURI SEMNIFICATIVE ALE SCORURILOR STAI-X1 68 4.1.3 FĂRĂ MODIFICĂRI ALE STRESULUI ȘI A COPINGURILOR 70 4.1.4 MICI MODIFICĂRI ÎN CONCONCERUL SERIC MEDIATORII DE STRES 71 4.1.5 ANALIZELE FACS AFIȘĂ SCHIMBĂRI ÎN POPULAȚIILE DE MONOCITE ȘI CELULE DE MEMORIE T 75 4.2 LIMITĂRILE MUNCII 79
4.3 CONCLUZIE 83 4.4 PROSPECTIVE PENTRU ÎNTREBĂRI NERĂSPUNS ȘI RĂSPUNSURI 85 5 REZUMAT EXECUTIV 87 6 REZUMAT 88 7 LISTA ABREVIERILOR 89 8 LISTA FIGURILOR 91 9 LISTA TABELELOR 92 10 DIRECTORUL LITERATURII 94 11 ANEXE 114 11.1 DOCUMENTARE DE REFERINȚĂ 114 11.1
Introducere 1.5 Întrebarea prezentei lucrări Scopul lucrării prezentate a fost de a evalua influențele programului de instruire Giessen asupra cursului AD din punct de vedere psihoneuroimunologic. În acest scop, ar trebui să se răspundă la următoarele întrebări: Participarea la un curs de formare reduce clinic activitatea dermatitei atopice? o Scorează activitatea inflamatorie a pielii valorile SCORAD? Pot fi găsite modificări în rapoartele proprii ale participanților cu privire la experiența stresului, starea de gestionare a stresului și sănătatea mentală și fizică? o Există schimbări semnificative în calitatea vieții și mâncărime? o Există modificări ale sentimentelor de stres și anxietate? o Se schimbă comportamentul de coping psihomotor? o Există modificări în percepția sănătății și tendința de a somatiza? Se pot determina modificările nivelurilor mediatorului de stres ale cortizolului, BDNF, SLURP-1 și IgE? Există modificări ale populației de celule de monocite, celule T-reglatoare sau celule dendritice? 23
Metodologie 2.7 Cursul studiului Planificarea studiului a început pe 24 decembrie 2014. După ce cererea de etică a fost aprobată pe 21 ianuarie 2016, a început recrutarea. Cursurile de formare au avut loc în Giessen în medie de cinci ori pe an, cu un număr de participanți între 6 și 10 persoane. Dintre acestea, între 6 și 8 persoane ar putea fi de obicei recrutate, astfel încât recrutarea și colectarea probelor de sânge a durat un an bun. Rata crescută a abandonului a avut loc la început, o problemă care este discutată împreună cu soluțiile sale în secțiunea 4.2. Recrutarea grupurilor de control a fost mai puțin problematică, majoritatea venind direct de la Giessen, deci călătoriile mai lungi nu erau o problemă. În acest moment, sistemul informațional și indemnizația erau pe deplin stabilite. Măsurătorile Elisa și FACS au fost apoi efectuate într-o perioadă relativ scurtă de câteva săptămâni pentru a minimiza influențele externe cauzate de fluctuațiile de temperatură și umiditate. Numărul de n = 40 de subiecți pe brațul de studiu vizat în protocolul de studiu nu a putut fi atins din cauza ratei ridicate a abandonului. Evaluarea a fost efectuată cu 55 de persoane testate. 27
Metodă în care celulele cu anticorpii doriți sunt măsurați separat de alte celule și se determină numărul lor. Pentru calibrarea măsurătorilor, se face o măsurare de compensare la început. Anticorpii marcați cu coloranți sunt aplicați pe purtători de măsurare artificiali, așa-numiții margele, corespunzătoare celulelor, și se măsoară absorbția lor de lumină. În acest fel, zonele pentru porțile descrise mai sus în text pot fi definite. În plus, fiecare măsurare necesită un control negativ, izotipul. Acest anticorp marcat cu colorant se leagă nespecific de toate celulele și este comparat cu rezultatele ulterioare ale măsurătorilor. Aceasta este pentru a se asigura că celulele țintă pot fi identificate corect. În cele ce urmează, strategiile de închidere a populațiilor țintă de celule sunt explicate folosind diagrame. Pe baza porților formate de spectrele laserului, celulele marcate cu anticorpi pot fi selectate în mod specific. Rezultatele sunt prezentate în procente de celule în raport cu cantitatea totală din grupul anterior (concentrația mamă). 33
