Anticorpi împotriva peptidelor de gliadină deamidate - Descărcare gratuită PDF
Anticorpi împotriva peptidelor gliadinice deamidate Compararea diferitelor ELISA pentru diagnosticarea bolii celiace la copii Disertație pentru obținerea diplomei universitare Dr. med. la Facultatea de Medicină a Universității din Leipzig prezentată de: Maria Petzold (născută Ritter) născută la 3 iunie 1984 la Leipzig Supervizor: Prof. Dr. rer. nat. habil. Thomas Mothes a luat la Universitatea din Leipzig, Facultatea de Medicină, Institutul de Medicină de Laborator, Chimie Clinică și Diagnostic Molecular Decizia privind acordarea doctoratului din 27 septembrie 2011
Cuprins Descriere bibliografică Lista abrevierilor 1 Introducere. 11 1.1 Definiție. 11 1.2 Forme de boală celiacă și epidemiologie. 12 1.3 Diagnostic. 13 1.3.1 Simptome clinice. 13 1.3.2 Examen serologic. 14 1.3.3 Examen histologic. 15 1.4 Patogenie. 18 1.5 Peptide gliadine deamidate. 21 2 Obiective. 23 3 Metode. 25 3.1 Structura cursului. 25 3.2 Caracteristicile participanților. 29 3.3 Determinarea anticorpului. 31 3.4 Evaluarea statistică. 33 3.5 Critica metodologică. 35 4 rezultate. 37 4.1 Concentrațiile de anticorpi la pacienți și controale. 37 4.2 Analiza ROC. 39 4.3 Valori limită. 41 4.3.1 Valoarea limită a companiei. 41 4.3.2 Valoarea limită proprie. 42 4.3.3 Valoarea limită proprie pentru sensibilitate ridicată. 42 4.3.4 Valoarea limită proprie pentru specificitate ridicată. 44 4.3.5 Rezultatele testelor în combinație. 44
Cuprins 4.4 Ratioane de probabilitate și probabilitate post-test. 46 4.5 Concentrația anticorpilor și stadiul de mlaștină. 48 4.6 Dependența de vârstă a concentrației de anticorpi. 50 4.7 Concentrația anticorpilor și genul. 50 4.8 Repetabilitate. 53 4.9 Studii de caz. 53 4.9.1 Concentrațiile de anticorpi la pacienții tineri cu boală celiacă. 53 4.9.2 Boală inflamatorie cronică a intestinului. 54 4.9.3 Biopsia pozitivă rezultă în grupul de control. 55 4.9.4 Pacient cu boală celiacă cu rezultat negativ la biopsie. 56 4.9.5 Pacient cu deficit de IgA selectiv. 57 5 Discuție. 59 5.1 Compararea testelor DGP între ele. 59 5.2 Compararea testelor DGP cu testele de anticorpi împotriva gliadinei native. 60 5.3 Compararea testului DGP cu testele autoanticorpilor împotriva ttg. 61 5.4 Avantajele testelor combinate de anticorpi. 64 5.5 Interpretarea testului. 64 5.6 Când se poate renunța la biopsie? 68 6 Rezumat. 71 Bibliografie. 75 Lista tabelelor. 87 Lista figurilor. 88 Declarația de independență. 89 CV. 91 de publicații. 93 mulțumesc. 101
Diagnostic Mucoasă sănătoasă Mlaștină tip 1 Mlaștină tip 2 Mlaștină tip 3a Mlaștină tip 3b Mlaștină tip 3c Figura 4 Trăsături histologice ale etapelor mlaștinei Mucoasă sănătoasă: Membrana mucoasă are o arhitectură normală de villus și criptă. Tipul de mlaștină 1: arhitectura normală a mucoasei intestinului subțire, numai IEL sunt crescute. Marsh type 2: Criptele sunt alungite în comparație cu tipul 1. Tipul de mlaștină 3a: tip distructiv de boală celiacă cu atrofie moderată a vilozității și hiperplazie a criptelor. Tipul de mlaștină 3b: tip distructiv de boală celiacă cu atrofie profundă a vilozității. Mlaștină tip 3c: boală celiacă distructivă cu atrofie totală a vilozității. (Oberhuber 2001 (Marsh Type 1), toate celelalte imagini: A. Werner și V. Wiechman, Institutul Patologic, Clinica St. Georg ggmbh 2009). 17
Introducere Figura 6 Deamidarea gliadinei prin transglutaminaza tisulară Stânga: Transglutaminaza tisulară împarte amoniacul din reziduurile specifice de glutamină, rezultând reziduuri de glutamat (aminoacizi în codul dintr-o literă; glutamină = Q, acid glutamic = E, prolină = P, fenilalanină = F). Dreapta: Legarea anticorpilor (măsurată într-un test de luminiscență) de la serul unui pacient celiac la secvența nativă de gliadină QPQQPFP și la secvența deamidată QPEQPF. O iluminare mai puternică înseamnă o legătură mai puternică. (T. Mothes 2009) 22
Metode Figura 7 Organigramă pentru selectarea serului Din 340 de seruri care îndeplinesc criteriile de includere, au fost excluse un total de 35 de probe de ser. Din restul de 305 seruri, 142 au fost atribuite grupului de pacienți și 163 grupului de control conform criteriilor ESPGHAN. În grupul de pacienți a existat un participant cu un rezultat negativ al biopsiei, în grupul de control au existat un total de patru participanți a căror evaluare histologică a corespuns unui stadiu pozitiv Marsh. 28
Metode La 79 dintre pacienți, examenul histologic a relevat Marsh 3c, la 26 de pacienți Marsh 3b, iar alți 27 au fost clasificați ca Marsh 3a. Au fost indicate mai multe etape în evaluarea histologică, de ex. Marsh 3a 3c, pacienții au fost repartizați în stadiul cel mai înalt (în exemplul Marsh 3c). La patru pacienți, doar evaluarea a fost Marsh 3, cinci au fost clasificați ca Marsh 2. La un pacient cu boală celiacă latentă, evaluarea histologică a dus la Marsh 1 (TABELUL 3). Figura 8 Numărul de participanți și intervalul dintre prelevarea de probe de sânge La mai mult de 50% dintre participanții la studiu, sângele a fost prelevat între trei și zero zile înainte de biopsie. Un alt 16% dintre participanți au primit sângele prelevat cu 20 de zile înainte sau după biopsie. TABELUL 3 Numărul de pacienți după stadiul Mlaștinii Stadiul Mlaștină Mlaștină 1 Mlaștină 2 Mlaștină 3a Mlaștină 3b Mlaștină 3c Numărul de pacienți 1 5 27 26 79 La patru pacienți, a fost disponibilă doar clasificarea Marsh 3. 30