Laborator; Starea urinară

Starea urinei este examinarea de rutină a compoziției de urină cu metode de detectare calitativă și, dacă este necesar, cu determinări cantitative suplimentare.

Proprietăți normale ale urinei

Compoziția chimică a urinei variază foarte mult, în funcție de cantitatea și tipul de alimente. Excreția unor substanțe este, de asemenea, supusă unui ritm de zi și de noapte, astfel încât determinarea excreției zilnice trebuie efectuată la recoltarea de urină de 24 de ore.

culoare: Galben deschis până la galben închis în funcție de concentrația de urină.

roșiatic (hemoglobină)
roșu-maroniu (urobilinogen, porfirine)
galben maroniu - verzui (biliverdină, bilirubină)

Decolorarea urinară este adesea asociată cu boli ale ficatului și ale tractului biliar, dar poate fi cauzată și de medicamente sau de anumite alimente.

Urina proaspătă trebuie să fie limpede, poate rezulta tulbure

Precipitarea sărurilor slab solubile (CaPO4 sau CaCO3)
Celule sau bacterii (patologice!)

Proteinele nu precipită niciodată în urină proaspătă (acid uric!). În urina mai veche, posibil denaturate, proteinele insolubile pot duce la tulburare sau precipitații.

Volumul și greutatea specifică:

Cu un aport total de apă de 2 litri (1 litru de băuturi + 1 litru de alimente solide care conțin apă), 1-1,5 litri sunt excretați prin rinichi. 1 litru de urină cântărește 1002-1036 g, în funcție de concentrația sa. Volumul și greutatea specifică trebuie să se schimbe în sens opus, adică o greutate specifică mică indică un volum mare de urină și invers. Prin urmare, o greutate specifică de 1026 cu un volum zilnic de 2,5 litri nu este normală și sugerează excreția substanțelor care în mod normal nu sunt prezente în urină (diureză osmotică!).
Măsurarea se face cu aerometrul.

Reacție urinară (valoarea pH-ului):

Urina normală are de obicei o reacție ușor acidă (interval fiziologic pH 4,5 - 8). Chiar și în cazul acidozei metabolice, valoarea pH-ului nu va scădea sub 4,5, deoarece cantitatea crescută de protoni care sunt excretați este tamponată de NH3 și fosfat.

Sediment urinar:

Sedimentele de urină se obțin prin centrifugarea urinei proaspete. Un sediment normal conține 0-3 leucocite și 0 eritrocite pe câmp vizual, unele celule epiteliale, de multe ori cristale de sare sau cristale de acid uric și urate (sediment colorat în roșu de porfirine și urocromi).
Sedimentele de urină, pe de altă parte, nu trebuie să conțină bacterii (infecții ale tractului urinar!) Sau prea multe celule.

Compoziția urinară:

Apă 95-99%, solide 1-5%
Substanțe organice: - Uree (20-40 g) - Metabolizarea aminoacizilor
- Acid uric (1 g) - metabolismul purinelor
- Creatinină (1-2 g) - metabolism muscular
- Creatină (urmă)
- Aminoacizi (urme)
- Proteine (urme)
- Glucoza (urme)
- Galactoză (nedetectabilă)
- Lactoză (târziu în timpul sarcinii și în timpul alăptării)
- Precursori hem și produse de degradare

Substanțe anorganice: Electroliți (Cl-, Na +, K +, Ca2 +, Mg2 +, NH3

Componente urinare patologice

Cei mai comuni agenți patogeni care cauzează infecții ale tractului urinar, inclusiv E. coli, reduc azotatul (NO3-) prezent în urină la nitrit (NO2-). Un test pozitiv cu nitriți este, prin urmare, o indicație a unei infecții a tractului urinar.

Proteinuria este un simptom comun, dar nespecific în bolile renale. Când mecanismele de reabsorbție tubulară sunt deteriorate, proteine mici apar în special în urină. Pe de altă parte, capacitatea de reabsorbție a tubulilor poate fi, de asemenea, depășită, de ex. După traumatisme musculare, în plasmă apar cantități mari de mioglobină. Dacă glomerulii sunt deteriorați, una sau mai multe dintre diferitele bariere de filtrare glomerulare pot fi deteriorate.
Proteinurii benigne, crescute în rinichii sănătoși, care sunt de preferință observate până la vârsta de 30 de ani, reprezintă până la 90% din proteinurii din această grupă de vârstă (de exemplu, în timpul efortului fizic, stresului emoțional, hipotermiei, încălzirii sau sarcinii).
Proteinele pot fi detectate în urină în diferite moduri: precipitații de căldură, precipitații acide, formarea complexului de culoare (reactiv biuret) sau albastru Coomassie (Bradford).