Metodologie 2.8.4.1 Starea imunitară cu populații de monocite și celule ucigașe naturale Toate evenimentele Resturi celulare FSC> 20 P1 Celule vii Apopt. Celule 7-AAD Celule vitale CD3 + CD19- CD3- CD19 + CD16 + CD56 + CD3 + CD4 + CD3 + CD19 + celule T celule B celule NK celule T-helper nachrα7 + nachrα7 + nachrα7 + nachrα7 + celule e aglomerate nachrα7 + celule T după rα7 + B celule Celule nachrα7 + celule Th CD14 + CD16 + monocite nachrα7 + nachrα7 + monocite Monocite clasice CD14 ++ CD16- monocite intermediare CD14 ++ CD16 + CD14 + CD16 ++ monocite neclasice Figura 3: Strategia de control pentru măsurarea stării imune 34
Metodologie 2.8.4.2 Celule T reglatoare și toate evenimentele asociate Resturi celulare FSC> 20 celule vii Alte celule Limfocite T CD3- CD3 + T CD8 + CD4 + T celule supresoare T celule ajutătoare CD45RA + CCR4- CD45RA- CCR4 + CD4 + CD25 + Active T celule helper T. Celule auxiliare CD4 + limfocite T-reglatoare CD127lo CD25 + FoxP3 + FoxP3 + T-reg. Limfocite Alte FoxP3- CD127lo Limfocite T-reglatoare CD45RA + CCR4- CD127lo T-regulat naiv. Limfocite CD45RA- CCR4 + CD127lo Celule de memorie cu reglare T Figura 4: Strategie de control pentru măsurarea populațiilor de limfocite cu reglare T 35
Metodologie 2.8.4.3 Celule dendritice mieloide și plasmocitoide Toate evenimentele Resturi celulare FSC> 20 celule vii Apopt. Celule 7-AAD celule vitale Monocite celule B CD14 + CD19- CD14- CD19 + CD14- CD19- non-mono-non-celule CD304 + CD11c + CD1c + CD11c + CD141 + CD11c + pdc mdc1 mdc2 CD86 + CD86- CD86 + CD86- CD86 + CD86- Act naiv pdc. Mdc1 Naiv mdc1 act. Mdc2 Naiv mdc2 Figura 5: Strategia de gating pentru identificarea celulelor dendritice 36
Metodologie Este utilizat testul Dunn-Bonferroni, care utilizează comparații de valori medii asociate pentru a furniza informații despre diferențe semnificative între datele individuale de examinare ale grupurilor. Statistica testului Friedman este dată ca Q, statistica testului Dunn-Bonferroni ca z. Mărimea efectului testării post-hoc este notată de coeficientul de corelație r conform Pearson. Probabilitățile de eroare de p 0,05 s-au presupus a fi semnificative, p 0,01 ca fiind extrem de semnificative și s-a presupus o tendință între p 0,051 și p 0,099. În fiecare figură, valorile medii ale grupurilor au fost prezentate cu erori standard și * este considerat semnificativ și ** este foarte semnificativ. 51
Rezultate 3 Rezultate 3.1 Date de bază La momentul redactării disertației, 85 de persoane testate au luat parte la studiu; În evaluarea rezultatelor ar putea fi incluși 14 bărbați și 41 de femei cu o vârstă medie de 31 de ani. Cu tabelele încrucișate și testul Chi², diferențele semnificative în distribuția de gen ar putea fi excluse. Distribuțiile indicelui de masă corporală (IMC) și nivelul de educație au fost examinate prin intermediul unui test al omogenității variațiilor și ANOVA unidirecțională. Și aici nu au existat diferențe semnificative. Tabelul 12: Date de bază ale tuturor participanților la studiu și distribuția acestora pe diferite grupuri (informații în valoare medie (MW) și deviație standard (SD)) Grup de antrenament general (SND) Grup de control AD (KND) Grup de control sănătos (KO) Rezultatul statului. Testarea participanților incluzând abandonul 85 45 20 20 Participanții au inclus 55 16 19 20 Sex (bărbat/femeie), total în% 14 (25,5)/41 (74,5) 3 (18,8)/13 (81, 2) 5 (26,3)/14 (73,7) 6 (30)/14 (70) χ² (1) = 0,559, exact p = 0,391 Vârstă IMC MW SD MW SD 30,83 33,63 29, 53 29,85 11,2 14,19 9,98 9,53 23,41 23,05 24,47 22,71 4,38 4,34 4,83 3,98 Levene p = 0,192 F (1,53) = 0,242, p = 0,624 Levene p = 0,684 F (1,53) = 0,827, p = 0,137 52
Rezultate 3.2 Rezultate ale studiului 3.2.1 Parametrul țintă principal SCORAD Parametrul țintă principal pentru evaluarea succesului instruirii a fost cursul SCORAD pe o perioadă de 3 luni. Testul Friedman a arătat diferențe semnificative de grup în grupul SND (Q (2) = 15,5; p