Realizat în Institutul German pentru Cercetări Nutritive. Trimis de departament

Disertație A. Winchenbach Realizată în Institutul german de cercetare nutrițională, prezentată de Departamentul de Medicină Veterinară din Universitatea Liberă din Berlin. Fișierul Doktors: /// g /Sassadat/Diss/UB/winch/index.htm (1 din 6) [07/03/2000 18:54:54]

Disertație A. Winchenbach de medicină veterinară la Universitatea Liberă din Berlin prezentată de medicul veterinar Andrea Winchenbach din Salzhemmendorf Berlin 1998 Număr revistă: 2172 Cuprins Pagina 1. Introducere 1 2. Lista literaturii 3 2.1. Malabsorbția lactozei 3 2.2. Prezentare generală a tipurilor de germeni utilizați la producerea produselor lactate fermentate 7 2.3. Ss-galactozidazele 8 2.3.1. Ss-galactozidaza intestinală (proprie a gazdei) 8 2.3.2. Ss-galactozidaza microbiană 12 2.4. Toleranța produselor lactate fermentate de către malabsorberii lactozei 2.5. Uciderea „microorganismelor” sau „lactobacililor” cu raze γ 13 18 fișier: /// g /Sassadat/Diss/UB/winch/index.htm (2 din 6) [03.07.2000 18:54:54]

Disertație A. Winchenbach 3.3.2. Obținerea omogenizărilor mucoasei cu determinarea ulterioară a activității ß-galactozidazei intestinale în mini-porcul Göttingen 3.3.3. Obținerea omogenizărilor mucoasei cu determinarea ulterioară a activității β-galactozidazei intestinale la șobolani 3.3.4. Determinarea activităților ß-galactozidazei și uciderea germenilor în suspensiile de lactobacili după tratamentul cu radiații ionizante 3.4. Investigația digestiei lactozei și a activității ß-galactozidazei la porcii miniatura gnotobiotici Göttingen 41 42 42 44 3.4.1. Animale experimentale 44 3.4.2. Păstrarea 44 3.4.3. Dietele 45 3.4.4. Experiment de hrănire 46 3.4.5. Eșantionare și tratament 47 3.4.6. Comenzi sterile 47 3.5. Investigarea digestiei lactozei și a activității ß-galactozidazei la șobolani gnotobiotici 48 3.5.1. Animale experimentale 48 3.5.2. Păstrarea 48 3.5.3. Dietele 48 3.5.4. Experiment de hrănire 49 3.5.5. Eșantionare și tratament 49 3.5.6. Controale sterile 49 3.6. Evaluare statistică 50 4. Rezultate 51 4.1. Curba de creștere a Lactobacillus delbrückii ssp. bulgaricus 709-1 51 fișier: /// g /Sassadat/Diss/UB/winch/index.htm (4 din 6) [03.07.2000 18:54:54]

Disertație A. Winchenbach 4.8.5. Numărul de microbi în dietă și în fecalele șobolanilor după administrarea lactobacililor viabili 73 5. Discuție 76 5.1. Teste preliminare 76 5.1.1. Condițiile de creștere și puritatea tulpinii de lactobacili utilizate în experiment 5.1.2. Activitățile ß-galactozidazei în probe după digestia in vitro într-un amestec de pepsină/HCI 5.1.3. Activitatea ß-galactozidazei mucoasei proprii a gazdei în intestinul subțire al mini-porcilor și șobolanilor din Göttingen 5.1.4. Influența iradierii cu raze γ asupra activității ß-galactozidazei și starea de germinare a Lactobacillus delbrückii ssp. bulgaricus 5.2. Cantitatea de lactoză, activitatea ß-galactozidazei și numărul de bacterii din fecalele mini-porci gnotobiotici Göttingen după ce au consumat trei diete de chefir preparate diferit 5.3. Cantitatea de lactoză, activitatea ß-galactozidazei și numărul de bacterii din fecalele șobolanilor gnotobiotici după ce au mâncat trei mese de chefir preparate diferit 76 77 79 80 83 90 6. Rezumat 92 Rezumat 7. Bibliografie 94 8. Lista abrevierilor 114 9. Anexa 115 Recunoaștere fișier CV:/g /Sassadat/Diss/UB/winch/index.htm (6 din 6) [07/03/2000 18:54:54]