Glucoza și alte zaharuri:

Concentrația limită în plasma sanguină, peste care se depășește capacitatea de resorbție, este cuprinsă între 10 și 12 mmol glucoză pe litru. În cazuri rare, glucozuria poate apărea, de asemenea, ca urmare a unui defect genetic la unul dintre transportatorii de Na +/glucoză.
La sfârșitul sarcinii și în timpul alăptării, lactoza poate fi excretată în urină.
Dacă galactoza sau fructoza apare în sânge, aceste două zaharuri sunt filtrate în rinichi, dar numai parțial reabsorbite.

aminoacizi:

Aminoacizii liberi se găsesc în toate fluidele corpului. De asemenea, sunt excretați în cantități mici în urină. Numai în afecțiunile hepatice sau metabolice severe, aminoacizii individuali apar în cantități mari în urină.

Reacțiile de detectare pot fi împărțite în două grupe:

Teste generale (test ninhidrina)
Teste specifice pentru aminoacizi individuali

Corpuri cetonice:

Corpurile cetonice (acetonă, acetoacetat și b-hidroxibutirat) apar în urină în timpul înfometării prelungite și în diabetul zaharat.

Bilirubina, ca produs de descompunere a hemoglobinei, este în mod normal excretată în bilă sub formă de diglucuronid. Deoarece nu numai bilirubina neconjugată, ci și cea conjugată se leagă ușor de albumină, bilirubina nu este excretată în rinichi. Bilirubina diglucuronidă este deplasată din albumină numai de acizii biliari și este excretată în urină dacă o cantitate mare de bilirubină diglucuronidă și acizi biliari intră în capilarele sanguine din cauza bolii. Prin urmare, o detectare pozitivă a bilirubinei în urină este întotdeauna un semn al bolii hepatice.

Urobilinogen:

Bilirubina care intră în intestin odată cu bila este redusă la urobilinogen și stercobilinogen de către bacterii. Majoritatea acestor pigmenți biliari intră în fecale, o mică parte este absorbită și revine în ficat prin vena portă, care - atâta timp cât celulele hepatice sunt sănătoase și funcționale - distrug majoritatea urobilinogenului sau stercobilinogenului absorbit sau reintră în bilă exclus. Restul mic de uro și stercobilinogen care este lăsat să treacă de ficat ajunge la rinichi și este excretat în urină.

Urobilinogenul este excretat din ce în ce mai mult în urină dacă capacitatea funcțională a ficatului este restrânsă (de exemplu, ciroză hepatică) sau supraîncărcată (de exemplu, în anemia hemolitică) sau dacă circulația portală a ficatului este ocolită. Cu obstrucția completă a căilor biliare, totuși, nu mai ajunge bilirubină în intestin, nu se mai poate forma urobilinogen și astfel nu se excretă urobilinogen în urină.

Experimente

Detectarea zaharurilor reducătoare cu reactiv Benedict

Atenție: dizaharidele de tip trehaloză (de exemplu zaharoză) nu reacționează cu reactivul Benedict deoarece și-au pierdut proprietățile de reducere.

Detectarea proteinelor prin gătirea probei și detectarea CaPO4 sau CaCO3

Principiul măsurării:

Fierberea urinei denaturează proteinele. Dacă sunt prezente proteine, ar trebui să apară turbiditate. Această probă nu este suficient de sensibilă pentru a da o reacție pozitivă cu un conținut normal de proteine în urină. Dacă urina este acidulată după fierbere, orice cristale de CaPO4 sau CaCO3 se vor dizolva.

Chimie uscată

Cu ajutorul benzilor de test, acum nu numai analize calitative, ci și cantitative pot fi efectuate într-un mod simplu. Reactivii corespunzători sunt sub formă uscată pe banda de testare (zona de reacție!).
Aceste benzi de testare sunt utilizate în mod regulat, în special pentru starea urinei.

