Examinarea și caracterizarea unui special
Technische Universität Dresden Facultatea de Matematică și Științe Naturale Institutul de Zoologie Catedra de Fiziologie Celulară Moleculară și Endocrinologie Examinarea și caracterizarea unui extract special de rubarbă într-un model animal pentru disertația inaugurală climacterică pentru obținerea gradului de Doctor rerum naturalium la Universitatea Tehnică din Dresda prezentată de Dipl. Anja Papke din Dresda Dresda, 7 august. 010
Recenzent: Prof. Dr. Institutul de Zoologie Günter Vollmer TU Dresda Prof. Dr. Institutul de microbiologie aplicată Alois Jungbauer Universitatea de Resurse Naturale și Științe ale Vieții, Ziua Apărării din Viena: 4.11.100
Asigurare Prin prezenta afirm că am pregătit lucrarea de față cu titlul: Testarea și caracterizarea unui extract special de rubarbă într-un model experimental animal pentru climacteric fără ajutorul nejustificat de la terți și fără a utiliza alte ajutoare decât cele specificate. Gândurile luate direct sau indirect din surse externe sunt marcate ca atare. Teza nu a fost trimisă unei alte autorități de examinare, nici în Germania, nici în străinătate, în aceeași formă sau într-o formă similară. Dresda, 7 august 2010 Anja Papke
Pentru familia și prietenii mei, pentru sprijinul lor din ultimii ani.
CUPRINS 5.4 EXAMINAREA DIFERITELOR LINII DE CELULE CU PRIVIRE LA ADECVAREA LOR CA MODEL VITRO PENTRU EXAMINAREA EFECTELOR CAUZATE DE ERR 731. 1 5.5 REZUMATUL REZULTATELOR EXPRIMĂRII MRNA A EXPERIMENTELOR ANIMALE V1-V3. 16 6 DISCUȚIE. 19 6.1 AHR ȘI GENE REGLEMENTATE AHR ADECVABILE CA GENE MARKER PENTRU EFECTE OESTROGENICE. 130 6. EVALUAREA CONTROLELOR UTILIZATE. 13 6.3 SIGURANȚA ERR 731 PRIVIND MODIFICĂRILE PROLIFERATIVE ÎN UTER. 137 6.4 EFECTELE ERR 731 ÎN ORGANELE EXAMINATE. 140 6.4.1 Efecte asupra greutății corporale. 141 6.4. Efecte în uter. 141 6.4.3 Efecte la nivelul osului. 145 6.4.4 Efecte asupra ficatului. 145 6.5 MECANISME POSIBILE ALE ERR 731. 146 6.6 EXAMINAREA DIFERITELOR LINII DE CELULE CU PRIVIRE LA ADEVĂRAREA LOR CA MODEL VITRO PENTRU EXAMINAREA EFECTELOR CONVOCATE DE ERR 731. 154 7 CONCLUZIE ȘI PERSPECTIVE. 156 LISTA LITERATURII. 158 ANEXĂ. 178 ILUSTRATII. 178 LISTA FIGURILOR. 181 LISTA TABELELOR. 186
LISTA ABREVIERILOR Lista abrevierilor Abreviere Semnificație 1A Citocrom C oxidază subunitate 1A Fig. Figura AF-1 și - Funcția de activare 1 și AhR Receptor de arilhidrocarbură AK Anticorpi AP-1 Activare proteină1 APS Persulfat de amoniu Aqua bidest Apă dublă distilată AhRKO BSA AlbuminR Knock-Out bp Perechi de baze BCA proteina de legare a calciului C3 complement C3 CaBP9k 9kDa ADNc complementar DNA Clu clusterin CYP1A1 citocromul P450-1A1 d zi domeniu de legare dATP DNA DBD Desoxyadenosintriphophat DCC pe dextran tratat cu cărbune FILTRAT FBS dCTP dezoxicitozină trifosfat DEPC dietil pirocarbonat dGTP deoxiguanosine trifosfat mediu Eagle modificat DMEM Dulbecco DMSO dimetil sulfoxid de acid dezoxiribonucleic DNA dNTP deoxiribonucleotidă trifosfat DPN Diarilpropilnitrilii I.
LISTA ABREVIERILOR Abreviere Semnificație dttp Deoxitimidin trifosfat EE -benzoat EDTA ER ERE ERαKO ERβKO EtOH FKS g Gst-Ya h HPLC-H O HRP HT Hsp 17β-estradiol β-estrogen-responsive 3-benzoatrogenic acid etilendiaminetetra-acetic ERαKO Etanol vițel fetal ser de grame glutation-S-transferază acum prin cromatografie lichidă de înaltă presiune (HPLC) apă purificată hrean peroxidază (hrean peroxidază) terapie hormonală șoc termic proteină IGF-1 insulină factor de creștere 1 IGF-1R IGF-1 receptor IOD densitate optică integrală kda kilodalton kg Kg greutate corporală Ki67 antigen Ki67 specific proliferării KO knock-out LBD ligand domeniu de legare M molar mg miligram min minut ml mililitru MMLV-RT Moloney murin leucemia virus revers transcriptaza II
LISTA ABREVIERILOR Abreviere Semnificație mrna messenger-rna NF-кB Factor nuclear кb Organizația OCDE pentru Cooperare și Dezvoltare Economică ovx ovariectomizat/ovariectomizat salină tamponată cu fosfat PBS PBST fosfat cu soluție salină cu 0,1% Tween 0 PCNA celulă proliferantă antigen nuclear (proliferare de celule nucleare) Reacție în lanț PMSF fenilmetilsulfonil fluorură PPT propilpirazoletriol PR receptor de progesteron ARN acid ribonucleic rpm rotații pe minut RT temperatura camerei qpcr în timp real cantitativ PCR sc modulator subcutanat al receptorului selectiv al estrogenului SERM Modulatori selectivi al receptorului estrogen al SERM SDS sodiu dodecil sulfat proteină de stimulare SP-1 acționată în mod fals 1 Tab