Disertație A. Winchenbach - Capitolul 4: Rezultate 4. Rezultate 4.1 Curba de creștere a Lactobacillus delbrückii ssp. bulgaricus 709-1 Pentru lucrare a fost de cea mai mare importanță obținerea celui mai mare randament posibil de lactobacili cu ß-galactozidaza conținută. Din pentru Lactobacillus delbrückii ssp. bulgaricus 709-1 a pregătit o curbă de creștere exemplară într-o zi, s-a putut citi că punctul în care faza log a creșterii germenilor se transformă în faza staționară, adică în care mor cât mai mulți germeni pe măsură ce apar, a fost atins după o perioadă de incubare de 14 ore. Prin urmare, germenii trebuie recoltați și prelucrați după 14 ore, dacă este posibil, pentru a obține o masă optimă de germeni vii. Fig. 1 prezintă curba pentru creșterea Lactobacillus delbrückii ssp. bulgaricus 709-1. Fig. 1: Curba de creștere pentru Lactobacillus delbrückii ssp. bulgaricus 709-1, cultivare în bulion MRS la 37 ° C, indicație a unităților care formează colonii în jurnal (a se vedea, de asemenea, Tabelul 3 din apendice) 4.2. /winch/results.htm (1 din 26) [07/03/2000 18:57:06]

Disertație A. Winchenbach - Capitolul 4: Rezultate d. La pH 4 și măsurarea β-galactozidazei totale (după tratamentul cu ultrasunete), s-a înregistrat în general o scădere în probele iradiate pe întreaga perioadă de măsurare. După incubare la 37 ° C timp de 120 minute, 519 UI/l au fost încă măsurați în proba de kefir iradiat și 543 UI/l în proba tampon. În ambele probe neradiate (în ambele 1040 UI/l) a existat chiar o creștere a activității dincolo de activitatea de 750 UI/l la începutul incubației după 120 de minute (FIG. 5). Fig. 2: Activități ale ß-galactozidazei libere în 4 probe diferite cu lactobacili după incubare cu un amestec de pepsină/HCI la pH 2 (determinat cu o-npg ca substrat) (vezi și Tabelul 4 din apendice). neidentificat/puf. = pelet de lactobacili neiradiat resuspendat în tampon cel mai bun./kef. = pelet de lactobacili neiradiat resuspendat în kefir cel mai bun./puf. = Pelet de lactobacili iradiat cu 20 kg resusp. în ordine tampon/cheie = Pelet de lactobacili iradiat cu 20 kg resusp. în fișierul Kefir: /// g /Sassadat/Diss/UB/winch/results.htm (3 din 26) [07/03/2000 18:57:06]

Disertație A. Winchenbach - Capitolul 4: Rezultate Fig. 3: Activități ale ß-galactozidazei libere în 4 probe diferite cu lactobacili după incubare cu un amestec de pepsină/HCI la pH 4 (determinat cu o-npg ca substrat) (vezi și Tab 5 în anexă). neidentificat/puf. = pelet de lactobacili neiradiat resuspendat în tampon unident./kef. = pelet de lactobacili neiradiat resuspendat în kefir cel mai bun./puf. = Pelet de lactobacili iradiat cu 20 kg resusp. în ordine tampon/cheie = Pelet de lactobacili iradiat cu 20 kg resusp. în fișierul Kefir: /// g /Sassadat/Diss/UB/winch/results.htm (4 din 26) [07/03/2000 18:57:06]