Experimentul 1: starea urinară folosind o bandă de testare
Experimentul 2: detectarea cantitativă a glucozei și ALAT (GPT) în sânge (reflectometrie!)

Măsurarea acidului uric în urină

Fundamente teoretice

Metablolism

Când ADN-ul și ARN-ul sunt descompuse, se formează purine și pirimidine. Acesta din urmă poate fi reciclat sau introdus în ciclul Krebs prin acetat. Astfel, organismul poate câștiga energie din degradarea pirimidinelor într-o mică măsură prin oxidare în ciclul Krebs. Purinele nu pot fi metabolizate în același mod. Acestea sunt hidroxilate și excretate în urină sub formă de acid uric.
Purinele sunt conținute sub formă de ADN în fiecare celulă (cu excepția eritrocitelor!) Și sunt astfel eliberate atunci când celula moare. De asemenea, consumăm mai multe purine în fiecare zi cu mâncarea noastră (de exemplu, prin consumul de carne, pește, ceai, cafenea etc.!). O a treia sursă de purină este sinteza endogenă a purinei.
Cu o dietă normală, majoritatea purinelor zilnice sunt reciclate și utilizate în noua sinteză a nucleotidelor. Concentrația de acid uric în ser este, prin urmare, dependentă de viteza de producție sau eliminare. Acidul uric este filtrat, reabsorbit și secretat în rinichi. Raportul secreție-reabsorbție determină în consecință gradul de excreție.

Solubilitatea acidului uric

La multe mamifere (dar nu și la oameni) Uricase transformă acidul uric în alantoină mult mai solubilă. Acidul uric precipită de la o valoare de saturație de 400 mmol/L. Hiperuricemia poate duce la gută, care se manifestă prin depuneri de cristale de acid uric în articulații, rinichi și alte țesuturi.

Experiment practic

Principiul măsurării:

Dozare enzimatică conform metodei PAP (peroxidază/para-amino-fenazonă).
Acidul uric este transformat în alantoină, H2O2 și CO2 de către uricază în timp ce consumă O2 și 2 H2O.
Acid uric + O2 + 2 H2O ® alantoină + H2O2 + CO2 (uricază)
Cantitatea de H2O2 formată este proporțională cu concentrația substratului. Reducerea H2O2 la 2 H2O cu ajutorul peroxidazei este legată de oxidarea unui amestec incolor, care devine roșu. Concentrația de colorant măsurată fotometric este proporțională cu concentrația de acid uric din ser.

Observații:

Femeie 90 - 360 mmol/L
Man 150 - 480 mmol/L
Valorile variază în funcție de vârstă; abordare la
Femeile post-menopauzale valorile bărbaților.

1,8 - 3,6 mmol/L/zi (pe o dietă cu conținut scăzut de purină)
Cu o dietă bogată în purine sau boli cu moarte celulară extinsă (leucemie, reumatism), excreția acidului uric poate crește brusc.

Hiperuricemia se găsește la până la 20% din populația adultă. Cu toate acestea, doar 5% dintre acestea prezintă și simptome de gută. Aceasta înseamnă că hiperuricemia duce la gută doar într-o măsură limitată.
Facem diferența între două tipuri de hiperuricemie:

Hiperuricemie primară ca rezultat al tulburărilor moștenite ale metabolismului purinelor (biosinteză sau eliminare).
Hiperuricemie secundară datorată creșterii producției de purină (leucemie, tumoră), scăderii excreției de acid uric (insuficiență renală, intoxicație sau medicație) sau aportului excesiv de purine cu alimente.

Măsurarea α-amilazei în ser și urină

Fundamente teoretice

Rezervați polizaharide

În regnul vegetal, amidonul este cea mai importantă polizaharidă de rezervă, în regnul animal glicogen. Ambele sunt formate din lanțuri lungi și ramificate de glucoză. Amidonul există sub formă de amiloză (solubilă în apă, nu foarte ramificată) sau sub formă de amilopectină (slab solubilă, ramificată).
La om, glicogenul apare în principal în ficat și mușchi. Concentrația sa depinde direct de situația energetică din organism.