Disertație A. Winchenbach - Capitolul 4: Rezultate Fig. 4: Activități ale ß-galactozidazei totale în 4 probe diferite după incubare cu un amestec de pepsină/HCI la pH 2 (determinat cu o-npg ca substrat) (vezi și Tab. 6 din apendice). neidentificat/puf. = pelet de lactobacili neiradiat resuspendat în tampon unbest./kef. = pelet de lactobacili neiradiat resuspendat în kefir cel mai bun./puf. = Pelet de lactobacili iradiat cu 20 kg resusp. în ordine tampon/cheie = Pelet de lactobacili iradiat cu 20 kg resusp. în fișierul Kefir: /// g /Sassadat/Diss/UB/winch/results.htm (5 din 26) [07/03/2000 18:57:06]

Disertație A. Winchenbach - Capitolul 4: Rezultate gnotobiotice, dar păstrate convenționale) Curbele activităților ß-galactozidazei mucoasei prezentate în Fig. 6 în 6 secțiuni ale intestinului subțire (măsurate la pH 5,5) în 6 mini-porci din Göttingen au fost individuale pentru fiecare animal Cu toate acestea, în general, s-a constatat că activitățile din secțiunile anterioare ale intestinului subțire au fost cele mai mari până la 50% de la ieșirea gastrică la aproape toate animalele și apoi - cu excepția porcilor - au scăzut mai mult sau mai puțin brusc spre final. Porcul 6 a prezentat cea mai mare activitate de ß-galactozidază în mucoasă în ultima secțiune a intestinului subțire. Cea mai mare activitate a ß-galactozidazei mucoasei a fost găsită la porcul 4 cu 14,24 UI/g mucoasă (greutate umedă) la 30% segment de intestin subțire, urmat de porcul 2 cu 13,51 UI/g la 30% și 13,38 UI/g în 50% și din porcul 3 cu 13,28 UI/g mucoasă (greutate umedă) în 30% secțiunea intestinului subțire de la ieșirea gastrică. Fig. 6: Activitatea ß-galactozidazei de-a lungul intestinului subțire la mini-porci Göttingen de 12 săptămâni (6 animale), determinarea pe 6 secțiuni diferite ale intestinului subțire (determinată cu lactoză ca substrat; la pH 5,5) (vezi și Tabelul 8 din apendice ). fișier: /// g /Sassadat/Diss/UB/winch/results.htm (7 din 26) [07/03/2000 18:57:06]

Disertație A. Winchenbach - Capitolul 4: Rezultate Fig. 8: Influența condițiilor de iradiere (intensitatea și poziția iradierii) asupra activității ß-galactozidazei în pelete de lactobacili; Determinarea în 4 zile într-o lună (poziția de iradiere 3; fără tratament cu ultrasunete; determinată cu o-npg ca substrat) (vezi și Tabelul 10 din anexă) Fig. 9: Influența condițiilor de iradiere (intensitatea și poziția de iradiere) pe ß- Activitatea galactozidazei în pelete de lactobacili; Determinarea în 4 zile pe o perioadă de o lună (poziția de iradiere 7; fără tratament cu ultrasunete; determinat cu o-npg ca substrat) (vezi și Tabelul 11 din anexă) fișier: /// g/Sassadat/Diss/UB/winch/results. htm (10 din 26) [07/03/2000 18:57:06]

Disertație A. Winchenbach - Capitolul 4: Rezultate Fig. 10: Influența condițiilor de iradiere (intensitatea și poziția iradierii) asupra activității ß-galactozidazei în peletele de lactobacili; Determinarea în 4 zile într-o lună (poziția de iradiere 3; cu tratament cu ultrasunete; determinată cu o-npg ca substrat) (vezi și Tabelul 12 din anexă) Fig. 11: Influența condițiilor de iradiere (intensitatea și poziția iradierii) asupra ß- Activitatea galactozidazei în pelete de lactobacili; Determinarea în 4 zile pe o perioadă de o lună (poziția de iradiere 7; cu tratament cu ultrasunete; determinată cu o-npg ca substrat) (vezi și Tabelul 13 din anexă) fișier: /// g/Sassadat/Diss/UB/winch/results. htm (11 din 26) [07/03/2000 18:57:06]