α-amilaza

α-amilaza hidrolizează legături a1,4, eliberând maltoză, maltotrioză sau oligozaharide mai lungi. A-amilaza este o endo-glicozidază, deoarece poate ataca și tăia glicogenul nu numai la bucățile de capăt, cum ar fi exo-glicozidaza, ci și între ele. Este sintetizat în principal în glandele exocrine ale pancreasului și în glandele salivare. Amilaza este, de asemenea, produsă de ficat, intestin subțire, rinichi și diverse carcinoame.
Concentrația scăzută de α-amilază găsită în sânge este de 40% din pancreas. Prezența lor este legată de o secreție bazolaterală eronată a celulelor glandei pancreatice. Distingem două izoenzime: a-amilaza pancreatică și cea exo-pancreatică (inhibare de anticorpi monoclonali!)
α-Amilaza este filtrată în rinichi (greutate moleculară mică!), dar o parte din ea este reabsorbită din nou.

Experiment practic

Principiul măsurării:

Oligozaharidele sintetice care au fost marcate anterior cu paranitrofenol sunt utilizate ca substrat. Pentru a proteja substratul de α-glucozidază, zahărul terminal este substituit pe grupările hidroxil C4 și C6. Odată ce α-amilaza a tăiat substratul pentru prima dată, excesul de α-glucozidază poate descompune ulterior substratul și astfel eliberează paranitrofenolul, care poate fi măsurat fotometric.
Viteza la care este eliberat paranitrofenolul este direct proporțională cu concentrația de α-amilază, deoarece atât substratul cât și α-glucozidaza sunt prezente în exces.

Măsurarea absorbției timp de 5 min la intervale de 1 min.
ΔE/min = creșterea concentrației medii în domeniul liniar
U (mmol/min) = DE/min x 1135 (per litru de ser)

Limite de măsurare:

Stabilitatea substratului și a enzimelor este limitată. Măsurarea este liniară numai între 5 și 2000 U/l.

Valori de referinta:

Valorile de referință depind de substratul utilizat, de tipul de mascare a zahărului terminal și de temperatura de reacție. Prin urmare, nu există valori standard absolute.

Valorile serice: până la 50 U/l
Valorile urinei: până la 290 U/l

Măsurarea concentrației de α-amilază în ser, precum și în urină servește la detectarea unei tulburări pancreatice. Pancreatita este o inflamație acută a pancreasului cauzată de abuzul de alcool sau de obstrucția biliară.

În pancreatita acută (leziune a membranei celulare) bariera epitelială a celulelor glandei este redusă. Joncțiunile strânse devin permeabile. Alfa-amilaza intră în sânge și este excretată din ce în ce mai mult în urină. Cu toate acestea, doar 75% dintre pacienții cu pancreatită acută prezintă o concentrație crescută de α-amilază în sânge. Pe de altă parte, excreția de urină este (aproape) întotdeauna crescută, deoarece reabsorbția tubulară este inhibată în pancreatită și se excretă mai multă α-amilază (clearance-ul crescut al α-amilazei!).
O scădere post-acută a concentrației de α-amilază în sânge poate indica necroză pancreatică sau pancreatită vindecată.

Dacă glandele salivare sunt inflamate (de exemplu oreion), concentrația de α-amilază din sânge este, de asemenea, crescută. Fie α-amilaza pancreatică, fie exopancreatică poate fi inhibată pentru diagnostic diferențial. În plus, alte enzime pancreatice se găsesc și în concentrații mari în sânge în pancreatită.

Articole noi

Ciclul citratului: Aproape toate metabolismele catabolice-
procesele duc la acid acetic activat, acetil-CoA. Apare din piruvat, care provine din glicoliză, în timpul oxidării b a acizilor grași, precum și în timpul descompunerii multor aminoacizi. [continua]

Activități enzimatice serice: Măsurarea activității enzimatice este un instrument important pentru detectarea și monitorizarea numeroaselor boli-
condiții. În bolile ficatului, inima și pancreasul sunt rezultatele enzimei-
reglementările sunt deseori indispensabile. [continua]

ficat: Faza de absorbție: absorbția alimentelor-
substanțe, vitamine și electroliți.
(Atenție: lipidele pătrund în corp prin conducta toracică - chilomicroni!). Faza foamei: în poziție verticală-
menținerea unui mediu intern constant. [continua]